पौधे और पशु डीएनए निष्कर्षण के बीच महत्वपूर्ण अंतर यह है कि पौधे डीएनए निष्कर्षण में, पशु डीएनए निष्कर्षण में सेलुलर सामग्री को मुक्त करने के लिए सूखी बर्फ या तरल नाइट्रोजन में ऊतक को पीसकर सेल की दीवार को तोड़ना आवश्यक है।, यह कदम उठाना आवश्यक नहीं है क्योंकि पशु कोशिकाओं में कोशिका भित्ति नहीं होती है।
जीनोमिक डीएनए पौधे और पशु कोशिकाओं की आनुवंशिक सामग्री है। जीनोमिक डीएनए प्रत्येक व्यक्तिगत पौधे या जानवर के लिए अद्वितीय है। आणविक अनुसंधान के लिए अच्छी गुणवत्ता वाले डीएनए का डीएनए निष्कर्षण एक पूर्वापेक्षा है। जीवों के डीएनए को पहचान, रोगों के निदान, विशिष्ट जीन और अनुक्रमों का पता लगाने, फोरेंसिक उद्देश्यों, पितृत्व परीक्षण, जीनोम अनुक्रमण, और दवाओं के विकास आदि के लिए निकाला जाता है।डीएनए निष्कर्षण विधि कोशिकाओं के प्रकार के आधार पर भिन्न होती है - चाहे वह पशु कोशिका हो या पादप कोशिका।
पौधे डीएनए निष्कर्षण क्या है?
पौधों की कोशिकाओं में डीएनए विभिन्न आणविक अध्ययनों के लिए निकाला जाता है। अक्षुण्ण, शुद्ध जीनोमिक डीएनए निकालने के लिए यह आवश्यक है। इसलिए, विभिन्न प्रकार के डीएनए निष्कर्षण प्रोटोकॉल हैं जो पशु कोशिकाओं से डीएनए निष्कर्षण प्रोटोकॉल से भिन्न हैं। ऐसा इसलिए है क्योंकि पादप कोशिकाओं में एक कोशिका भित्ति होती है जिसे सेलुलर सामग्री को बाहर निकालने के लिए तोड़ा जाना चाहिए।
निष्कर्षण आमतौर पर पौधे के ऊतकों को सूखी बर्फ या तरल नाइट्रोजन में मोर्टार और मूसल का उपयोग करके पीसकर किया जाता है। फिर कोशिका झिल्ली बाधित हो जाती है, और सेलुलर सामग्री को निष्कर्षण बफर में निकाल दिया जाता है। यह आमतौर पर एक डिटर्जेंट का उपयोग करके किया जाता है; SDS (सोडियम डोडेसिल सल्फेट) या CTAB (cetyltrimethylammonium bromide) बफर। जारी किए गए डीएनए को EDTA जैसे एक chelating एजेंट का उपयोग करके अंतर्जात न्यूक्लियस से सुरक्षित किया जाता है। इसके अलावा, क्लोरोफॉर्म या फिनोल का उपयोग करके प्रोटीन को डीएनए से अलग किया जाता है।
चित्र 01: प्लांट डीएनए एक्सट्रैक्शन
पौधे पॉलीसेकेराइड और पॉलीफेनोल्स को संश्लेषित करते हैं, जिसमें फ्लेवोनोइड और अन्य माध्यमिक मेटाबोलाइट्स शामिल हैं। ये यौगिक शुद्ध जीनोमिक डीएनए के निष्कर्षण में बाधा डालते हैं। इसलिए, अधिकांश पौधे डीएनए निष्कर्षण प्रोटोकॉल में इन यौगिकों को खत्म करने के लिए सीज़ियम क्लोराइड घनत्व ढाल तकनीक जैसे एक और कदम शामिल है।
अधिकांश डीएनए निष्कर्षण प्रोटोकॉल डीएनए निष्कर्षण के लिए ताजा पत्ती के नमूनों का उपयोग करने की सलाह देते हैं। कुछ विधियों में तरल नाइट्रोजन और फिनोल जैसे खतरनाक रसायन शामिल नहीं हैं। CTAB (Cetyl trimethylammonium bromide) प्रोटोकॉल एक लोकप्रिय प्लांट डीएनए निष्कर्षण प्रोटोकॉल है जो उच्च गुणवत्ता वाले प्लांट जीनोमिक डीएनए के निष्कर्षण की सुविधा प्रदान करता है। यह प्लांट डीएनए निष्कर्षण के लिए एक सरल, सुरक्षित, विश्वसनीय और लागत प्रभावी तरीका है।अधिकांश अन्य विधियाँ CTAB पद्धति के संशोधित संस्करण हैं।
पशु डीएनए निष्कर्षण क्या है?
