मुख्य अंतर - प्राथमिक बनाम माध्यमिक सेल संस्कृति
प्राइमरी और सेकेंडरी सेल कल्चर के बीच अंतर पर चर्चा करने से पहले, आइए पहले संक्षेप में परिभाषित करें कि सेल कल्चर क्या है। सेल कल्चर एक जानवर या पौधे से कोशिकाओं को हटाने और कृत्रिम रूप से नियंत्रित वातावरण में बाद में वृद्धि की प्रक्रिया है। कोशिकाओं को सीधे ऊतक से हटाया जा सकता है और एंजाइमेटिक या यांत्रिक तरीकों से अलग किया जा सकता है या पहले से स्थापित संस्कृति से प्राप्त किया जा सकता है। प्राथमिक और द्वितीयक कोशिका संवर्धन के बीच महत्वपूर्ण अंतर यह है कि प्राथमिक कोशिका संवर्धन के लिए कोशिकाएँ सीधे किसी जानवर या पौधे के ऊतक से प्राप्त की जाती हैं, जबकि द्वितीयक कोशिका संवर्धन के लिए कोशिकाएँ पहले से स्थापित प्राथमिक संस्कृति से प्राप्त की जाती हैं।इसलिए, माध्यमिक संस्कृति प्राथमिक संस्कृति से उत्पन्न एक नई संस्कृति है।
आइए प्राइमरी और सेकेंडरी सेल कल्चर के अर्थ को और बेहतर ढंग से अलग करने के लिए देखते हैं।
प्राथमिक कोशिका संवर्धन क्या है?
प्राथमिक सेल कल्चर एंजाइमेटिक या यांत्रिक उपायों के माध्यम से माता-पिता के जानवर या पौधे के ऊतकों से कोशिकाओं का पृथक्करण है और नियंत्रित पर्यावरणीय परिस्थितियों में कांच या प्लास्टिक के कंटेनरों में एक उपयुक्त सब्सट्रेट में कोशिकाओं के विकास को बनाए रखता है। प्राथमिक संस्कृति में कोशिकाओं का कैरियोटाइप (यूकैरियोटिक कोशिका के नाभिक में गुणसूत्रों की संख्या और उपस्थिति) मूल ऊतक में उन कोशिकाओं के समान होता है। प्राथमिक कोशिका संवर्धन को संवर्धन में प्रयुक्त कोशिकाओं के प्रकार के आधार पर दो भागों में वर्गीकृत किया जा सकता है।
एंकरेज डिपेंडेंट या एडहेरेंट सेल - इन कोशिकाओं को विकास के लिए अटैचमेंट की आवश्यकता होती है। पक्षपाती कोशिकाएं आमतौर पर अंगों के ऊतकों से प्राप्त होती हैं, उदाहरण के लिए गुर्दे से जहां कोशिकाएं गतिहीन होती हैं और संयोजी ऊतक में अंतर्निहित होती हैं।
एंकरेज इंडिपेंडेंट या सस्पेंशन सेल - इन सेल्स को ग्रोथ के लिए अटैचमेंट की जरूरत नहीं होती है। दूसरे शब्दों में, ये कोशिकाएँ संवर्धन पोत की सतह से नहीं जुड़ती हैं। सभी निलंबन संस्कृतियां रक्त प्रणाली की कोशिकाओं से प्राप्त होती हैं; उदाहरण के लिए, श्वेत रक्त कोशिका लिम्फोसाइट प्लाज्मा में निलंबित है।
प्राथमिक संस्कृतियों से प्राप्त कोशिकाओं का जीवनकाल सीमित होता है। कई कारणों से कोशिकाओं को अनिश्चित काल तक नहीं रखा जा सकता है। प्राइमरी कल्चर में सेल नंबर बढ़ने से सब्सट्रेट और पोषक तत्वों की कमी हो जाएगी। साथ ही, सेल्युलर गतिविधि धीरे-धीरे कल्चर में विषाक्त मेटाबोलाइट्स के स्तर को बढ़ाएगी, जिससे आगे कोशिका वृद्धि बाधित होगी।
इस स्तर पर, निरंतर कोशिका वृद्धि सुनिश्चित करने के लिए एक माध्यमिक या उपसंस्कृति का प्रदर्शन करना पड़ता है।
सेकेंडरी सेल कल्चर क्या है?
