इम्युनोप्रेजर्वेशन और कोइम्युनोप्रेरीगेशन के बीच मुख्य अंतर यह है कि इम्युनोप्रेरीगेशन एक ऐसी तकनीक है जो एक विशिष्ट एंटीबॉडी का उपयोग करके एक प्रोटीन को घोल से बाहर निकालती है, जबकि कोइम्यूनोप्रेजर्वेशन एक ऐसी तकनीक है जो एक विशिष्ट एंटीबॉडी का उपयोग करके समाधान से बरकरार प्रोटीन कॉम्प्लेक्स को बाहर निकालती है।
एंटीजन-एंटीबॉडी इंटरेक्शन एक प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया के दौरान बी कोशिकाओं और एंटीजन (प्रोटीन) द्वारा उत्पादित एंटीबॉडी के बीच एक विशिष्ट रासायनिक बातचीत है। आम तौर पर, घुलनशील एंटीजन घुलनशील तापमान और पीएच पर एक इलेक्ट्रोलाइट की उपस्थिति में घुलनशील एंटीबॉडी के साथ मिलकर एक अघुलनशील दृश्यमान परिसर बनाते हैं।इसे अवक्षेपण अभिक्रिया कहते हैं। इसलिए, प्रतिरक्षी अवक्षेपण और सह-प्रतिरक्षण अवक्षेपण दो प्रकार की अवक्षेपण प्रतिक्रियाएं हैं जिनका प्रयोग प्रयोगशालाओं में एंटीजन जैसे प्रोटीन की पहचान करने के लिए नियमित रूप से किया जाता है।
इम्यूनोप्रूवमेंट क्या है?
इम्युनोप्रेरीगेशन एक विशिष्ट एंटीबॉडी का उपयोग करके एक समाधान से प्रोटीन निकालने की एक तकनीक है। कभी-कभी, इस तकनीक को व्यक्तिगत प्रोटीन इम्यूनोप्रूवमेंट के रूप में भी जाना जाता है। इम्यूनोप्रूवमेंट सेल lysate से ब्याज की एक चयनित प्रोटीन को अलग करने के लिए एक एंटीबॉडी का उपयोग करता है। एंटीबॉडी एक मिश्रण से अपने विशिष्ट लक्ष्य प्रोटीन या एंटीजन को शुद्ध करता है। एंटीबॉडी प्रोटीन से बंध जाती है, और एंटीबॉडी-एंटीजन कॉम्प्लेक्स को नमूने से बाहर निकाल दिया जाता है। प्रायोगिक सेटअप में, एंटीजन-एंटीबॉडी कॉम्प्लेक्स को प्रोटीन ए/जी युग्मित agarose या चुंबकीय मोतियों का उपयोग करके बाहर निकाला जाता है। बाद में, मोतियों को धोया जाता है, और रुचि के प्रोटीन को हटा दिया जाता है। इम्युनोप्रेरीगेशन द्वारा प्राप्त शुद्ध प्रोटीन या एंटीजन को विभिन्न तकनीकों जैसे एंजाइम-लिंक्ड इम्युनोसॉरबेंट परख (एलिसा) और वेस्टर्न ब्लॉट (डब्ल्यूबी) द्वारा सत्यापित किया जाता है।
चित्र 01: प्रतिरक्षण
इसके अलावा, पृथक प्रोटीन या एंटीजन को प्राथमिक अनुक्रम के आधार पर एंजाइमी पाचन पैटर्न का उपयोग करके मास स्पेक्ट्रोमेट्री के माध्यम से मात्राबद्ध और पहचाना जा सकता है। इम्युनोप्रेरीगेशन प्रयोग शुरू करने से पहले कुछ विचार हैं: विधि प्रारूप पसंद, प्रोटीन और मोतियों को बांधना, सही प्राथमिक एंटीबॉडी और आइसोटाइप का चयन, और नकारात्मक नियंत्रण।
कोइम्युनोप्रेरीगेशन क्या है?
