क्लेनो और टी4 डीएनए पोलीमरेज़ के बीच मुख्य अंतर यह है कि क्लेनो टुकड़ा ई. कोलाई डीएनए पोलीमरेज़ 1 का एक बड़ा टुकड़ा है जबकि टी 4 डीएनए पोलीमरेज़ बैक्टीरियोफेज टी 4 का डीएनए पोलीमरेज़ 1 है।
डीएनए पोलीमरेज़ एंजाइम होते हैं जो पहले से मौजूद प्राइमर के 3′-OH सिरे पर डीऑक्सीराइबोन्यूक्लियोटाइड्स जोड़कर डीएनए के निर्माण को उत्प्रेरित करते हैं। डीएनए पोलीमरेज़ विभिन्न प्रकार के होते हैं। आणविक जीव विज्ञान में उपयोग किए जाने वाले अधिकांश डीएनए पोलीमरेज़ प्रोकैरियोटिक डीएनए पोलीमरेज़ हैं। क्लेनो टुकड़ा और टी 4 डीएनए पोलीमरेज़ दो प्रकार के डीएनए पोलीमरेज़ हैं जिनमें एक प्रोकैरियोटिक मूल है। क्लेनो टुकड़ा बड़ा टुकड़ा है जो ई के दरार से उत्पन्न होता है।कोलाई डीएनए पोलीमरेज़ 1 बैक्टीरियल प्रोटीज सबटिलिसिन द्वारा दो टुकड़ों में। T4 डीएनए पोलीमरेज़ बैक्टीरियोफेज T4 का डीएनए पोलीमरेज़ 1 है। क्लेनो और टी4 डीएनए पोलीमरेज़ दोनों में 5′→3′ पोलीमरेज़ और 3′→5′ एक्सोन्यूक्लिज़ गतिविधि होती है। उन दोनों में 5′→3′ एक्सोन्यूक्लिज़ गतिविधि का अभाव है, जिससे वे आणविक जीव विज्ञान में कई अनुप्रयोगों के लिए अधिक उपयुक्त हैं।
क्लेनो क्या है?
क्लेनो खंड एक डीएनए पोलीमरेज़ है जो आणविक जीव विज्ञान में उपयोगी है। जब ई. कोलाई डीएनए पोलीमरेज़ 1 बैक्टीरियल प्रोटीज़, सबटिलिसिन द्वारा प्रोटीयोलाइटिक पाचन से गुजरता है, तो इसके परिणामस्वरूप दो टुकड़े होते हैं: एक बड़ा टुकड़ा होता है, और दूसरा एक छोटा टुकड़ा होता है। क्लेनो टुकड़ा बड़ा टुकड़ा है जो आकार में 68 केडीए है। क्लेनो के टुकड़े में डीएनए पोल I की 5′→3′ पोलीमरेज़ और 3′→5′ एक्सोन्यूक्लिज़ (प्रूफरीडिंग) गतिविधियाँ होती हैं। क्लेनो फ़्रैगमेंट की 3′→5′ एक्सोन्यूक्लिज़ गतिविधि पोलीमराइज़ेशन की प्रगति के साथ गलत तरीके से जोड़े गए आधारों को हटाने की सुविधा प्रदान करती है। क्लेनो के टुकड़े में 5′→3′ एक्सोन्यूक्लिज़ गतिविधि नहीं होती है, जो पूर्ण लंबाई या बरकरार ई द्वारा दिखाया गया है।कोलाई डीएनए पोलीमरेज़ 1. यह तब फायदेमंद होता है जब केवल पोलीमराइज़ेशन गतिविधि की ही आवश्यकता होती है। क्लेनो के टुकड़ों का उपयोग 5' ओवरहैंग, जांच के संश्लेषण, डीएनए अनुक्रमण, डबल स्ट्रैंडेड डीएनए के संश्लेषण, सीडीएनए सेकेंड स्ट्रैंड के संश्लेषण और साइट-निर्देशित उत्परिवर्तन को भरने के लिए किया जाता है।
चित्र 01: क्लेनो फ्रैगमेंट
कुछ अनुप्रयोगों में, क्लेनो खंड की 3′→5′ एक्सोन्यूक्लिज़ गतिविधि भी अवांछनीय हो जाती है। इसे जीन में एक उत्परिवर्तन पेश करके हटाया जा सकता है जो क्लेनो खंड के लिए कोड करता है। परिणामी क्लेनो खंड को एक्सो-क्लेनो खंड के रूप में जाना जाता है। इसलिए, एक्सो-क्लेनो खंड में ई. कोलाई पोलीमरेज़ की केवल 5′→3′ पोलीमरेज़ गतिविधि है 1.
T4 डीएनए पोलीमरेज़ क्या है?