जैसा कि ऊपर वर्णित है, जब अनुगामी संस्कृतियों में कोशिकाएं सभी उपलब्ध सब्सट्रेट पर कब्जा कर लेती हैं या जब निलंबन संस्कृतियों में कोशिकाएं आगे की वृद्धि का समर्थन करने के लिए माध्यम की क्षमता को पार कर जाती हैं, तो कोशिका प्रसार कम होने लगता है या पूरी तरह से समाप्त हो जाता है। निरंतर वृद्धि के लिए इष्टतम सेल घनत्व बनाए रखने और आगे प्रसार को प्रोत्साहित करने के लिए, प्राथमिक संस्कृति को उपसंस्कृत किया जाना है। इस प्रक्रिया को द्वितीयक कोशिका संवर्धन के रूप में जाना जाता है।
सेकेंडरी सेल कल्चर के दौरान, प्राइमरी कल्चर से कोशिकाओं को नए ग्रोथ मीडियम के साथ एक नए बर्तन में ट्रांसफर किया जाता है। इस प्रक्रिया में पिछले विकास मीडिया को हटाना और अनुयाई प्राथमिक संस्कृतियों में अनुयाई कोशिकाओं को अलग करना शामिल है। कोशिकाओं को बढ़ते स्थान और ताजा पोषक तत्व प्रदान करने के लिए समय-समय पर माध्यमिक कोशिका संवर्धन की आवश्यकता होती है, जिससे कोशिकाओं के जीवन को लम्बा खींचकर संस्कृति में कई कोशिकाओं का विस्तार होता है।
एक प्राथमिक संस्कृति के एक निश्चित मात्रा को ताजा विकास माध्यम के बराबर मात्रा में संवर्धन करने वाला माध्यमिक सेल लाइनों के दीर्घकालिक रखरखाव की अनुमति देता है।उदाहरण के लिए औद्योगिक प्रक्रियाओं या वैज्ञानिक प्रयोगों में, कोशिकाओं की संख्या बढ़ाने के लिए ताजा विकास माध्यम की एक बड़ी मात्रा में माध्यमिक संवर्धन का अभ्यास किया जाता है।
प्राथमिक सेल कल्चर और सेकेंडरी सेल कल्चर में क्या अंतर है?
जैसा कि हम अब दो शब्दों को अलग-अलग समझ चुके हैं, हम उनके बीच अन्य अंतर खोजने के लिए दोनों की तुलना करेंगे।
प्राथमिक और/या सेकेंडरी सेल कल्चर का उपयोग कब करें
यह इस बात पर निर्भर करता है कि आप क्या सीखना चाहते हैं और आप किस प्रकार का प्रयोग करते हैं।
प्राथमिक सेल कल्चर: इस प्रक्रिया का उपयोग माता-पिता के ऊतक से संस्कृति कोशिकाओं के लिए किया जाता है। जनसंख्या वृद्धि के साथ सब्सट्रेट और पोषक तत्वों की थकावट और विषाक्त पदार्थों के निर्माण के कारण प्राथमिक संस्कृति में कोशिकाओं का एक सीमित जीवनकाल होगा। प्राथमिक संस्कृति, अलगाव प्रक्रिया में प्रयुक्त पृथक्करण तकनीकों के बावजूद, कई प्रकार की कोशिकाएँ हो सकती हैं। हालाँकि, यह सभी प्रकार के प्रयोगों में एक समस्या नहीं हो सकती है और ऐसे मामलों में अकेले प्राथमिक संस्कृति का उपयोग किया जा सकता है।
सेकेंडरी सेल कल्चर: आमतौर पर प्राइमरी कल्चर से प्राप्त कोशिकाओं की संख्या प्रयोगों में अपर्याप्त होती है। सेकेंडरी सेल कल्चर सेल की आबादी के विस्तार और जीवन काल को लम्बा करने का अवसर देता है। यह एक चयनात्मक माध्यम के उपयोग के साथ कोशिकाओं के आगे चयन को सक्षम बनाता है और जनसंख्या में जीनोटाइपिक और फेनोटाइपिक एकरूपता की अनुमति देता है। इस प्रक्रिया का उपयोग बुनियादी लक्षण वर्णन, संरक्षण और प्रयोग के लिए प्रतिकृति संस्कृतियों को उत्पन्न करने के लिए किया जाता है।
माता-पिता के ऊतक से समानता
प्राइमरी सेल कल्चर: प्राइमरी सेल कल्चर के लिए सेल सीधे किसी जानवर या पौधे के टिश्यू से प्राप्त होते हैं। इसलिए, प्राथमिक संस्कृति में कोशिकाएं अपने पैतृक ऊतक के समान होती हैं और तदनुसार, जैविक प्रतिक्रिया द्वितीयक कोशिका संवर्धन की तुलना में इन विवो स्थिति के करीब हो सकती है।
