जेल निस्पंदन और आत्मीयता क्रोमैटोग्राफी के बीच महत्वपूर्ण अंतर यह है कि जेल निस्पंदन क्रोमैटोग्राफी आणविक भार या विश्लेषण नमूने के आकार में अंतर पर निर्भर करती है, जबकि आत्मीयता क्रोमैटोग्राफी एक स्थिर लिगैंड के लिए एक विश्लेषक की आत्मीयता पर निर्भर करती है।
विश्लेषणात्मक रसायन विज्ञान में क्रोमैटोग्राफी शब्द विभिन्न तकनीकों का उपयोग करके मिश्रण में घटकों को अलग करने की प्रक्रिया को संदर्भित करता है। क्रोमैटोग्राफी एक सामूहिक नाम है जो अलग करने के लिए विभिन्न तरीकों की एक संख्या का प्रतिनिधित्व करता है।
जेल फिल्ट्रेशन क्रोमैटोग्राफी क्या है?
जेल निस्पंदन क्रोमैटोग्राफी एक विश्लेषणात्मक तकनीक है जिसमें घटकों का पृथक्करण आणविक भार या आकार में अंतर पर निर्भर करता है। इस तकनीक को आकार-बहिष्करण क्रोमैटोग्राफी या आणविक-छलनी क्रोमैटोग्राफी के रूप में भी जाना जाता है। इस प्रक्रिया में पृथक्करण तकनीक नमूने में अणुओं की जेल-निस्पंदन माध्यम के छिद्रों में प्रवेश करने की भिन्न क्षमता पर निर्भर करती है।
जेल निस्पंदन तकनीक में, स्थिर चरण में हाइड्रेटेड, स्पंज जैसी सामग्री के मोती होते हैं जिनमें आणविक आयामों के छिद्र होते हैं जिनमें आकार की एक संकीर्ण सीमा होती है। यदि हम इन "आणविक चलनी" वाले कॉलम के माध्यम से विभिन्न आकारों के अणुओं से युक्त एक जलीय घोल पास करते हैं, तो अणु जो निस्पंदन माध्यम के छिद्रों से बड़े होते हैं, स्तंभ के माध्यम से तेज़ी से आगे बढ़ते हैं। इसके विपरीत, छोटे अणु जेल के छिद्रों में प्रवेश करते हैं और स्तंभ के माध्यम से धीरे-धीरे आगे बढ़ते हैं। आणविक आकार घटते क्रम में स्तंभ से अणु निकलते हैं।यहां, जेल की अपवर्जन सीमा किसी दिए गए जेल के छिद्रों में प्रवेश करने में असमर्थ सबसे छोटे अणुओं का आणविक द्रव्यमान है।
विभिन्न प्रकार की जेल निस्पंदन तकनीकें हैं, जैसे अप्रत्यक्ष जेल निस्पंदन विधि, स्थिर-राज्य जेल निस्पंदन, जेल मनका डायलिसिस, आदि। अप्रत्यक्ष जेल निस्पंदन क्रोमैटोग्राफी मुक्त थायराइड हार्मोन के निर्धारण में उपयोगी है। स्थिर-राज्य जेल निस्पंदन क्रोमैटोग्राफी एक अप्रत्यक्ष तकनीक है जो ज्यादातर कोर्टिसोल, टेस्टोस्टेरोन, आदि जैसे मुक्त स्टेरॉयड के माप के लिए उपयोगी है। दूसरी ओर, जेल बीड डायलिसिस, स्थिर-राज्य जेल निस्पंदन का एक संशोधन है जो तुलनात्मक रूप से सरल है।
एफ़िनिटी क्रोमैटोग्राफी क्या है?
