डीएनए और आरएनए आइसोलेशन के बीच मुख्य अंतर यह है कि डीएनए आइसोलेशन एक ऐसी प्रक्रिया है जिसमें डीएनए नामक एक प्रकार का न्यूक्लिक एसिड एक जैविक कोशिका से निकाला जाता है, जबकि आरएनए आइसोलेशन एक ऐसी प्रक्रिया है जिसमें आरएनए नामक एक प्रकार का न्यूक्लिक एसिड होता है। एक जैविक कोशिका से निकाला गया।
न्यूक्लिक एसिड अलगाव डाउनस्ट्रीम अनुप्रयोगों की एक विशाल सरणी में प्रारंभिक बिंदु है। शुरुआती नमूनों में न्यूक्लिक एसिड की उच्च गुणवत्ता बाद के डाउनस्ट्रीम अनुप्रयोगों की सफलता के लिए एक महत्वपूर्ण कारक है। न्यूक्लिक एसिड अलगाव को एक शुद्धता नमूने में न्यूक्लिक एसिड प्राप्त करने के लिए चरणों की एक श्रृंखला के रूप में परिभाषित किया जा सकता है जिसका उपयोग विभिन्न डाउनस्ट्रीम एप्लिकेशन चरणों के लिए किया जा सकता है।न्यूक्लिक एसिड निष्कर्षण का उद्देश्य कोशिका झिल्ली को विघटित करना और डीएनए या आरएनए जैसे शुद्ध न्यूक्लिक एसिड प्राप्त करने के लिए लिपिड और प्रोटीन के अधिकतम उन्मूलन को प्राप्त करना है।
डीएनए आइसोलेशन क्या है?
डीएनए आइसोलेशन एक नियमित प्रक्रिया है जिसमें एक प्रकार का न्यूक्लिक एसिड जिसे डीएनए कहा जाता है, एक जैविक कोशिका से निकाला जाता है। डीएनए अलगाव रक्त, जमे हुए ऊतक के नमूनों और पैराफिन ऊतक ब्लॉक से डीएनए निकालने के द्वारा किया जाता है। डीएनए अलगाव में तीन मुख्य चरण हैं, जिसमें सेल लसीस, डीएनए निकालने और वर्षा शामिल हैं। सेल लिसिस में, एक नमूने में कोशिकाओं को एक दूसरे से अक्सर भौतिक माध्यमों जैसे पीसने या भंवर से अलग किया जाता है और नमक युक्त समाधान में डाल दिया जाता है। आमतौर पर, नमक में धनात्मक रूप से आवेशित सोडियम आयन नकारात्मक रूप से आवेशित फॉस्फेट समूहों की रक्षा करने में मदद करते हैं जो डीएनए की रीढ़ के साथ चलते हैं। बाद में, कोशिका झिल्ली और नाभिक में लिपिड को तोड़ने के लिए एक डिटर्जेंट जोड़ा जाता है, जो डीएनए को छोड़ देता है क्योंकि ये झिल्ली बाधित हो जाते हैं।
चित्र 01: डीएनए अलगाव
डीएनए का साफ नमूना प्राप्त करने के लिए डीएनए निष्कर्षण किया जाता है। अक्सर, डीएनए से जुड़े प्रोटीन और अन्य सेलुलर प्रोटीन को नीचा दिखाने के लिए एक प्रोटीज एंजाइम जोड़ा जाता है। इसके अलावा, नमूने को छानकर कुछ सेलुलर मलबे को हटाया जा सकता है। अंत में, अल्कोहल का उपयोग करके डीएनए अवक्षेपित किया जाता है। इसके अलावा, यदि बहुत अधिक डीएनए है, तो प्रक्रिया के अंत में एक कंजूस सफेद अवक्षेप देखा जा सकता है।
आरएनए आइसोलेशन क्या है?
