बेंजोनेज और DNase के बीच अंतर

2024 लेखक: Alex Aldridge | [email protected]. अंतिम बार संशोधित: 2023-12-17 13:39

मुख्य अंतर – बेंजोनेज बनाम DNase

कई आणविक जीव विज्ञान तकनीकों के लिए न्यूक्लिक एसिड का क्षरण महत्वपूर्ण है। डीएनए और आरएनए के अवांछित टुकड़ों से छुटकारा पाने के लिए इसे पुनः संयोजक डीएनए प्रौद्योगिकी में व्यापक रूप से उपयोग किया जाता है। न्यूक्लिक एसिड डिग्रेडिंग एंजाइम को न्यूक्लीज कहा जाता है, और वे आवश्यक कार्य के आधार पर विभिन्न प्रकार के हो सकते हैं। डीएनए को नीचा दिखाने वाले न्यूक्लियस को DNases के रूप में जाना जाता है जबकि जो RNA को नीचा दिखाते हैं उन्हें RNases कहा जाता है। इन एंजाइमों का उपयोग ज्यादातर इन विट्रो प्रयोगों में किया जाता है जहां शुद्ध डीएनए, आरएनए या प्रोटीन को अलग करने के लिए इन विट्रो आणविक परीक्षण किए जाते हैं। बेंजोनेस एक प्रकार के न्यूक्लियस होते हैं जो डीएनए और आरएनए दोनों को नीचा दिखाते हैं जबकि डीएनएस केवल डीएनए को नीचा दिखाते हैं।यह बेंजोनेस और DNase के बीच महत्वपूर्ण अंतर है।

बेंजोनेस क्या है?

बेंजोनेज सेराटिया मार्सेसेंस से एक आनुवंशिक रूप से इंजीनियर एंडोन्यूक्लिज है। यह एंजाइम औद्योगिक पैमाने पर ई. कोलाई मेजबानों में निर्मित होता है। बेंजोनेस डबल-स्ट्रैंडेड डीएनए, लीनियर डीएनए, सर्कुलर डीएनए और सिंगल-स्ट्रैंडेड आरएनए को साफ करने में सक्षम है। इस प्रकार बेंजोनेज व्यावसायिक रूप से महत्वपूर्ण है। बेंजोनेस एंजाइम एक प्रोटीन डिमर है जिसमें 245 समान अमीनो एसिड होते हैं, ~ 30 kDa सबयूनिट दो आवश्यक डाइसल्फ़ाइड बांड के साथ। बेंजोनेस न्यूक्लिक एसिड को इसके 5' सिरे पर साफ करता है और इसके परिणामस्वरूप मुक्त 5' सिरों वाले टुकड़े बनते हैं। बेंजोनेस किसी भी क्रम में न्यूक्लिक एसिड को साफ कर सकता है लेकिन जीसी समृद्ध क्षेत्रों को तरजीह देता है।

बेंजोनेज को -20 ^{0C पर संग्रहित किया जाता है। एंजाइम गतिविधि के लिए इष्टतम पीएच 8.0 - 9.2 पाया गया है। बेंजोनेस के अनुप्रयोगों में प्रोटीन 2डी जेल वैद्युतकणसंचलन के लिए नमूना तैयार करना शामिल है जहां बेंजोनेज बाध्य न्यूक्लिक एसिड को हटाता है और पुनः संयोजक प्रोटीन की तैयारी से न्यूक्लिक एसिड संदूषक को हटाता है।इसका उपयोग प्रोटीन के अर्क की चिपचिपाहट को कम करने और सेल मिश्रण में कोशिकाओं के झुरमुट को रोकने के लिए भी किया जाता है।}

DNase क्या है?

DNase एक न्यूक्लियस, हाइड्रोलाइटिक एंजाइम है जो केवल डबल-स्ट्रैंडेड डीएनए को साफ करने में सक्षम है। DNases के दो मुख्य प्रकार हैं: DNase I और DNase II। DNase I डबल-स्ट्रैंडेड डीएनए को साफ करने में भाग लेता है ताकि 5 'मुक्त सिरों वाले पोलीन्यूक्लियोटाइड्स का उत्पादन किया जा सके। DNase II 3' मुक्त सिरों या ओवरहैंग्स के साथ पोलीन्यूक्लियोटाइड स्ट्रैंड बनाने के लिए डबल-स्ट्रैंडेड डीएनए को साफ करने में शामिल है।

