मुख्य अंतर - फ्लो साइटोमेट्री बनाम एफएसीएस
कोशिका सिद्धांत के सन्दर्भ में, कोशिकाएँ सभी जीवित जीवों की बुनियादी संरचनात्मक और कार्यात्मक इकाई हैं। कोशिका छँटाई एक पद्धति है जिसका उपयोग शारीरिक और रूपात्मक विशेषताओं के अनुसार विभिन्न कोशिकाओं को अलग करने के लिए किया जाता है। वे इंट्रासेल्युलर या बाह्य विशेषताओं के हो सकते हैं। डीएनए, आरएनए और प्रोटीन की बातचीत को इंट्रासेल्युलर इंटरएक्टिव गुण माना जाता है, जबकि आकार, आकार और विभिन्न सतह प्रोटीन को बाह्य गुण माना जाता है। आधुनिक विज्ञान में, कोशिका छँटाई पद्धतियों ने जैविक अध्ययनों में विभिन्न जाँचों में सहायता की है और चिकित्सा पर अनुसंधान के माध्यम से नए सिद्धांतों की स्थापना में भी मदद की है।सेल छँटाई विभिन्न पद्धतियों पर आयोजित की जाती है जिसमें कम उपकरणों के साथ आदिम और परिष्कृत मशीनरी के उपयोग के साथ उन्नत तकनीकी पद्धतियां शामिल हैं। फ्लो साइटोमेट्री, फ्लोरोसेंट सक्रिय सेल सॉर्टिंग (एफएसीएस), चुंबकीय सेल चयन और एकल सेल सॉर्टिंग उपयोग की जाने वाली प्रमुख पद्धतियां हैं। फ्लो साइटोमेट्री और एफएसीएस को उनके ऑप्टिकल गुणों के अनुसार कोशिकाओं को अलग करने के लिए विकसित किया गया है। FACS एक विशेष प्रकार का फ्लो साइटोमेट्री है। फ्लो साइटोमेट्री एक पद्धति है जिसका उपयोग विभिन्न कोशिका सतह अणुओं, आकार और आयतन के अनुसार कोशिकाओं की विषम जनसंख्या के विश्लेषण के दौरान किया जाता है जो एकल कोशिकाओं की जांच की अनुमति देता है। FACS एक ऐसी प्रक्रिया है जिसके द्वारा कोशिकाओं के एक नमूना मिश्रण को उनके प्रकाश प्रकीर्णन और प्रतिदीप्ति विशेषताओं के अनुसार दो या अधिक कंटेनरों में क्रमबद्ध किया जाता है। यह फ्लो साइटोमेट्री और FACS के बीच महत्वपूर्ण अंतर है।
फ्लो साइटोमेट्री क्या है?
फ्लो साइटोमेट्री एक ऐसी विधि है जिसका उपयोग इंट्रासेल्युलर अणुओं और कोशिका की सतह की अभिव्यक्ति की जांच और निर्धारण करने और अलग-अलग सेल प्रकारों को परिभाषित और चिह्नित करने के लिए किया जाता है।इसका उपयोग सेल वॉल्यूम और सेल आकार को निर्धारित करने और उप-जनसंख्या की शुद्धता का मूल्यांकन करने के लिए भी किया जाता है जो अलग-थलग हैं। यह लगभग एक ही समय में एकल कक्षों के बहु-पैरामीटर मूल्यांकन की अनुमति देता है। फ्लो साइटोमेट्री का उपयोग फ्लोरोसेंस की तीव्रता को मापने में किया जाता है जो फ्लोरोसेंटली लेबल वाले एंटीबॉडी के कारण उत्पन्न होता है जो प्रोटीन या लिगैंड की पहचान करने में मदद करता है जो संबंधित कोशिकाओं को बांधते हैं।
चित्र 01: फ्लो साइटोमेट्री
आम तौर पर, फ्लो साइटोमेट्री में मुख्य रूप से तीन सब सिस्टम शामिल होते हैं। वे तरल पदार्थ, इलेक्ट्रॉनिक्स और प्रकाशिकी हैं। फ्लो साइटोमेट्री में, पांच मुख्य घटक उपलब्ध होते हैं जिनका उपयोग सेल सॉर्टिंग में किया जाता है। वे हैं, एक प्रवाह सेल (तरल की एक धारा जो उन्हें परिवहन के लिए उपयोग की जाती है और ऑप्टिकल सेंसिंग प्रक्रिया के लिए कोशिकाओं को संरेखित करती है), माप की एक प्रणाली (विभिन्न प्रणालियों के हो सकते हैं, पारा और क्सीनन लैंप, उच्च शक्ति वाले वाटर-कूल्ड या कम शक्ति वाले एयर-कूल्ड लेजर या डायोड लेजर), एक एडीसी; एनालॉग टू डिजिटल कन्वर्टर सिस्टम, एम्पलीफिकेशन सिस्टम और विश्लेषण के लिए एक कंप्यूटर।अधिग्रहण वह प्रक्रिया है जिसके द्वारा फ्लो साइटोमीटर का उपयोग करके नमूनों से डेटा एकत्र किया जाता है। इस प्रक्रिया की मध्यस्थता एक कंप्यूटर द्वारा की जाती है जो फ्लो साइटोमीटर से जुड़ा होता है। कंप्यूटर में मौजूद सॉफ्टवेयर फ्लो साइटोमीटर से कंप्यूटर को दी गई जानकारी का विश्लेषण करता है। सॉफ्टवेयर में प्रवाह साइटोमीटर को नियंत्रित करने वाले प्रयोग के मापदंडों को समायोजित करने की क्षमता भी है।
एफएसीएस क्या है?
