वर्णमिति और फ्लोरोमेट्रिक परख के बीच महत्वपूर्ण अंतर यह है कि वर्णमिति परख एक समाधान में रंगीन यौगिकों की एकाग्रता को निर्धारित करता है जबकि फ्लोरोमेट्रिक परख एक समाधान के गतिज तंत्र को निर्धारित करता है।
एक जैव रासायनिक परख एक ऐसी तकनीक है जो विश्लेषणात्मक रूप से जैविक अणु या पदार्थ की गतिविधि का पता लगाती है या उसकी मात्रा निर्धारित करती है। यह इन विट्रो प्रक्रिया है। वर्णमिति परख और फ्लोरोमेट्रिक परख प्रयोगशालाओं में किए जाने वाले दो प्रकार के सामान्य जैव रासायनिक परख हैं। एलिसा और वेस्टर्न ब्लॉटिंग जैसी कई तकनीकें चयापचय गतिविधि की मात्रा का ठहराव और प्रोटीन, एंजाइम और अन्य छोटे अणुओं जैसे जैव-अणुओं के कार्यात्मक व्यवहार के मापन के लिए जटिल जैव रासायनिक परख हैं।इस प्रकार के एसेज़ का उपयोग प्रोटीन-डीएनए, प्रोटीन-आरएनए और प्रोटीन-प्रोटीन इंटरैक्शन की पहचान के लिए किया जाता है।
कलरिमेट्रिक परख क्या है?
एक वर्णमिति परख एक तकनीक है जो एक समाधान में रंगीन यौगिकों की एकाग्रता को निर्धारित करती है। दूसरे शब्दों में, वर्णमिति परख एक प्रतिक्रिया है जो अभिकर्मकों और एनालिटिक्स के बीच एक एंजाइमेटिक या रासायनिक प्रतिक्रिया के कारण रंग परिवर्तन की ओर ले जाती है। एंजाइम, विशिष्ट यौगिकों, हार्मोन, एंटीबॉडी और अन्य विश्लेषणों के परीक्षण के लिए जैव रसायन में वर्णमिति परख का अभ्यास किया जाता है। वे वर्णमापी या स्पेक्ट्रोफोटोमीटर का उपयोग करते हैं। वर्णमापी ऐसे उपकरण हैं जो रंग विशेषताओं का एक उद्देश्य माप प्रदान करने के लिए रंगीन नमूनों की विशेषता रखते हैं। एक स्पेक्ट्रोफोटोमीटर एक उपकरण है जो प्रकाश की तीव्रता को रंग या प्रकाश की तरंग दैर्ध्य के कार्य के रूप में मापता है।
चित्र 01: वर्णमिति परख
कलरिमेट्रिक परख कैसे काम करती है?
एक वर्णमिति परख में, कुओं से बंधे एक विशेष एंटीबॉडी के साथ एक प्लेट तैयार की जाती है। फिर नमूना जोड़ा जाता है। यह नमूने को एंटीबॉडी से बांधने की अनुमति दे सकता है। फिर डिटेक्शन जांच के साथ प्रतिक्रिया करने के लिए एक डिटेक्शन एंटीबॉडी और एक सब्सट्रेट को कुओं में जोड़ा जाता है। पढ़ने से पहले अंत में स्टॉप सॉल्यूशन जोड़ा जाता है। एक खाली कुआँ जिसे रिक्त कहा जाता है, नमूने के बिना छोड़ दिया जाता है। वर्णमिति परख में, रंग जितना गहरा होगा, विश्लेषण की सांद्रता उतनी ही अधिक होगी। आमतौर पर, रीडिंग लेने के लिए केवल एक तरंग दैर्ध्य की आवश्यकता होती है। लेकिन अगर कोई संदर्भ माप है, तो दो या अधिक तरंग दैर्ध्य का उपयोग किया जाता है।
फ्लोरोमेट्रिक परख क्या है?
फ्लोरोमेट्रिक परख एक ऐसी तकनीक है जो एंजाइम प्रतिक्रियाओं के गतिज तंत्र को निर्धारित करती है। एक फ्लोरोमेट्रिक परख एक गैर-फ्लोरोसेंट सब्सट्रेट या इसके विपरीत से एक फ्लोरोसेंट उत्पाद के गठन के साथ होता है।यह परख फ्लोरेसेंस रेजोनेंस एनर्जी ट्रांसफर (एफआरईटी) का भी उपयोग करता है, जहां एंजाइमैटिक प्रतिक्रिया सब्सट्रेट में दो फ्लोरोफोर्स की स्थिति को बदल देती है, जिससे फ्लोरोसेंस तीव्रता बदल जाती है।
चित्र 02: फ्लोरोमेट्रिक परख
फ्लोरोमेट्रिक परख आम तौर पर अन्य परखों की तुलना में बहुत अधिक संवेदनशील होते हैं। रोगियों के ऊतक, कोशिका या द्रव के नमूनों में नैदानिक एंजाइम अनुमान इसकी उच्च संवेदनशीलता के कारण बढ़ जाते हैं।
फ्लोरोमेट्रिक परख कैसे काम करती है?
