जीनोमिक डीएनए और प्लास्मिड डीएनए आइसोलेशन के बीच महत्वपूर्ण अंतर यह है कि जीनोमिक डीएनए आइसोलेशन जीनोमिक डीएनए के निष्कर्षण को लक्षित करता है जबकि प्लास्मिड डीएनए आइसोलेशन बैक्टीरिया के प्लास्मिड डीएनए के निष्कर्षण को लक्षित करता है।
डीएनए आइसोलेशन एक रासायनिक प्रक्रिया है जो विभिन्न प्रजातियों या विभिन्न नमूनों से डीएनए को अलग करने के लिए प्रयोग की जाती है। डाउनस्ट्रीम आणविक जीव विज्ञान तकनीकों में डीएनए अलगाव महत्वपूर्ण है, जैसे कि जेल वैद्युतकणसंचलन, पोलीमरेज़ चेन रिएक्शन और डीएनए अनुक्रमण तकनीक। इसलिए, आणविक जैविक अध्ययनों में डीएनए का अलगाव एक आवश्यक रासायनिक प्रक्रिया है। अनुसंधान के उद्देश्य के आधार पर, कभी-कभी जीनोमिक डीएनए को अलग करना आवश्यक होता है।इसके अलावा, कुछ अध्ययन बैक्टीरिया से प्लास्मिड डीएनए को अलग करने पर ध्यान केंद्रित करते हैं। जीनोमिक डीएनए अलगाव एक प्रोकैरियोटिक या यूकेरियोटिक नमूने से जीनोमिक डीएनए को अलग करने की प्रक्रिया है। आइसोलेशन के चरण उस सेल के प्रकार के अनुसार भिन्न होते हैं जिसमें डीएनए अलग हो रहा है। प्लास्मिड डीएनए अलगाव एक जीवाणु कोशिका से प्लास्मिड डीएनए को अलग करने की प्रक्रिया है। जीनोमिक डीएनए अलगाव की तुलना में, प्लास्मिड डीएनए अलगाव में समग्र प्रक्रिया जटिल है।
जीनोमिक डीएनए आइसोलेशन क्या है?
जीनोमिक डीएनए आइसोलेशन एक जीव के पूरे जीनोमिक डीएनए को निकालने की प्रक्रिया है। इस विशेष प्रक्रिया में तीन मुख्य घटनाएं शामिल हैं। वे हैं, सेल लिसीज़ या न्यूक्लियर लिसिस, प्रोटीन डिग्रेडेशन या प्रोटियोलिसिस और जीनोमिक डीएनए का अवक्षेपण। सेल प्रकार के अनुसार lysis चरण भिन्न हो सकता है। प्रोकैरियोट्स में, चूंकि एक पेप्टिडोग्लाइकन कोशिका भित्ति होती है, इसलिए पहला कदम कोशिका भित्ति का टूटना होना चाहिए। दूसरी ओर, यूकेरियोट्स में, लसीका चरण में डीएनए को बाहर निकालने के लिए प्लाज्मा झिल्ली और परमाणु झिल्ली का टूटना शामिल होता है।इसके विपरीत, पौधे और कवक कोशिका भित्ति को नष्ट करने के लिए विशेष कदम आवश्यक हैं।
चित्रा 01: जीनोमिक डीएनए अलगाव
परिणामस्वरूप, एक बार जब लसीका चरण पूरा हो जाता है, तो अंततः डीएनए सतह पर तैरनेवाला में आ जाएगा। इसके साथ ही, प्रोटीनएज़ K के जुड़ने के कारण घोल में प्रोटीन का क्षरण भी होता है। अगला कदम जीनोमिक डीएनए और अवक्रमित प्रोटीन को एक दूसरे से अलग करना है। इसलिए, अवक्रमित प्रोटीन वर्षा द्वारा अलग हो जाते हैं जिससे जीनोमिक डीएनए सतह पर तैरनेवाला में रहता है। प्रोटीन के अवक्षेपण के बाद, जीनोमिक डीएनए को एक उपयुक्त बफर में अवक्षेपित और पुन: निलंबित किया जा सकता है जब तक कि उसे प्रयोग की आवश्यकता न हो।
जीनोमिक डीएनए, जो लीनियर डीएनए होता है, उसमें किसी जीव की सभी आनुवंशिक जानकारी होती है।दूसरे शब्दों में, जीनोम एक जीवित जीव की आनुवंशिकता सामग्री है जो कोशिका की सभी संरचनात्मक और कार्यात्मक गतिविधियों के लिए जिम्मेदार है। इसमें कोडिंग और गैर-कोडिंग डीएनए अनुक्रम दोनों शामिल हैं। जीनोमिक डीएनए को अलग करते समय, इसमें जीव का संपूर्ण जीनोम शामिल होता है।
प्लाज्मिड डीएनए अलगाव क्या है?
