प्रगतिशील और प्रतिगामी धुंधलापन के बीच महत्वपूर्ण अंतर यह है कि प्रगतिशील धुंधलापन में, ऊतक को धुंधला समाधान में वांछित समापन बिंदु तक पहुंचने के लिए पर्याप्त समय तक छोड़ दिया जाता है, जबकि प्रतिगामी धुंधला में, ऊतक को जानबूझकर अधिक धुंधला होने तक छोड़ दिया जाता है डाई सभी ऊतक तत्वों को संतृप्त करती है और फिर दाग मुक्त करती है।
धुंधलापन एक ऐसी तकनीक है जो ऊतक घटकों को हाइलाइट और अलग करती है और माइक्रोस्कोप के तहत निरीक्षण करना संभव बनाती है। एच और ई धुंधला सामान्य ऊतक धुंधला प्रक्रिया है जो आमतौर पर ऊतक विज्ञान में उपयोग किया जाता है। यह हेमेटोक्सिलिन और ईओसिन (काउंटरस्टेन) का उपयोग करता है।हेमेटोक्सिलिन का उपयोग करके परमाणु धुंधलापन प्रगतिशील या प्रतिगामी धुंधला तकनीकों के साथ पूरा किया जा सकता है। कुछ हेमेटोक्सिलिन योगों का उपयोग प्रगतिशील धुंधलापन में किया जाता है। मेयर का हेमेटोक्सिलिन एक उदाहरण है। प्रगतिशील दागों में कम हेमेटोक्सिलिन सांद्रता होती है। इसलिए, वे धीरे-धीरे और चुनिंदा रूप से क्रोमेटिन को दाग देते हैं। कुछ अन्य योगों का उपयोग प्रतिगामी धुंधलापन में किया जाता है। हैरिस हेमेटोक्सिलिन का उपयोग प्रतिगामी धुंधलापन में किया जाता है। प्रतिगामी दागों में हेमेटोक्सिलिन की उच्च सांद्रता होती है; इसलिए, दाग तेजी से पूरी कोशिका पर फैल जाता है।
प्रगतिशील धुंधलापन क्या है?
प्रगतिशील धुंधलापन एक ऐसी तकनीक है जो धुंधला समाधान में ऊतक को वांछित समापन बिंदु तक पहुंचने के लिए पर्याप्त समय देती है। इसलिए, धुंधला होने के पूरा होने का निर्धारण करने के लिए दाग की गुणवत्ता की लगातार निगरानी की आवश्यकता होती है। धुंधला होने की तीव्रता को डूबने के समय से नियंत्रित किया जाता है।
चित्र 01: हेमेटोक्सिलिन संरचना
गिल के हेमेटोक्सिलिन और मेयर के हेमेटोक्सिलिन प्रकृति में प्रगतिशील हैं। इन दो हेमेटोक्सिलिंग्स के लिए, 5-10 मिनट का धुंधला समय आमतौर पर प्रगतिशील धुंधला में उपयोग किया जाता है। आम तौर पर, प्रगतिशील हेमेटोक्सिलिन कम केंद्रित होते हैं। इसलिए, वे धीरे-धीरे और चुनिंदा रूप से क्रोमेटिन को दाग देते हैं। प्रगतिशील धुंधलापन में, हेमेटोक्सिलिन मुख्य रूप से क्रोमैटिन को वांछित तीव्रता तक दाग देता है। इस प्रकार, अतिरिक्त दाग को बाहर निकालने के लिए इसे तनु अम्ल अल्कोहल में विभेदन की आवश्यकता नहीं होती है।
प्रतिगामी धुंधलापन क्या है?