आरएनए आइसोलेशन एक ऐसी प्रक्रिया है जिसमें एक प्रकार के न्यूक्लिक एसिड को आरएनए कहा जाता है जिसे जैविक कोशिका से निकाला जाता है। यह प्रक्रिया अक्सर कोशिकाओं और ऊतकों में राइबोन्यूक्लिअस एंजाइम की उपस्थिति से जटिल होती है जो आरएनए को नीचा दिखाते हैं। आणविक जीव विज्ञान में आरएनए को नमूनों से अलग करने के लिए कई तरीकों का उपयोग किया जाता है, जैसे कि गनीडिनियम-थियोसाइनेट-फिनोल-क्लोरोफॉर्म निष्कर्षण।
चित्र 02: आरएनए अलगाव
आरएनए अलगाव में आमतौर पर कई चरण होते हैं, जिसमें सेल लिसिस और होमोजेनाइजेशन, जैव रासायनिक प्रक्रियाओं का शमन, न्यूक्लिक एसिड विभाजन, आरएनए पुनर्प्राप्ति, कच्चे शुद्धिकरण और आरएनए की गुणवत्ता का आकलन करना शामिल है। फिल्टर पेपर-आधारित लसीका और रेफरेंस विधि में आरएनए निष्कर्षण में उच्च थ्रूपुट क्षमता होती है। इसके अलावा, मोर्टार और मूसल का उपयोग करके तरल नाइट्रोजन में आरएनए निष्कर्षण भी एक बहुत ही उपयोगी तरीका है क्योंकि यह राइबोन्यूक्लिअस गतिविधि को रोकता है।
डीएनए और आरएनए अलगाव के बीच समानताएं क्या हैं?
- डीएनए और आरएनए अलगाव दो प्रकार की न्यूक्लिक एसिड अलगाव प्रक्रियाएं हैं।
- दोनों प्रक्रियाओं में समान बुनियादी चरण होते हैं, जैसे सेल विश्लेषण, निष्कर्षण और शुद्धिकरण।
- ये प्रक्रियाएं महत्वपूर्ण न्यूक्लिक एसिड प्रकारों को अलग करती हैं जिनमें कई डाउनस्ट्रीम अनुप्रयोग होते हैं।
- उन्हें प्रयोगशाला में स्थापित किया जाता है।
- उन्हें निर्मित किट का उपयोग करके किया जा सकता है।
डीएनए और आरएनए आइसोलेशन में क्या अंतर है?
डीएनए अलगाव में, डीएनए नामक एक प्रकार का न्यूक्लिक एसिड जैविक कोशिका से निकाला जाता है, जबकि आरएनए अलगाव में, आरएनए नामक एक प्रकार का न्यूक्लिक एसिड जैविक कोशिका से निकाला जाता है। इस प्रकार, यह डीएनए और आरएनए अलगाव के बीच महत्वपूर्ण अंतर है। इसके अलावा, डीएनए अलगाव सामान्य रूप से पीएच 7 से 8 के आसपास किया जाता है जबकि आरएनए अलगाव सामान्य रूप से पीएच 4.5 के आसपास किया जाता है।
नीचे दिया गया इन्फोग्राफिक डीएनए और आरएनए आइसोलेशन के बीच अंतर को सारणीबद्ध रूप में प्रस्तुत करता है ताकि साथ-साथ तुलना की जा सके।
सारांश – डीएनए बनाम आरएनए अलगाव
डीएनए और आरएनए अलगाव दो प्रकार की न्यूक्लिक एसिड अलगाव प्रक्रियाएं हैं।डीएनए आइसोलेशन एक ऐसी प्रक्रिया है जिसके दौरान एक जैविक कोशिका से डीएनए निकाला जाता है। आरएनए अलगाव एक ऐसी प्रक्रिया है जिसके दौरान आरएनए को एक जैविक कोशिका से निकाला जाता है। तो, यह डीएनए और आरएनए अलगाव के बीच महत्वपूर्ण अंतर है।
