ट्रांसफेक्शन बनाम ट्रांसफेक्शन
रूपांतरण और अभिकर्मक दो सरल तकनीकें हैं जिनका उपयोग एक विदेशी जीन को एक मेजबान कोशिका में पेश करने के लिए किया जाता है। हालांकि, ये तकनीक मेजबान या वेक्टर सिस्टम के प्रकार पर निर्भर करती है।
सेल ट्रांसफॉर्मेशन क्या है?
ट्रांसफॉर्मेशन वह तकनीक है जिसका उपयोग जीन को यीस्ट और बैक्टीरिया कोशिकाओं में पेश करने के लिए किया जाता है। यह तकनीक आमतौर पर जीन में आनुवंशिक परिवर्तन का कारण बनती है, और इस प्रकार जीन की अभिव्यक्ति स्थायी होती है। जीवाणु परिवर्तन पहली बार 1928 में फ्रेडरिक ग्रिफिथ द्वारा पेश किया गया था। फिर 1970 के दशक की शुरुआत में, इस तकनीक का इस्तेमाल ई.कोलाई ई. कोलाई के परिवर्तन की प्रक्रिया के दौरान, कोशिकाओं को CaCl2 के बर्फ के ठंडे घोल में भिगोया जाता है। यह कदम ई. कोलाई कोशिकाओं को सक्षम बनाता है। उसके बाद, सक्षम कोशिकाओं को प्लास्मिड डीएनए के साथ मिलाया जाता है और 20-30 मिनट के लिए बर्फ पर इनक्यूबेट किया जाता है। फिर सेल में डीएनए के हस्तांतरण को सक्षम करने के लिए एक छोटा हीट शॉक दिया जाता है। अंत में, कोशिकाओं को पोषक तत्व शोरबा में रखा जाता है और प्लास्मिड स्थापित करने के लिए 60-90 मिनट के लिए 37 डिग्री सेल्सियस पर इनक्यूबेट किया जाता है। एक बार इन चरणों को सफलतापूर्वक पूरा कर लेने के बाद, रूपांतरित कोशिकाओं को कोशिकाओं के प्रसार के लिए उपयुक्त मीडिया पर रखा जा सकता है। चूंकि, परिवर्तन को एक अक्षम तकनीक के रूप में माना जाता है, इसलिए इसका उपयोग क्लोन बैंकों की तैयारी के लिए नहीं किया जा सकता है।
सेल ट्रांसफेक्शन क्या है?
ट्रांसफेक्शन आमतौर पर स्तनधारी कोशिकाओं में एक विदेशी जीन की शुरूआत की एक विधि है। अभिकर्मक के दो तरीके हैं; अर्थात्, क्षणिक अभिकर्मक और स्थिर अभिकर्मक। क्षणिक अभिकर्मक में, जीन अभिव्यक्ति सीमित समय के लिए उपलब्ध होती है; इस प्रकार, जीन का परिवर्तन अस्थायी अभिव्यक्ति का कारण बनता है।यह अभिकर्मक विधि सरल और तेज है; इसलिए इसे नियमित रूप से इस्तेमाल किया जा सकता है। क्षणिक अभिकर्मक का एक दोष बड़े पैमाने पर प्रोटीन संश्लेषण प्रणालियों के लिए आवेदन करने की कठिनाई है।
स्थिर अभिकर्मक के दौरान, एक लक्ष्य जीन को मेजबान कोशिका के जीनोम में एकीकृत किया जाता है, और इस प्रकार क्षणिक अभिकर्मक के विपरीत, जीन की अभिव्यक्ति स्थायी होती है।
ट्रांसफेक्शन और ट्रांसफेक्शन में क्या अंतर है?
• परिवर्तन एक प्रोकैरियोटिक कोशिका (जीवाणु और खमीर) में एक जीन की शुरूआत है, जबकि अभिकर्मक को आमतौर पर एक स्तनधारी कोशिका में एक जीन की शुरूआत कहा जाता है।
• परिवर्तन के परिणामस्वरूप जीन में आनुवंशिक परिवर्तन होता है, जबकि अभिकर्मक के परिणामस्वरूप जीन में अस्थायी अभिव्यक्ति या स्थायी परिवर्तन हो सकता है।