पशु डीएनए निष्कर्षण आणविक विश्लेषण के लिए पशु कोशिकाओं से जीनोमिक डीएनए का निष्कर्षण है। पादप डीएनए निष्कर्षण के विपरीत, पशु कोशिकाओं के लिए कोशिका भित्ति का टूटना आवश्यक नहीं है क्योंकि उनमें कोशिका भित्ति की कमी होती है। रक्त कोशिकाएं सबसे सामान्य प्रकार की पशु कोशिकाएं हैं जिनका उपयोग विभिन्न उद्देश्यों के लिए किया जाता है।
चित्र 02: डीएनए निष्कर्षण
फिनोल-क्लोरोफॉर्म विधि रक्त कोशिकाओं के लिए सबसे अच्छे विकल्पों में से एक है। इस विधि से डीएनए निकालते समय डीएनए की उपज और गुणवत्ता अधिक होती है। यह एक तरल-तरल डीएनए निष्कर्षण प्रोटोकॉल है, और यह विधि अमिश्रणीय समाधानों में उनकी घुलनशीलता के आधार पर डीएनए अणुओं को अलग करती है।फिनोल, क्लोरोफॉर्म और आइसोमाइल अल्कोहल इस विधि के शीर्ष तीन तत्व हैं।
पौधे और पशु डीएनए निष्कर्षण के बीच समानताएं क्या हैं?
- पौधे और जानवरों दोनों के डीएनए निष्कर्षण के दौरान, कोशिका झिल्ली को बाधित होना चाहिए।
- डीएनए को अंतर्जात न्यूक्लियस से बचाना चाहिए।
- इसके अलावा, डीएनए की कतरन को रोका जाना चाहिए।
- पौधे के डीएनए और जानवरों के डीएनए के निष्कर्षण के लिए व्यावसायिक किट उपलब्ध हैं।
- अधिकांश पौधे और पशु डीएनए निष्कर्षण विधियों को निरंतर संशोधन और मानकीकरण की आवश्यकता होती है।
पौधे और जानवरों के डीएनए निष्कर्षण में क्या अंतर है?
पौधे और पशु डीएनए निष्कर्षण के बीच महत्वपूर्ण अंतर यह है कि पौधे के डीएनए निष्कर्षण के लिए सूखी बर्फ या तरल नाइट्रोजन में पौधे के ऊतकों को पीसने की आवश्यकता होती है ताकि कोशिका की दीवार टूट जाए जबकि पशु डीएनए निष्कर्षण के लिए इस कदम की आवश्यकता नहीं होती है क्योंकि वे पशु कोशिकाओं में कोशिका भित्ति नहीं होती है।सीटीएबी विधि पादप डीएनए निष्कर्षण के सर्वोत्तम तरीकों में से एक है जबकि फिनोल-क्लोरोफॉर्म विधि पशु डीएनए निष्कर्षण के सर्वोत्तम तरीकों में से एक है।
नीचे इन्फोग्राफिक पौधे और जानवरों के डीएनए निष्कर्षण के बीच अंतर को दर्शाता है।
सारांश - पौधे बनाम पशु डीएनए निष्कर्षण
विभिन्न प्रकार की कोशिकाओं से डीएनए निकालने के लिए विभिन्न तरीके उपलब्ध हैं। इसलिए, पौधे डीएनए निष्कर्षण प्रोटोकॉल पशु कोशिका डीएनए निष्कर्षण प्रोटोकॉल से भिन्न होते हैं। पादप डीएनए निष्कर्षण के लिए कोशिका भित्ति, कोशिका झिल्ली और परमाणु झिल्ली के विघटन की आवश्यकता होती है जबकि पशु डीएनए निष्कर्षण के लिए कोशिका झिल्ली और परमाणु झिल्ली के टूटने की आवश्यकता होती है। इससे भी महत्वपूर्ण बात यह है कि पशु कोशिका डीएनए निष्कर्षण को सूखी बर्फ या तरल नाइट्रोजन में पीसकर सेल की दीवारों के विघटन की आवश्यकता नहीं होती है।इस प्रकार, यह पौधे और पशु डीएनए निष्कर्षण के बीच महत्वपूर्ण अंतर है।