प्लाज्मिड डीएनए अलगाव डीएनए अलगाव की एक विशेष और अधिक जटिल प्रक्रिया है। प्लास्मिड अधिकांश जीवाणु कोशिकाओं में मौजूद एक्स्ट्राक्रोमोसोमल डीएनए होते हैं। वे निष्क्रिय गोलाकार डीएनए हैं जो कठोर पर्यावरणीय परिस्थितियों में जीवित रहने के लिए बैक्टीरिया का समर्थन करते हैं। प्लास्मिड डीएनए में विशेष प्रतिरोधी जीन होते हैं जो बैक्टीरिया को अतिरिक्त लाभ प्रदान करते हैं जैसे कि एंटीबायोटिक प्रतिरोध, विषाणु गुण और विषाक्त गुण।
चित्र 02: प्लास्मिड डीएनए अलगाव
प्लाज्मिड डीएनए अलगाव में तीन मुख्य प्रक्रियाएं भी शामिल हैं; सेल लसीका, प्रोटीनोलिसिस और डीएनए अवक्षेपण। यद्यपि अलगाव का जैव रासायनिक तंत्र जीनोमिक डीएनए अलगाव के समान है, यह प्रक्रिया उससे कहीं अधिक जटिल है। इस प्रक्रिया में कोशिका विश्लेषण प्रक्रिया सबसे महत्वपूर्ण प्रक्रिया है। सबसे महत्वपूर्ण बात यह है कि जीनोमिक डीएनए और प्लास्मिड डीएनए को एक दूसरे के साथ नहीं मिलाया जाना चाहिए। इसलिए, प्लास्मिड डीएनए आइसोलेशन प्रक्रिया में एक बहुत अधिक माइल्ड लसीका प्रक्रिया शामिल होती है। इसलिए, अधिकांश प्लास्मिड डीएनए अलगाव प्रक्रियाओं में डिटर्जेंट का उपयोग होता है; सेल लसीका के लिए सोडियम डोडेसिल सल्फेट।
जीनोमिक डीएनए और प्लास्मिड डीएनए अलगाव के बीच समानताएं क्या हैं?
- जीनोमिक डीएनए और प्लास्मिड डीएनए अलगाव एक जीव के डीएनए को निकालने पर केंद्रित है।
- साथ ही, दोनों एक ही समग्र प्रक्रिया का पालन करते हैं जिसमें कोशिका विश्लेषण, प्रोटीन क्षरण और डीएनए अवक्षेपण शामिल हैं।
- इसके अलावा, दोनों प्रक्रियाओं के परिणामी डीएनए डाउनस्ट्रीम प्रक्रियाओं के लिए महत्वपूर्ण हैं।
- इसके अलावा, दोनों अलगाव प्रक्रियाओं में निर्दिष्ट भंडारण स्थितियों के तहत डीएनए को शुद्ध और संग्रहीत करने के चरण शामिल हैं।
- इसके अलावा, प्रोटीन को नीचा दिखाने के लिए दोनों तरीकों में प्रोटीनएज़ के का उपयोग किया जाता है।
जीनोमिक डीएनए और प्लास्मिड डीएनए आइसोलेशन में क्या अंतर है?
जीनोमिक डीएनए अलगाव लक्ष्य जीव के पूरे जीनोमिक डीएनए को निकालने पर केंद्रित है जबकि प्लास्मिड डीएनए अलगाव विशेष जीवाणु प्रजातियों से केवल प्लास्मिड डीएनए को अलग करने पर केंद्रित है। इसलिए, यह जीनोमिक डीएनए और प्लास्मिड डीएनए अलगाव के बीच महत्वपूर्ण अंतर है। इसके अलावा, जीनोमिक डीएनए और प्लास्मिड डीएनए अलगाव के बीच एक और अंतर प्रक्रिया में है। प्लास्मिड डीएनए अलगाव की तुलना में जीनोमिक डीएनए अलगाव एक कम जटिल प्रक्रिया है। इसलिए, प्लास्मिड डीएनए को अलग करते समय, जीनोमिक और प्लास्मिड डीएनए के एक दूसरे के साथ मिश्रण को रोकने के लिए सावधानी बरतना आवश्यक है।
नीचे दिए गए इन्फोग्राहिक जीनोमिक डीएनए और प्लास्मिड डीएनए अलगाव के बीच अंतर के बारे में अधिक जानकारी प्रदान करते हैं।
सारांश - जीनोमिक डीएनए बनाम प्लास्मिड डीएनए अलगाव
डीएनए अलगाव आणविक जीव विज्ञान तकनीकों में एक महत्वपूर्ण प्रक्रिया है। डीएनए दो प्रकार के होते हैं, जीनोमिक डीएनए और प्लास्मिड डीएनए (एक्स्ट्रा-क्रोमोसोमल डीएनए)। आवश्यकता के आधार पर, जीनोमिक डीएनए को अलग करने के लिए कुछ प्रक्रियाएं की जाती हैं जबकि कुछ प्रक्रियाएं बैक्टीरिया से केवल प्लास्मिड डीएनए को अलग करने पर ध्यान केंद्रित करती हैं। इसलिए, दोनों प्रक्रियाओं में शामिल चरण एक दूसरे से थोड़े भिन्न होते हैं। हालाँकि, दोनों अलगावों में समग्र प्रक्रिया समान है। क्लोनिंग, जेल वैद्युतकणसंचलन और पोलीमरेज़ चेन रिएक्शन जैसी डाउनस्ट्रीम प्रक्रियाओं में दोनों प्रक्रियाओं के पृथक डीएनए का अत्यधिक उपयोग होता है।जीनोमिक डीएनए आइसोलेशन प्रोटोकॉल के अंत में, जीव के पूरे जीनोमिक डीएनए को अंतिम उत्पाद के रूप में अलग किया जा सकता है जबकि प्लास्मिड डीएनए आइसोलेशन प्रोटोकॉल के अंत में, संबंधित जीवाणु के प्लास्मिड डीएनए को अंतिम उत्पाद के रूप में अलग किया जा सकता है। इसलिए, यह जीनोमिक डीएनए और प्लास्मिड डीएनए अलगाव के बीच का अंतर है।