प्रतिगामी धुंधलापन एक अधिक तेज़ धुंधला तकनीक है जिसमें ऊतक को जानबूझकर तब तक दागा जाता है जब तक कि डाई सभी ऊतक घटकों को संतृप्त न कर दे। तब ऊतक को चुनिंदा रूप से तब तक दागदार किया जाता है जब तक कि यह सही समापन बिंदु तक नहीं पहुंच जाता। डी-स्टेनिंग स्टेप को डिफरेंशियल कहा जाता है। अतिरिक्त दागों को हटाने के लिए विभेदीकरण किया जाता है।आमतौर पर, यह तनु अम्ल अल्कोहल का उपयोग करके किया जाता है।
चित्र 02: एच और ई धुंधला
हैरिस हेमेटोक्सिलिन हेमेटोक्सिलिन का लोकप्रिय रूप से इस्तेमाल किया जाने वाला प्रकार है। एर्लिच और डेलाफिल्ड के हेमेटोक्सिलिन भी प्रतिगामी धुंधलापन में उपयोग कर रहे हैं। प्रतिगामी दागों में हेमेटोक्सिलिन की उच्च सांद्रता होती है। इसलिए, वे तेजी से पूरे सेल को फैलाते हैं और क्रोमेटिन और साइटोप्लाज्म को दाग देते हैं। जब ऊतक तत्वों के बहुत स्पष्ट विभेदन की आवश्यकता होती है तो प्रतिगामी धुंधलापन पसंद किया जाता है।
प्रगतिशील और प्रतिगामी धुंधला के बीच समानताएं क्या हैं?
- प्रगतिशील और प्रतिगामी धुंधला दो प्रकार की धुंधला तकनीक हैं।
- दोनों हीमेटोक्सिलिन नामक डाई का उपयोग करते हैं।
प्रगतिशील और प्रतिगामी धुंधला के बीच अंतर क्या है?
प्रगतिशील धुंधलापन एक धीमी धुंधला प्रक्रिया है जिसमें ऊतक को धुंधला समाधान में वांछित समापन बिंदु तक पहुंचने के लिए पर्याप्त समय तक छोड़ दिया जाता है। इसके विपरीत, प्रतिगामी धुंधला एक अधिक तेजी से धुंधला होने की प्रक्रिया है जिसमें ऊतक को जानबूझकर अधिक दाग दिया जाता है और फिर डी-दाग कर दिया जाता है। तो, प्रगतिशील और प्रतिगामी धुंधलापन के बीच यह महत्वपूर्ण अंतर है।
इसके अलावा, प्रगतिशील और प्रतिगामी धुंधला के बीच एक और महत्वपूर्ण अंतर यह है कि प्रगतिशील धुंधलापन के लिए एक अतिरिक्त कदम की आवश्यकता नहीं होती है जिसे विभेदन कहा जाता है, जबकि प्रतिगामी धुंधलापन के लिए अतिरिक्त दाग को हटाने के लिए भेदभाव की आवश्यकता होती है। इसके अलावा, प्रगतिशील दागों में हेमेटोक्सिलिन की कम सांद्रता होती है, जबकि प्रतिगामी दागों में हेमेटोक्सिलिन की उच्च सांद्रता होती है।
नीचे दिया गया इन्फोग्राफिक प्रगतिशील और प्रतिगामी धुंधलापन के बीच अधिक अंतर को दर्शाता है।
सारांश - प्रगतिशील बनाम प्रतिगामी धुंधला
प्रगतिशील धुंधलापन एक धीमी धुंधला तकनीक है जिसमें ऊतक को अंतिम बिंदु तक पहुंचने के लिए धुंधला समाधान में छोड़ दिया जाता है। इसलिए, अधिक धुंधला नहीं किया जाता है प्रगतिशील धुंधला हो जाना है। इसके विपरीत, प्रतिगामी धुंधला एक अधिक तेजी से धुंधला तकनीक है जिसमें ऊतक अधिक दागदार होता है और फिर डी-दाग होता है। प्रगतिशील धुंधलापन के लिए विभेदन (अतिरिक्त दाग को हटाना) की आवश्यकता नहीं होती है जबकि प्रतिगामी धुंधलापन के लिए अतिरिक्त दाग को हटाने के लिए तनु अम्ल अल्कोहल में विभेदन की आवश्यकता होती है। प्रगतिशील दागों में आमतौर पर हेमेटोक्सिलिन की कम सांद्रता होती है जबकि प्रतिगामी दागों में हेमेटोक्सिलिन की अधिक सांद्रता होती है। इस प्रकार, यह प्रगतिशील और प्रतिगामी धुंधला के बीच अंतर को सारांशित करता है।