एफिनिटी क्रोमैटोग्राफी एक विश्लेषणात्मक तकनीक और एक पृथक्करण विधि है जो एक स्थिर लिगैंड और उसके बाध्यकारी साथी के बीच एक विशिष्ट बाध्यकारी बातचीत पर निर्भर करती है।कुछ उदाहरणों में एंटीबॉडी-एंटीजन बाइंडिंग, एंजाइम-सब्सट्रेट बाइंडिंग और एंजाइम-इनहिबिटर बाइंडिंग शामिल हैं। इसलिए, इस तकनीक के न्यूक्लिक एसिड शुद्धिकरण, कोशिका के अर्क से प्रोटीन शुद्धिकरण और रक्त से शुद्धिकरण में कई महत्वपूर्ण अनुप्रयोग हैं।
इस तकनीक में सबसे महत्वपूर्ण गुण लिगैंड इमोबिलाइजेशन है। हम इसके लिए विभिन्न सामग्रियों जैसे एक्रिलेट्स और सिलिका जेल का उपयोग कर सकते हैं। लिगैंड को लक्ष्य अणु के स्थैतिक हस्तक्षेप को रोकना महत्वपूर्ण है। इसके अलावा, एक अवरोधक ठोस चरण से जुड़ा होता है। हम इस अवरोधक को स्पेसर कहते हैं। शास्त्रीय रूप से, स्पेसर में हाइड्रोकार्बन श्रृंखला होती है।
एफिनिटी क्रोमैटोग्राफी के स्थिर चरण में कोर, स्पेसर और लिगैंड होते हैं।कभी-कभी, इसमें एक धातु आयन भी होता है जो लिगैंड से जुड़ा होता है। इस तकनीक में स्थिर चरण के लिए सबसे पसंदीदा ठोस चरण agarose gel है क्योंकि इसे किसी भी आकार के राल बेड के साथ कॉलम को भरने और पैक करने के लिए आसानी से निकाला जाता है, और यह बायोमोलेक्यूल्स के लिए और मोतियों के माध्यम से स्वतंत्र रूप से प्रवाह करने के लिए पर्याप्त है। लिगेंड्स विभिन्न तरीकों से मनका बहुलक से सहसंयोजक रूप से जुड़ सकते हैं। सबसे आम स्पेसर यौगिक सायनोजेन ब्रोमाइड, एपॉक्साइड, सी 6 एसिड के साथ एपॉक्साइड और डायमिन हैं। दूसरी ओर, जिस लिगैंड का हम उपयोग कर सकते हैं, वह लक्ष्य के अनुसार भिन्न होता है, जैसे, एंटीबॉडी-एंटीजन, आयरन या एल्युमिनियम आयन-फॉस्फोप्रोटीन, एविडिन-बायोटिन, ग्लूटाथियोन-जीएसटी, चेलेटर-हिज-टैगेड प्रोटीन, आदि।
जेल फिल्ट्रेशन और एफिनिटी क्रोमैटोग्राफी में क्या अंतर है?
क्रोमैटोग्राफी एक महत्वपूर्ण विश्लेषणात्मक तकनीक है। जेल निस्पंदन क्रोमैटोग्राफी और आत्मीयता क्रोमैटोग्राफी क्रोमैटोग्राफी के दो महत्वपूर्ण रूपांतर हैं। जेल निस्पंदन और आत्मीयता क्रोमैटोग्राफी के बीच महत्वपूर्ण अंतर यह है कि जेल निस्पंदन क्रोमैटोग्राफी आणविक भार या विश्लेषण नमूने के आकार में अंतर पर निर्भर करती है, जबकि आत्मीयता क्रोमैटोग्राफी एक स्थिर लिगैंड के लिए एक विश्लेषण की आत्मीयता पर निर्भर करती है।
सारांश - जेल निस्पंदन बनाम आत्मीयता क्रोमैटोग्राफी
उनके अनुप्रयोग और विश्लेषण नमूने की प्रकृति के अनुसार विभिन्न प्रकार की क्रोमैटोग्राफिक तकनीकें हैं। जेल निस्पंदन और आत्मीयता क्रोमैटोग्राफी दो ऐसी तकनीकें हैं। जेल निस्पंदन और आत्मीयता क्रोमैटोग्राफी के बीच महत्वपूर्ण अंतर यह है कि जेल निस्पंदन क्रोमैटोग्राफी आणविक भार या विश्लेषण नमूने के आकार में अंतर पर निर्भर करती है, जबकि आत्मीयता क्रोमैटोग्राफी एक स्थिर लिगैंड के लिए एक विश्लेषण की आत्मीयता पर निर्भर करती है।
