मुख्य अंतर - टाइप I बनाम टाइप II प्रतिबंध एंजाइम
एक प्रतिबंध एंजाइम, जिसे आमतौर पर प्रतिबंध एंडोन्यूक्लिज़ के रूप में जाना जाता है, में डीएनए अणुओं को छोटे टुकड़ों में विभाजित करने की क्षमता होती है। यह क्लीजिंग प्रक्रिया डीएनए अणु के विशेष पहचान स्थल के पास या उस पर होती है जिसे प्रतिबंध स्थल कहा जाता है। एक मान्यता साइट आमतौर पर 4-8 बेस पेयर से बनी होती है। दरार की साइट के आधार पर, प्रतिबंध एंजाइम चार अलग-अलग प्रकार के हो सकते हैं; टाइप I, टाइप II, टाइप III और टाइप IV। दरार की साइट के अलावा, चार समूहों में प्रतिबंध एंजाइमों को अलग करते समय संरचना, सह कारकों की आवश्यकता और लक्ष्य अनुक्रम की स्थिति जैसे कारकों को ध्यान में रखा जाता है।डीएनए अणु के दरार के दौरान, क्लीविंग साइट या तो प्रतिबंध स्थल पर या प्रतिबंध स्थल से कुछ दूरी पर हो सकती है। डीएनए के दरार की प्रक्रिया के दौरान, प्रतिबंध एंजाइम डीएनए के डबल हेलिक्स में प्रत्येक शुगर फॉस्फेट बैकबोन के माध्यम से दो चीरे बनाते हैं। रेस्ट्रिक्शन एन्जाइम मुख्य रूप से अचिया और बैक्टीरिया में पाए जाते हैं। वे इन एंजाइमों का उपयोग हमलावर वायरस के खिलाफ रक्षा तंत्र के रूप में करते हैं। प्रतिबंध एंजाइम विदेशी (रोगजनक) डीएनए को साफ करते हैं, लेकिन अपना डीएनए नहीं। इसका अपना डीएनए मिथाइलट्रांसफेरेज नामक एंजाइम द्वारा संरक्षित होता है जो मेजबान डीएनए में संशोधन करता है और दरार को रोकता है। टाइप I प्रतिबंध एंजाइम में एक क्लीविंग साइट होती है जो मान्यता स्थल से दूर होती है। टाइप II प्रतिबंध एंजाइम मान्यता स्थल के भीतर या उसके करीब की दूरी पर ही साफ हो जाते हैं। यह टाइप I और टाइप II प्रतिबंध एंजाइम के बीच महत्वपूर्ण अंतर है।
I प्रकार का प्रतिबंध एंजाइम क्या है?
टाइप I प्रतिबंध एंजाइम तीन मल्टी सबयूनिट से बना पेंटामेरिक प्रोटीन हैं: प्रतिबंध सबयूनिट, मिथाइलेशन सबयूनिट, और डीएनए अनुक्रम मान्यता सबयूनिट।ये सबयूनिट गैर-समान हैं। उन्हें शुरू में एस्चेरिचिया कोलाई के दो अलग-अलग रूपों में पहचाना गया था। इन प्रतिबंध एंजाइमों का दरार स्थल विभिन्न यादृच्छिक बिंदुओं पर मौजूद होता है, आमतौर पर पहचान स्थल से 1000 आधार जोड़े दूर होते हैं। इन प्रतिबंध एंजाइमों को इसकी सक्रियता के लिए एटीपी, एमजी2+ और एस-एडेनोसिल-एल-मेथियोनीन की आवश्यकता होती है। टाइप I प्रतिबंध एंजाइमों में मिथाइलेज़ और प्रतिबंध दोनों गतिविधियाँ होती हैं। बैक्टीरिया हमलावर वायरस से सेलुलर रक्षा तंत्र के रूप में प्रतिबंध एंजाइम का उपयोग करते हैं। प्रतिबंध एंजाइम वायरल डीएनए को तोड़ते हैं और उन्हें नष्ट कर देते हैं। लेकिन अपने स्वयं के मेजबान डीएनए की दरार को रोकने के लिए, टाइप I प्रतिबंध एंजाइम एक मिथाइलेशन सुरक्षा प्रदान करता है। यह मेजबान डीएनए को संशोधित करता है और दरार को रोकता है। भले ही ये प्रतिबंध एंजाइम जैव रासायनिक रूप से महत्वपूर्ण हैं, लेकिन इनका व्यापक रूप से उपयोग नहीं किया जाता है क्योंकि ये असतत प्रतिबंध टुकड़े या जेल बाध्यकारी पैटर्न प्रदान नहीं करते हैं।
टाइप II प्रतिबंध एंजाइम क्या हैं?
टाइप II प्रतिबंध एंजाइमों में उनकी संरचना के भीतर दो समान सबयूनिट होते हैं।होमोडीमर टाइप II प्रतिबंध एंजाइमों द्वारा मान्यता स्थलों के साथ बनते हैं। मान्यता स्थल आमतौर पर पैलिंड्रोमिक होते हैं और अविभाजित होते हैं। इसमें 4-8 आधार जोड़े की लंबाई होती है। टाइप I के विपरीत, टाइप II प्रतिबंध एंजाइम की दरार स्थल मान्यता स्थल पर मौजूद है या मान्यता स्थल के निकट दूरी पर मौजूद है।
चित्र 02: टाइप II प्रतिबंध एंजाइम
ये प्रतिबंध एंजाइम जैव रासायनिक रूप से महत्वपूर्ण हैं और व्यापक रूप से व्यावसायिक रूप से उपलब्ध हैं। इसकी सक्रियता के लिए, इसे केवल Mg2+ की आवश्यकता होती है, इसमें मिथाइलेशन गतिविधि नहीं होती है और यह केवल प्रतिबंध गतिविधि का कार्य प्रदान करता है। ये प्रतिबंध एंजाइम डीएनए अणुओं को होमोडीमर के रूप में बांधते हैं और सममित डीएनए अनुक्रमों के साथ-साथ विषम अनुक्रमों को पहचानने की क्षमता रखते हैं।
टाइप I और टाइप II प्रतिबंध एंजाइमों के बीच समानताएं क्या हैं?