T4 डीएनए पोलीमरेज़ एक डीएनए पोलीमरेज़ है जो डीएनए के संश्लेषण को उत्प्रेरित करता है।यह बैक्टीरियोफेज T4 द्वारा कोडित एक प्रोटीन है। संरचनात्मक रूप से, T4 डीएनए पोलीमरेज़ एक 898 अमीनो एसिड अवशेष प्रोटीन (103.6 kDa का आणविक भार) है। संश्लेषण को उत्प्रेरित करने के लिए इसे एक टेम्पलेट और एक प्राइमर की आवश्यकता होती है।
चित्र 02: T4 डीएनए पोलीमरेज़
क्लेनो खंड के समान, T4 डीएनए पोलीमरेज़ में 5′→3′ पोलीमरेज़ और 3′→5′ एक्सोन्यूक्लिज़ गतिविधियां दोनों हैं। इसके अलावा, इसमें 5′→3′ एक्सोन्यूक्लिज़ गतिविधि का भी अभाव है। T4 डीएनए पोलीमरेज़ डीएनए अंशों के 5′-बाहर निकलने वाले सिरों को भरने में उपयोगी है। यह अक्सर डबल-फंसे डीएनए के 5′-अंत या 3′-अंत-लेबलिंग के लिए भी उपयोग किया जाता है। T4 डीएनए पोलीमरेज़ का उपयोग अक्सर कुंद क्लोनिंग में किया जाता है। T4 डीएनए पोलीमरेज़ की 3′→5′ एक्सोन्यूक्लिज़ (प्रूफरीडिंग) गतिविधि क्लेनो खंड की तुलना में अधिक मजबूत (200 गुना से अधिक) है। सबसे महत्वपूर्ण बात यह है कि T4 डीएनए पोलीमरेज़ में उच्च प्रक्रियात्मकता (400 न्यूक्लियोटाइड प्रति सेकंड) होती है।
क्लेनो और टी4 डीएनए पोलीमरेज़ के बीच समानताएं क्या हैं?
- क्लेनो और टी4 डीएनए पोलीमरेज़ दो प्रोकैरियोटिक पोलीमरेज़ हैं।
- दोनों पोलीमरेज़ में 5′→3′ पोलीमरेज़ और 3′→5′ एक्सोन्यूक्लिज़ गतिविधि होती है।
- वे 5′→3′ एक्सोन्यूक्लिएज गतिविधि प्रदर्शित नहीं करते हैं।
- दोनों एंजाइमों को डीएनए के संश्लेषण को उत्प्रेरित करने के लिए एक टेम्पलेट और एक प्राइमर की आवश्यकता होती है।
- इन एंजाइमों को 75 पर गर्मी निष्क्रिय किया जा सकता है 0
क्लेनो और टी4 डीएनए पोलीमरेज़ में क्या अंतर है?
क्लेनो और टी4 डीएनए पोलीमरेज़ के बीच मुख्य अंतर प्रत्येक एंजाइम की उत्पत्ति है। क्लेनो का टुकड़ा एक जीवाणु से उत्पन्न होता है जबकि T4 डीएनए पोलीमरेज़ एक बैक्टीरियोफेज से उत्पन्न होता है जो एक वायरस है। T4 डीएनए पोलीमरेज़ में क्लेनो खंड की तुलना में उच्च प्रक्रियात्मकता है। इसके अलावा, T4 डीएनए पोलीमरेज़ में क्लेनो खंड की तुलना में एक मजबूत प्रूफरीडिंग गतिविधि है।इस प्रकार, यह क्लेनो और टी4 डीएनए पोलीमरेज़ के बीच एक और अंतर है।
नीचे दी गई जानकारी-ग्राफिक तालिका में क्लेनो और टी4 डीएनए पोलीमरेज़ के बीच अधिक अंतरों को सूचीबद्ध करती है।
सारांश - क्लेनो बनाम टी4 डीएनए पोलीमरेज़
Klenow टुकड़ा ई. कोलाई डीएनए पोलीमरेज़ 1 का एक बड़ा टुकड़ा है। इसमें केवल 5′→3′ पोलीमरेज़ और 3′→5′ एक्सोन्यूक्लिज़ गतिविधियाँ हैं। इसमें बरकरार ई. कोलाई डीएनए पोल 1 की 5′→3′ एक्सोन्यूक्लिज़ गतिविधि का अभाव है। इसलिए, क्लेनो खंड एक जीवाणु पोलीमरेज़ है। दूसरी ओर, T4 डीएनए पोलीमरेज़ बैक्टीरियोफेज T4 द्वारा कोडित एक पोलीमरेज़ है। क्लेनो के टुकड़े के समान, इसमें 5′→3′ पोलीमरेज़ और 3′→5′ एक्सोन्यूक्लिज़ गतिविधियाँ शामिल हैं, और इसमें 5′→3′ एक्सोन्यूक्लिज़ गतिविधि का अभाव है। हालांकि, T4 डीएनए पोलीमरेज़ में क्लेनो खंड की तुलना में उच्च प्रक्रियात्मकता और उच्च प्रूफरीडिंग गतिविधि है।तो, यह क्लेनो और टी4 डीएनए पोलीमरेज़ के बीच महत्वपूर्ण अंतर है।