फ्लो साइटोमेट्री के संदर्भ में, फ्लोरेसेंस-एक्टिवेटेड सेल सॉर्टिंग (एफएसीएस) एक ऐसी विधि है जिसका उपयोग जैविक कोशिकाओं के मिश्रण के नमूने को अलग करने और छांटने में किया जाता है। कोशिकाओं को दो या दो से अधिक कंटेनर से अलग किया जाता है। छँटाई विधि कोशिका की भौतिक विशेषताओं पर आधारित होती है जिसमें कोशिका के प्रकाश प्रकीर्णन और प्रतिदीप्ति विशेषताएँ शामिल होती हैं। यह एक महत्वपूर्ण वैज्ञानिक तकनीक है, जिसका उपयोग प्रत्येक कोशिका से उत्सर्जित होने वाले प्रतिदीप्ति संकेतों के विश्वसनीय मात्रात्मक और गुणात्मक परिणाम प्राप्त करने के लिए किया जा सकता है।FACS के दौरान, प्रारंभ में, कोशिकाओं का पूर्व-प्राप्त मिश्रण; एक निलंबन को तरल की एक संकीर्ण धारा के केंद्र में निर्देशित किया जाता है जो तेजी से बह रहा है। तरल के प्रवाह को प्रत्येक कोशिका के व्यास के आधार पर निलंबन में कोशिकाओं को अलग करने के लिए डिज़ाइन किया गया है। निलंबन की धारा में कंपन का एक तंत्र लागू होता है जिसके परिणामस्वरूप अलग-अलग बूंदों का निर्माण होता है।
चित्र 02: FACS
सिस्टम को कैलिब्रेट किया जाता है ताकि एक सेल के साथ सिंगल ड्रॉपलेट बनाया जा सके। बूंदों के बनने से ठीक पहले, प्रवाह निलंबन एक प्रतिदीप्ति मापने वाले उपकरण के साथ चलता है जो प्रत्येक कोशिका की प्रतिदीप्ति विशेषता का पता लगाता है। बूंदों के निर्माण के बिंदु पर, एक विद्युत चार्जिंग रिंग लगाई जाती है जिसे प्रतिदीप्ति की तीव्रता के मापन से पहले रिंग में चार्ज किया जाता है।एक बार निलंबन धारा से बूंदों के बनने के बाद, बूंदों के भीतर एक चार्ज फंस जाता है जो फिर इलेक्ट्रोस्टैटिक विक्षेपण प्रणाली में प्रवेश करता है। चार्ज के मुताबिक, सिस्टम ड्रॉपलेट्स को अलग-अलग कंटेनर में डायवर्ट करता है। FACS में उपयोग की जाने वाली विभिन्न प्रणालियों के अनुसार चार्ज लगाने की विधि भिन्न होती है। FACS में उपयोग किए जाने वाले उपकरण को प्रतिदीप्ति सक्रिय सेल सॉर्टर के रूप में जाना जाता है।
फ्लो साइटोमेट्री और एफएसीएस में क्या समानता है?
फ्लो साइटोमेट्री और एफएसीएस को उनके ऑप्टिकल गुणों के अनुसार कोशिकाओं को अलग करने के लिए विकसित किया गया है।
फ्लो साइटोमेट्री और एफएसीएस में क्या अंतर है?
फ्लो साइटोमेट्री बनाम एफएसीएस |
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| फ्लो साइटोमेट्री एक पद्धति है जिसका उपयोग विभिन्न कोशिका सतह अणुओं, आकार और आयतन के अनुसार कोशिकाओं की विषम जनसंख्या के विश्लेषण के दौरान किया जाता है जो एकल कोशिकाओं की जांच की अनुमति देता है। | FACS एक ऐसी प्रक्रिया है जिसके द्वारा कोशिकाओं के एक नमूना मिश्रण को उनके प्रकाश प्रकीर्णन और प्रतिदीप्ति विशेषताओं के अनुसार दो या अधिक कंटेनरों में क्रमबद्ध किया जाता है। |
सारांश - फ्लो साइटोमेट्री बनाम एफएसीएस
कोशिका सभी जीवित जीवों की बुनियादी संरचनात्मक और कार्यात्मक इकाई है। सेल सॉर्टिंग वह प्रक्रिया है जिसके द्वारा कोशिकाओं को अलग किया जाता है और उनके इंट्रासेल्युलर और बाह्य गुणों के आधार पर विभिन्न श्रेणियों में विभेदित किया जाता है। सेल सॉर्टिंग में फ्लो साइटोमेट्री और एफएसीएस दो महत्वपूर्ण तरीके हैं। दोनों प्रक्रियाओं को उनके ऑप्टिकल गुणों के अनुसार कोशिकाओं को अलग करने के लिए विकसित किया गया है। फ्लो साइटोमेट्री एक पद्धति है जिसका उपयोग विभिन्न कोशिका सतह अणुओं, आकार और आयतन के अनुसार कोशिकाओं की विषम जनसंख्या के विश्लेषण के दौरान किया जाता है जो एकल कोशिकाओं की जांच की अनुमति देता है। FACS एक ऐसी प्रक्रिया है जिसके द्वारा कोशिकाओं के एक नमूना मिश्रण को उनके प्रकाश प्रकीर्णन और प्रतिदीप्ति विशेषताओं के अनुसार दो या अधिक कंटेनरों में क्रमबद्ध किया जाता है।फ्लो साइटोमेट्री और एफएसीएस के बीच यही अंतर है।
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