Coimmunoprecipitation एक विशिष्ट एंटीबॉडी का उपयोग करके समाधान से बरकरार प्रोटीन परिसरों को निकालने की एक तकनीक है। Coimmunoprecipitation आम तौर पर एक विशिष्ट एंटीबॉडी का चयन करके काम करता है जो एक ज्ञात प्रोटीन (एंटीजन) को लक्षित करता है जिसे प्रोटीन के एक बड़े परिसर का सदस्य माना जाता है।ज्ञात सदस्य को एक विशिष्ट एंटीबॉडी के साथ लक्षित करके, पूरे प्रोटीन परिसर को समाधान से बाहर निकालना संभव है। यह परिसर के अज्ञात सदस्यों की पहचान को सक्षम बनाता है। प्रोटीन परिसरों को समाधान से बाहर निकालने की अवधारणा को कभी-कभी "पुल-डाउन" तंत्र के रूप में जाना जाता है।
चित्र 02: बी कोइम्युनोप्रेरीगेशन
Coimmunoprecipitation एक शक्तिशाली तकनीक है जिसका उपयोग प्रोटीन-प्रोटीन इंटरैक्शन का विश्लेषण करने के लिए किया जाता है। कोइम्युनोप्रेरीगेशन का मुख्य उद्देश्य इंटरेक्टिंग पार्टनर्स जैसे लिगैंड्स, कॉफ़ैक्टर्स, या सिग्नलिंग मॉलिक्यूल्स को ब्याज के प्रोटीन के लिए पहचानना है। इसके अलावा, कोइम्युनोप्रेरीगेशन एक प्रभावी तकनीक है जिसका उपयोग सीरम, सेल लाइसेट, समरूप ऊतक या वातानुकूलित मीडिया से प्रोटीन को अलग करने के लिए किया जाता है।
इम्यूनोप्रेरीगेशन और कोइम्युनोप्रेरीगेशन के बीच समानताएं क्या हैं?
- इम्युनोप्रेरीगेशन और कोइम्युनोप्रेरीगेशन दो प्रकार की वर्षा प्रतिक्रिया-आधारित तकनीक हैं।
- दोनों तकनीकों का उपयोग एक विशिष्ट एंटीबॉडी के माध्यम से लक्ष्य प्रतिजन की पहचान करने के लिए किया जा सकता है।
- दोनों तकनीक दृढ़ता से एंटीजन-एंटीबॉडी परस्पर क्रिया पर निर्भर करती हैं।
- वे नियमित रूप से नैदानिक प्रयोगशालाओं में उपयोग किए जाते हैं।
इम्यूनोप्रेरीगेशन और कोइम्युनोप्रेरीगेशन में क्या अंतर है?
इम्युनोप्रेरीगेशन एक ऐसी तकनीक है जो एक विशिष्ट एंटीबॉडी का उपयोग करके एक प्रोटीन को घोल से बाहर निकालती है, जबकि कोइम्युनोप्रेरीगेशन एक ऐसी तकनीक है जो एक विशिष्ट एंटीबॉडी का उपयोग करके समाधान से बरकरार प्रोटीन परिसरों को बाहर निकालती है। इस प्रकार, यह इम्युनोप्रेरीगेशन और कोइम्यूनोप्रेरीगेशन के बीच महत्वपूर्ण अंतर है। इसके अलावा, प्रयोगशालाओं में इम्यूनोप्रेजर्वेशन का अधिक उपयोग किया जाता है, जबकि कोइम्यूनोप्रेजर्वेशन का उपयोग आमतौर पर प्रयोगशालाओं में नहीं किया जाता है।
नीचे दी गई इन्फोग्राफिक एक साथ तुलना के लिए सारणीबद्ध रूप में इम्युनोप्रेरीगेशन और कोइम्युनोप्रेजर्वेशन के बीच अंतर को प्रस्तुत करती है।
सारांश - इम्यूनोप्रेजर्वेशन बनाम कोइम्युनोप्रेरीगेशन
इम्युनोप्रेरीगेशन और कोइम्युनोप्रेरीगेशन दो प्रकार की वर्षा प्रतिक्रिया-आधारित तकनीकें हैं जो एंटीजन-एंटीबॉडी इंटरैक्शन पर निर्भर करती हैं। इम्युनोप्रेरीगेशन तकनीक एक विशिष्ट एंटीबॉडी का उपयोग करके समाधान से एक प्रोटीन को बाहर निकालती है, जबकि कोइम्युनोप्रेरीगेशन तकनीक एक विशिष्ट एंटीबॉडी का उपयोग करके समाधान से बरकरार प्रोटीन परिसरों को बाहर निकालती है। तो, यह इम्युनोप्रेरीगेशन और कोइम्युनोप्रेरीगेशन के बीच अंतर को सारांशित करता है।