DNase I

DNase I 7.0 - 8.0 के बीच इष्टतम pH पर कार्य करता है। एंजाइम गतिविधि कई आयनिक सहकारकों पर निर्भर करती है जिसमें शामिल हैं, Ca²⁺, Mg²⁺ या Mn^2+Mg2+ ^{और Mn}2+ ^{की गतिविधि DNase I के कार्य को तय करती है। Mg} की उपस्थिति में 2+^{, DNase I स्वतंत्र रूप से dsDNA के प्रत्येक स्ट्रैंड को साफ करता है। यह यादृच्छिक तरीके से होता है। इसके विपरीत, Mn}2+, ^{की उपस्थिति में एंजाइम दोनों डीएनए स्ट्रैंड को लगभग एक ही स्थान पर साफ करता है।इस दरार के परिणामस्वरूप दो प्रकार के डीएनए टुकड़े पैदा होंगे; एक प्रकार के कुंद सिरे वाले और दूसरे प्रकार के एक या दो न्यूक्लियोटाइड ओवरहैंग के साथ।}

चित्र 02: DNase

DNase II

DNase II 4.5-5.0 के इष्टतम pH पर कार्य करता है और इसकी गतिविधि के लिए द्विसंयोजक धातु आयनों की आवश्यकता होती है, DNase I के समान। DNase II के तंत्र को तीन मुख्य चरणों से मिलकर जाना जाता है।

डीएनए बैकबोन में कई सिंगल स्ट्रैंड ब्रेक प्रेरित होते हैं।
एसिड घुलनशील न्यूक्लियोटाइड और ऑलिगोन्यूक्लियोटाइड्स का उत्पादन होता है।
गैर-रैखिक हाइपरक्रोमिक बदलाव अंतिम चरण में होता है।

DNase एंजाइम के मुख्य अवरोधकों में धातु केलेटर, संक्रमण धातु और रसायन जैसे सोडियम डोडेसिल सल्फेट और β - मर्कैप्टोएथेनॉल शामिल हैं।

DNase के मुख्य अनुप्रयोगों में डीएनए मुक्त आरएनए अर्क और प्रोटीन अर्क तैयार करना, और इन विट्रो ट्रांसक्रिप्शन प्रयोगों के दौरान टेम्पलेट डीएनए को हटाना शामिल है।

बेंजोनेस और DNase के बीच समानताएं क्या हैं?

दोनों हाइड्रोलाइटिक एंजाइम हैं।
दोनों न्यूक्लियस हैं।
दोनों न्यूक्लिक एसिड के फॉस्फोडाइस्टर बांड को साफ करके भाग लेते हैं।
एंजाइम की गतिविधि को बनाए रखने के लिए दोनों को एक इष्टतम पीएच और भंडारण तापमान की आवश्यकता होती है।
एंजाइम के अवरोधकों में चेलेटिंग एजेंट, संक्रमण धातु और डिटर्जेंट रसायन शामिल हैं।
अनुप्रयोग मुख्य रूप से डीएनए, आरएनए और प्रोटीन के उच्च शुद्धता वाले अर्क प्राप्त करने पर केंद्रित हैं।
दोनों एंजाइम आनुवंशिक इंजीनियरिंग के माध्यम से उत्पादित किए जा सकते हैं।

बेंजोनेज और DNase में क्या अंतर है?

बेंजोनेज बनाम DNase
बेंजोनेज एक एंजाइम है जो डबल स्ट्रैंडेड डीएनए, रैखिक डीएनए, सर्कुलर डीएनए और आरएनए को साफ करने में सक्षम है।	DNase एक एंजाइम है जो डबल स्ट्रैंडेड डीएनए को साफ करने में सक्षम है।
एंजाइम के लिए सब्सट्रेट
डीएनए और आरएनए दोनों बेंजोनेस के लिए सबस्ट्रेट हैं।	डीएनए DNase के लिए सबस्ट्रेट है।
संरचना
बेंजोनेस की इष्टतम पीएच रेंज 7.0 -8.0 है	DNase I की इष्टतम pH रेंज 7.0 - 8.0 और DNase II 4.5 - 5.0 है।

सारांश – बेंजोनेज बनाम DNase

आणविक जीव विज्ञान और आनुवंशिक इंजीनियरिंग के संबंध में विभिन्न प्रयोगात्मक प्रक्रियाओं में न्यूक्लियस एंजाइम का व्यापक रूप से उपयोग किया जाता है।बेंज़ोनेज़ और DNase दो प्रकार के न्यूक्लियस हैं। बेंजोनेस डीएनए और आरएनए दोनों को नीचा दिखाने में शामिल है जबकि डीएनसे डबल-स्ट्रैंडेड डीएनए को साफ करने में शामिल है। यह बेंजोनेस और DNase के बीच मूल अंतर है। वर्तमान में, इन दोनों न्यूक्लियस प्रकारों को पुनः संयोजक डीएनए प्रौद्योगिकी के माध्यम से उत्पादित किया जाता है जो उच्च गुणवत्ता वाले एंजाइम उत्पन्न करता है जो अधिकतम उत्पादन के लिए अनुकूलित होते हैं।

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