इसोक्रेटिक और ग्रेडिएंट रेफरेंस के बीच महत्वपूर्ण अंतर यह है कि ईकोक्रेटिक रेफरेंस मोबाइल चरण में एक निरंतर एकाग्रता बनाए रखने के लिए संदर्भित करता है, जबकि ग्रेडिएंट रेफरेंस मोबाइल चरण में एक अलग एकाग्रता बनाए रखने के लिए संदर्भित करता है।
क्रोमैटोग्राफी में ईश्वरीय और ढाल क्षालन शब्द का प्रयोग किया जाता है। क्रोमैटोग्राफिक रन के दौरान, हम एक स्थिर चरण का उपयोग करते हैं, जो एक गतिमान पदार्थ के साथ-साथ एक गतिशील चरण, गतिमान पदार्थ है। ईश्वरीय और क्रमिक क्षालन मोबाइल चरण के गुणों का वर्णन करता है।
इसोक्रेटिक रेफरेंस क्या है?
इसोक्रेटिक रेफरेंस क्रोमैटोग्राफी में इस्तेमाल किया जाने वाला एक शब्द है, जब मोबाइल चरण में निरंतर एकाग्रता होती है।यहां, पूरे क्रोमैटोग्राफिक प्रक्रिया में मोबाइल चरण की एकाग्रता स्थिर है। इस प्रक्रिया में, हम क्रोमैटोग्राम में रैखिक रूप से अवधारण समय के साथ बढ़ती हुई चोटी की चौड़ाई का निरीक्षण कर सकते हैं। हालांकि, यह एक नुकसान की ओर ले जाता है - देर से क्षालन के लिए देर से निकलने वाली चोटियाँ बहुत सपाट और चौड़ी हो जाती हैं। इसलिए, इन चौड़ी चोटियों को चोटियों के रूप में पहचाना जाना मुश्किल हो जाता है।
इसके अलावा, ईश्वरीय क्षालन में, स्तंभ आयामों के अनुसार चयनात्मकता नहीं बदलती है। इसका मतलब है कि चयनात्मकता स्तंभ आयामों में परिवर्तन पर निर्भर नहीं करती है। यहां, लंबाई और व्यास को स्तंभ आयाम माना जाता है। इसलिए, चोटियाँ उसी क्रम में गूंजती हैं।
ग्रेडिएंट एल्युशन क्या है?
ग्रेडिएंट रेफरेंस क्रोमैटोग्राफी में इस्तेमाल किया जाने वाला एक शब्द है, जब यहां मोबाइल फेज में अलग-अलग सांद्रता होती है। दूसरे शब्दों में, मोबाइल चरण की एकाग्रता को स्थिर नहीं रहना है। उदाहरण के लिए, एचपीएलसी में, एक सामान्य पृथक्करण विधि शुरू में 10% मेथनॉल का उपयोग करती है और धीरे-धीरे एकाग्रता को बढ़ाकर 90% पर समाप्त होती है।मोबाइल चरण में दो घटक होते हैं: एक कमजोर विलायक और एक मजबूत विलायक। कमजोर विलायक विलेय को धीरे-धीरे समाप्त करने की अनुमति देता है जबकि मजबूत विलायक विलेय के तेजी से क्षालन का कारण बनता है। रिवर्स फेज क्रोमैटोग्राफी में, हम पानी को कमजोर विलायक के रूप में और कार्बनिक विलायक को मजबूत विलायक के रूप में उपयोग करते हैं।
चित्र 01: एचपीएलसी
इसके अलावा, ग्रेडिएंट रेफरेंस विधि बाद के एल्यूटिंग घटकों को कम कर देती है ताकि वे क्रोमैटोग्राम में एक संकीर्ण शिखर देते हुए उन्हें तेजी से एल्यूट कर सकें। यह विधि चोटी के आकार और चोटी की ऊंचाई में भी सुधार करती है। इसके अलावा, ग्रेडिएंट रेफरेंस तकनीक में, रेफरेंस क्रम स्तंभ आयामों में परिवर्तन के साथ बदलता है।
इसोक्रेटिक और ग्रेडिएंट रेफरेंस में क्या अंतर है?
क्रोमैटोग्राफी में ईश्वरीय और ढाल क्षालन शब्द का प्रयोग किया जाता है।इसोक्रेटिक और ग्रेडिएंट रेफरेंस मोबाइल चरण के गुणों का वर्णन करते हैं। लोकतांत्रिक और क्रमिक क्षालन के बीच महत्वपूर्ण अंतर यह है कि लोकतांत्रिक क्षालन मोबाइल चरण में एक निरंतर एकाग्रता के रखरखाव को संदर्भित करता है जबकि ढाल क्षालन मोबाइल चरण में एक अलग एकाग्रता के रखरखाव को संदर्भित करता है।
ईश्वरीय रेफरेंस तकनीक में, चोटी की चौड़ाई अवधारण समय के साथ रैखिक रूप से बढ़ जाती है। हालांकि, ग्रेडिएंट रेफरेंस तकनीक में, बाद के एल्यूटिंग घटकों की अवधारण कम हो जाती है, जिससे रेफरेंस तेज हो जाता है और संकीर्ण चोटियां देता है। इसके अलावा, ईश्वरीय क्षालन में, चयनात्मकता स्तंभ आयामों पर निर्भर नहीं करती है, लेकिन ढाल क्षालन में, स्तंभ आयामों को बदलने के साथ चयनात्मकता बदल जाती है।
निम्न तालिका ईश्वरीय और क्रमिक क्षालन के बीच अंतर को सारांशित करती है।
सारांश - ईश्वरीय बनाम ढाल क्षालन
आइसोक्रेटिक रेफरेंस और ग्रेडिएंट रेफरेंस मोबाइल फेज के गुणों का वर्णन करते हैं। लोकतांत्रिक और क्रमिक क्षालन के बीच महत्वपूर्ण अंतर यह है कि लोकतांत्रिक क्षालन मोबाइल चरण में एक निरंतर एकाग्रता के रखरखाव को संदर्भित करता है जबकि ढाल क्षालन मोबाइल चरण में एक अलग एकाग्रता के रखरखाव को संदर्भित करता है।
