फ्लो साइटोमेट्री और इम्यूनोहिस्टोकेमिस्ट्री के बीच महत्वपूर्ण अंतर यह है कि फ्लो साइटोमेट्री एक ऐसी तकनीक है जो कोशिकाओं या कणों की आबादी की भौतिक और रासायनिक विशेषताओं का पता लगाने और मापने के लिए लेजर बीम का उपयोग करती है, जबकि इम्यूनोहिस्टोकेमिस्ट्री एक ऐसी तकनीक है जो मोनोक्लोनल और ऊतकों में विशिष्ट प्रतिजनों का पता लगाने के लिए पॉलीक्लोनल एंटीबॉडी।
फ्लो साइटोमेट्री और इम्यूनोहिस्टोकेमिस्ट्री दो तकनीकें हैं जिनका उपयोग बीमारियों, विशेष रूप से कैंसर के निदान के लिए किया जाता है। फ्लो साइटोमेट्री कोशिकाओं के भौतिक और रासायनिक गुणों को चिह्नित करने के लिए एक लेजर बीम का उपयोग करती है। इम्यूनोहिस्टोकेमिस्ट्री ऊतक वर्गों में विशिष्ट एंटीजन का पता लगाने के लिए मोनोक्लोनल और पॉलीक्लोनल एंटीबॉडी का उपयोग करती है।
फ्लो साइटोमेट्री क्या है?
फ्लो साइटोमेट्री कोशिका जीव विज्ञान में एक लोकप्रिय तकनीक है। यह तकनीक सेल आबादी की भौतिक और रासायनिक विशेषताओं का पता लगाती है और मापती है। फ्लो साइटोमेट्री का व्यापक रूप से इम्यूनोलॉजी, आणविक जीव विज्ञान, बैक्टीरियोलॉजी, वायरोलॉजी, कैंसर जीव विज्ञान और संक्रामक रोग निगरानी के क्षेत्र में उपयोग किया जाता है। यह एक तरल मिश्रण में कोशिकाओं को गिनने, छांटने और प्रोफाइल करने के लिए एक प्रकाश स्रोत के रूप में एक लेजर का उपयोग करता है। इसलिए, यह एक समाधान में कोशिकाओं का तेजी से बहु-पैरामीट्रिक विश्लेषण प्रदान करता है।
चित्र 01: फ्लो साइटोमेट्री
यह तकनीक कोशिका के नमूने को फ्लो साइटोमीटर में इंजेक्ट करने से शुरू होती है। फ्लो साइटोमीटर में तीन मुख्य प्रणालियाँ हैं: फ्लुइडिक्स (एक फ्लो सेल), ऑप्टिक्स (विभिन्न फिल्टर, लाइट डिटेक्टर और लाइट सोर्स), और इलेक्ट्रॉनिक्स (फ्लो साइटोमीटर इंस्ट्रूमेंटेशन)।इससे पहले, विश्लेषण की जा रही कोशिकाओं के आधार पर नमूने को विशिष्ट रंगों से उपचारित किया जाना चाहिए। इसलिए, यह विभिन्न प्रकार के फ्लोरोसेंट अभिकर्मकों का उपयोग करता है जैसे कि फ्लोरोसेंटली संयुग्मित एंटीबॉडी, डीएनए बाइंडिंग डाई, व्यवहार्यता डाई, आयन इंडिकेटर डाई और फ्लोरोसेंट एक्सप्रेशन प्रोटीन, आदि। यह उपकरण लेजर बीम के माध्यम से एक समय में एक सेल के प्रवाह की अनुमति देता है। जब प्रकाश सेल और उसके घटकों के माध्यम से बिखरता है, तो यह विभिन्न तरंग दैर्ध्य के बैंड का उत्सर्जन करता है। इस तरह, दसियों हज़ार कोशिकाओं की शीघ्रता से जाँच की जा सकती है, और एकत्रित डेटा को कंप्यूटर द्वारा संसाधित किया जाता है।
इम्यूनोहिस्टोकेमिस्ट्री क्या है?