सेकेंडरी सेल कल्चर: सेकेंडरी सेल कल्चर प्राथमिक सेल कल्चर से उत्पन्न होता है। हालांकि उप-संवर्धन कोशिकाओं के जीवनकाल को बढ़ाता है, लेकिन संभावना है कि कुछ चरणों के बाद, कोशिकाओं को रूपांतरित किया जा सकता है या एक निश्चित मात्रा से अधिक समय तक विभाजित नहीं होने का नियंत्रण खो सकता है।यह उप-संवर्धन के दौरान प्राथमिक कोशिकाओं में उत्परिवर्तन या आनुवंशिक परिवर्तन के कारण हो सकता है। उदाहरण के लिए, कुछ सूक्ष्मजीव अपने जीव विज्ञान को बदलकर, संस्कृति की स्थितियों के अनुकूल होने की प्रवृत्ति रखते हैं, जो कि उनके प्राकृतिक वातावरण से अधिकतर भिन्न होता है।
संवर्धन की प्रक्रिया – प्रकोष्ठ प्राप्त करना
प्राइमरी सेल कल्चर: प्राइमरी सेल कल्चर में, पशु या पौधे के ऊतक रिन्सिंग, विच्छेदन और यांत्रिक या एंजाइमेटिक डिसएग्रीगेशन के चरणों से गुजरेंगे। अलग-अलग ऊतक में विभिन्न प्रकार की कोशिकाएँ होंगी, और इसके लिए रुचि की कोशिकाओं को अलग करने के लिए एक पृथक्करण तकनीक को अपनाने की आवश्यकता हो सकती है।
सेकेंडरी सेल कल्चर: सेकेंडरी सेल कल्चर में, यदि प्राइमरी कल्चर एक अनुयाई कल्चर है, तो पहला कदम कोशिकाओं को यांत्रिक या एंजाइमेटिक माध्यमों से अटैचमेंट (कल्चर पोत की सतह) से अलग करना है। फिर, एकल कोशिका निलंबन बनाने के लिए कोशिकाओं को एक दूसरे से अलग करना पड़ता है।
संस्कृति में कोशिकाओं की संख्या
प्राथमिक कोशिका संवर्धन: पूर्ण एकल कोशिका निलंबन होना वांछनीय नहीं है, क्योंकि कई प्राथमिक कोशिकाएं छोटे समूहों में बेहतर ढंग से जीवित रहती हैं।
सेकेंडरी सेल कल्चर: यह सिंगल सेल सस्पेंशन जेनरेट करने के लिए पर्याप्त है।
संस्कृति का जीवन काल
प्राइमरी सेल कल्चर: प्राइमरी सेल कल्चर का जीवनकाल सीमित होता है। जैसा कि ऊपर बताया गया है, ऐसा इसलिए है क्योंकि कोशिकाओं की वृद्धि सब्सट्रेट और पोषक तत्वों को समाप्त कर देती है और विषाक्त मेटाबोलाइट्स के संचय की ओर ले जाती है। नतीजतन, कोशिकाओं की वृद्धि दर धीरे-धीरे कम हो जाती है, जिससे कोशिकाओं की मृत्यु हो जाती है।
सेकेंडरी सेल कल्चर: सेकेंडरी सेल कल्चर कोशिकाओं के जीवनकाल को बढ़ाता है। आवधिक उप-संवर्धन प्राथमिक कोशिकाओं के परिवर्तन या आनुवंशिक परिवर्तन के माध्यम से अमर कोशिकाओं का उत्पादन कर सकता है।
दूषित होने का खतरा
प्राइमरी सेल कल्चर: प्राइमरी सेल कल्चर की देखभाल करना अधिक कठिन होता है। आम तौर पर, प्राथमिक सेल संस्कृतियों को अमीनो एसिड, सूक्ष्म पोषक तत्वों, कुछ हार्मोन और वृद्धि कारकों के समृद्ध मिश्रण की आवश्यकता होती है।नतीजतन, प्राथमिक सेल संस्कृतियों में संदूषण का जोखिम माध्यमिक सेल संस्कृतियों की तुलना में अधिक है।
सेकेंडरी सेल कल्चर: सेकेंडरी सेल कल्चर को बनाए रखना अपेक्षाकृत आसान होता है, और प्राइमरी सेल कल्चर की तुलना में संदूषण का जोखिम कम होता है।
इस लेख में, हमने प्राथमिक सेल कल्चर और सेकेंडरी सेल कल्चर की शर्तों को समझने का प्रयास किया है, जिसके बाद उनके बीच महत्वपूर्ण अंतर को उजागर करने के लिए तुलना की गई है। मूल अंतर यह है कि संस्कृति से कोशिकाओं को कैसे प्राप्त किया जाता है; प्राथमिक कोशिका संवर्धन के लिए कोशिकाएँ सीधे किसी जानवर या पौधे के ऊतक से प्राप्त की जाती हैं, जबकि द्वितीयक कोशिका संवर्धन के लिए कोशिकाएँ पहले से स्थापित प्राथमिक संस्कृति से प्राप्त की जाती हैं।