- टाइप I और टाइप II प्रतिबंध एंजाइम एंजाइम के प्रकार हैं जो प्रतिबंध एंडोन्यूक्लिअस हैं जो डीएनए अणुओं के छोटे टुकड़ों में दरार में शामिल होते हैं।
- दोनों आणविक जैविक तकनीकों में उपयोगी हैं।
टाइप I और टाइप II प्रतिबंध एंजाइम में क्या अंतर है?
टाइप I बनाम टाइप II प्रतिबंध एंजाइम |
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टाइप I प्रतिबंध एंजाइम एक डीएनए प्रतिबंध एंजाइम है जो डीएनए को उसके मान्यता स्थल से दूर यादृच्छिक स्थलों पर साफ करता है। | टाइप II प्रतिबंध एंजाइम एक डीएनए प्रतिबंध एंजाइम है जो मान्यता स्थल के करीब या भीतर परिभाषित स्थिति में डीएनए को साफ करता है। |
रचना | |
टाइप I प्रतिबंध एंजाइम एक जटिल एंजाइम है जो तीन (03) गैर-समान उप इकाइयों से बना होता है। | टाइप II प्रतिबंध एंजाइम एक साधारण एंजाइम है जो दो समान सबयूनिट्स से बना होता है। |
आणविक भार | |
टाइप I प्रतिबंध एंजाइम का वजन 400, 000 डाल्टन होता है। | टाइप II प्रतिबंध एंजाइम की भार सीमा 20, 000 - 100, 000 डाल्टन है। |
दरार का क्रम | |
दरार अनुक्रम प्रकार I प्रतिबंध एंजाइम में विशिष्ट नहीं है। | टाइप II प्रतिबंध एंजाइम में दरार का एक विशिष्ट क्रम होता है। |
दरार की जगह | |
दरार की साइट टाइप I प्रतिबंध एंजाइम में मान्यता स्थल से 1000 न्यूक्लियोटाइड दूर है। | दरार का स्थान मान्यता स्थल पर या मान्यता स्थल से थोड़ी दूरी पर टाइप II प्रतिबंध एंजाइम में मौजूद है। |
सक्रियण के लिए सहकारक | |
टाइप I प्रतिबंध एंजाइम को सक्रिय करने के लिए एटीपी, एमजी2+ और एस-एडेनोसिल-एल-मेथियोनीन की आवश्यकता होती है। | टाइप II प्रतिबंध एंजाइम को सक्रिय करने के लिए केवल Mg2+ की आवश्यकता होती है। |
मिथाइलेशन गतिविधि | |
टाइप I एंजाइम मिथाइलेशन द्वारा डीएनए को सुरक्षा प्रदान करता है। | टाइप II प्रतिबंध एंजाइमों में कोई मिथाइलेशन गतिविधि नहीं। |
एंजाइम की गतिविधि | |
टाइप I प्रतिबंध एंजाइम एंडोन्यूक्लाइज (प्रतिबंध) और मिथाइलेशन गतिविधियों दोनों प्रदान करता है। | टाइप II प्रतिबंध एंजाइम केवल प्रतिबंध गतिविधि प्रदान करता है। |
उदाहरण | |
ईकोके, ईकोबी | हिंद II, इकोआरआई |
सारांश - टाइप I बनाम टाइप II प्रतिबंध एंजाइम
प्रतिबंध एंजाइम को जैविक कैंची कहा जाता है जो डीएनए अणुओं को छोटे पदार्थों में विभाजित करती है। रिस्ट्रिक्शन एन्जाइम्स को क्लेवाज साइट के स्थान के अनुसार 04 विभिन्न श्रेणियों में विभेदित किया जाता है, जो कि मान्यता स्थल, सह कारक मौजूद, संरचना और लक्ष्य अनुक्रम की स्थिति के संबंध में है। इसके सक्रियण के लिए, टाइप I प्रतिबंध एंजाइमों को एटीपी, एमजी2+, और एस-एडेनोसिल-एल-मेथियोनीन की आवश्यकता होती है। टाइप I प्रतिबंध एंजाइम की दरार साइट आमतौर पर मान्यता स्थल से 1000 बेस जोड़े दूर मौजूद होती है और डीएनए को मिथाइलस सुरक्षा प्रदान करती है। टाइप II प्रतिबंध एंजाइमों को इसके सक्रियण के लिए केवल Mg2+की आवश्यकता होती है। दरार स्थल मान्यता स्थल पर या उसके निकट मौजूद है।इसमें मिथाइलेशन गतिविधि नहीं है और यह व्यावसायिक रूप से व्यापक रूप से उपलब्ध है। यह प्रकार I प्रतिबंध एंजाइम और प्रकार II प्रतिबंध एंजाइम के बीच का अंतर है।
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