इम्यूनोहिस्टोकेमिस्ट्री एक ऐसी तकनीक है जो ब्याज के प्रतिजन के ऊतक वितरण को निर्धारित करने के लिए मोनोक्लोनल और पॉलीक्लोनल एंटीबॉडी का उपयोग करती है। यह हिस्टोपैथोलॉजी में एक सामान्य तकनीक है। यह एक माइक्रोस्कोपी-आधारित, इम्यूनोस्टेनिंग तकनीक है। यह तकनीक फ्लोरोसेंटली लेबल वाले एंटीबॉडी के साथ विशिष्ट बंधन के आधार पर ऊतक की कोशिकाओं में एंटीजन की चयनात्मक पहचान और स्थानीयकरण की सुविधा प्रदान करती है।इस तकनीक का व्यापक रूप से कैंसर के निदान के लिए उपयोग किया जाता है क्योंकि विशिष्ट ट्यूमर एंटीजन को कुछ कैंसर में नए या अप-विनियमित किया जाता है। यह तकनीक दो महत्वपूर्ण ट्यूमर, यानी स्तन और प्रोस्टेट के कार्सिनोमा में चिकित्सीय प्रतिक्रिया की भविष्यवाणी करने में बहुत उपयोगी है। रोग निदान के अलावा, दवा विकास और जैविक अनुसंधान के क्षेत्र में इम्यूनोहिस्टोकेमिस्ट्री का उपयोग किया जाता है। इसके अलावा, ऊतकों में संक्रामक एजेंटों का पता लगाने और पुष्टि करते समय इम्यूनोहिस्टोकेमिस्ट्री उपयोगी होती है।
चित्र 02: इम्यूनोहिस्टोकेमिस्ट्री
इस तकनीक के लिए बायोप्सी की आवश्यकता होती है, और उन्हें एक माइक्रोटोम के साथ वर्गों में संसाधित किया जाता है, और फिर वर्गों को एक उपयुक्त एंटीबॉडी के साथ इनक्यूबेट किया जाता है। एंटीजन-एंटीबॉडी के बंधन की साइटों को प्रकाश या फ्लोरोसेंट माइक्रोस्कोप के तहत देखा जाता है।
फ्लो साइटोमेट्री और इम्यूनोहिस्टोकेमिस्ट्री के बीच समानताएं क्या हैं?
- फ्लो साइटोमेट्री और इम्यूनोहिस्टोकेमिस्ट्री दो तकनीकें हैं जो फ्लोरोसेंटली लेबल वाले एंटीबॉडी का उपयोग करती हैं।
- दोनों तकनीकें कोशिका की सतह पर या कोशिकाओं के भीतर एंटीजन का पता लगा सकती हैं।
- इसलिए, दोनों तकनीकें बीमारियों, विशेष रूप से संक्रामक रोगों और कैंसर का पता लगाने की अनुमति देती हैं।
फ्लो साइटोमेट्री और इम्यूनोहिस्टोकेमिस्ट्री में क्या अंतर है?
फ्लो साइटोमेट्री एक लेजर-आधारित तकनीक है जो एक सेल आबादी की भौतिक और रासायनिक विशेषताओं का पता लगाती है और मापती है। इम्यूनोहिस्टोकेमिस्ट्री एक माइक्रोस्कोपी-आधारित तकनीक है जो एक ऊतक की कोशिकाओं में एंटीजन की चयनात्मक पहचान और स्थानीयकरण की अनुमति देती है। तो, यह फ्लो साइटोमेट्री और इम्यूनोहिस्टोकेमिस्ट्री के बीच महत्वपूर्ण अंतर है। इसके अलावा, फ्लो साइटोमेट्री एक लेजर बीम का उपयोग करती है, जबकि इम्यूनोहिस्टोकेमिस्ट्री को एंटीबॉडी की आवश्यकता होती है।फ्लो साइटोमीटर फ्लो साइटोमेट्री में आवश्यक मुख्य उपकरण है, जबकि इम्यूनोहिस्टोकेमिस्ट्री को एक प्रकाश या फ्लोरोसेंट माइक्रोस्कोप की आवश्यकता होती है।
नीचे सारणीबद्ध रूप में फ्लो साइटोमेट्री और इम्यूनोहिस्टोकेमिस्ट्री के बीच अंतर का सारांश है।
सारांश - फ्लो साइटोमेट्री बनाम इम्यूनोहिस्टोकेमिस्ट्री
फ्लो साइटोमेट्री को फ्लो साइटोमीटर की जरूरत होती है, जबकि इम्यूनोहिस्टोकेमिस्ट्री को एक साधारण या फ्लोरोसेंट माइक्रोस्कोप की जरूरत होती है। इसके अलावा, फ्लो साइटोमेट्री एक लेजर बीम का उपयोग करती है, जबकि इम्यूनोहिस्टोकेमिस्ट्री मोनोक्लोनल और पॉलीक्लोनल एंटीबॉडी का उपयोग करती है। इसके अलावा, फ्लो साइटोमेट्री की तुलना में इम्यूनोहिस्टोकेमिस्ट्री की लागत अपेक्षाकृत कम है। इस प्रकार, यह फ्लो साइटोमेट्री और इम्यूनोहिस्टोकेमिस्ट्री के बीच अंतर का सारांश है।दोनों तकनीक कैंसर और संक्रामक रोगों जैसे रोगों के निदान में उपयोगी हैं।