फ्लोरोमेट्रिक परख में, प्लेट में नमूने में एक सब्सट्रेट जोड़ा जाता है, और प्लेट रीडर का उपयोग करके प्रतिदीप्ति प्रतिक्रिया ली जाती है। यहां, प्रत्येक सेल को अलग से मापा जाता है। फ्लोरोमेट्रिक परख में अपारदर्शी प्लेटों का उपयोग किया जाता है। इससे प्रकाश का प्रकीर्णन कम होता है।इस प्रकार की परख के लिए दो तरंगदैर्घ्य आवश्यक हैं। एक तरंग दैर्ध्य उत्तेजना का पता लगाने के लिए है और दूसरी तरंग दैर्ध्य उत्सर्जन के लिए है।
कलरिमेट्रिक और फ्लोरोमेट्रिक परख के बीच समानताएं क्या हैं?
- Colorimetric परख और fluorometric परख दो प्रकार के जैव रासायनिक परख हैं।
- दोनों जांच चिकित्सा निदान के लिए की जाती हैं।
- इन परखों में एक एंजाइमी प्रतिक्रिया शामिल होती है।
- दोनों परखों में एक सब्सट्रेट और विश्लेषण शामिल होता है।
कलरिमेट्रिक और फ्लोरोमेट्रिक परख में क्या अंतर है?
एक वर्णमिति परख एक तकनीक है जो एक समाधान में रंगीन यौगिकों की एकाग्रता को निर्धारित करती है, जबकि फ्लोरोमेट्रिक परख एक ऐसी तकनीक है जो एंजाइम प्रतिक्रियाओं के गतिज तंत्र को निर्धारित करती है। तो, यह वर्णमिति और फ्लोरोमेट्रिक परख के बीच महत्वपूर्ण अंतर है। इसके अलावा, फ्लोरोमेट्रिक परख वर्णमिति परख की तुलना में अधिक संवेदनशील होते हैं; इस प्रकार, फ्लोरोमेट्रिक परख में अधिक विश्लेषणों का पता लगाने की क्षमता होती है।इस प्रकार, यह वर्णमिति और फ्लोरोमेट्रिक परख के बीच एक और महत्वपूर्ण अंतर है। इसके अलावा, फ्लोरोमेट्रिक परख के लिए दो तरंग दैर्ध्य की आवश्यकता होती है, जबकि वर्णमिति परख एक तरंग दैर्ध्य के साथ की जाती है।
नीचे दिया गया इन्फोग्राफिक वर्णमिति और फ्लोरोमेट्रिक परख के बीच अधिक अंतर को दर्शाता है।
सारांश - वर्णमिति बनाम फ्लोरोमेट्रिक परख
एक जैव रासायनिक परख एक विश्लेषणात्मक प्रक्रिया है जिसका उपयोग सेलुलर चयापचय प्रतिक्रियाओं को निर्धारित और निर्धारित करने के लिए किया जाता है। वर्णमिति परख और फ्लोरोमेट्रिक परख दो प्रकार के जैव रासायनिक परख हैं। वर्णमिति परख एक प्रतिक्रिया है जो अभिकर्मकों और एनालिटिक्स के बीच एक एंजाइमेटिक या रासायनिक प्रतिक्रिया के कारण रंग परिवर्तन की ओर ले जाती है जबकि फ्लोरोमेट्रिक परख एक ऐसी तकनीक है जिसका उपयोग एंजाइम प्रतिक्रियाओं के गतिज तंत्र को निर्धारित करने के लिए किया जाता है। दोनों परख एक एंजाइमैटिक प्रतिक्रिया पर निर्भर करते हैं जिसमें एक सब्सट्रेट और एक विश्लेषण शामिल होता है। फ्लोरोमेट्रिक परख वर्णमिति परख की तुलना में अधिक संवेदनशील होते हैं। सबसे महत्वपूर्ण बात, फ्लोरोमेट्रिक परख के लिए दो तरंग दैर्ध्य की आवश्यकता होती है, जबकि वर्णमिति परख केवल एक तरंग दैर्ध्य के साथ की जा सकती है।इस प्रकार, यह वर्णमिति और फ्लोरोमेट्रिक परख के बीच अंतर को सारांशित करता है।
