इलेक्ट्रोपोरेशन और माइक्रोइंजेक्शन के बीच महत्वपूर्ण अंतर यह है कि इलेक्ट्रोपोरेशन एक ऐसी तकनीक है जो डीएनए को मेजबान कोशिकाओं में पहुंचाने के लिए एक उच्च वोल्टेज इलेक्ट्रिक पल्स का उपयोग करती है जबकि माइक्रोइंजेक्शन एक ऐसी तकनीक है जो डीएनए को पहुंचाने के लिए एक ठीक-इत्तला दे दी गई ग्लास सुई या माइक्रोपिपेट का उपयोग करती है। होस्ट सेल.
रूपांतरण वह प्रक्रिया है जिसके द्वारा विदेशी डीएनए को मेजबान कोशिकाओं में स्थानांतरित किया जाता है। परिवर्तन के द्वारा जीव की आनुवंशिक संरचना को बदला जा सकता है। विभिन्न रासायनिक, जैविक और भौतिक परिवर्तन विधियां हैं। कुछ प्रत्यक्ष विधियाँ हैं, जबकि कुछ अप्रत्यक्ष विधियाँ हैं। इलेक्ट्रोपोरेशन और माइक्रोइंजेक्शन दो भौतिक विधियाँ हैं जो प्रत्यक्ष परिवर्तन विधियाँ हैं।मेजबान कोशिकाओं में डीएनए को शामिल करने के लिए इलेक्ट्रोपोरेशन जैविक कोशिका झिल्ली में सूक्ष्म छिद्रों को प्रेरित करने के लिए एक विद्युत क्षेत्र का उपयोग करता है। दूसरी ओर, माइक्रोइंजेक्शन, माइक्रोपिपेट या फाइन-टिप्ड ग्लास सुई का उपयोग करके सीधे डीएनए वितरित करता है।
इलेक्ट्रोपोरेशन क्या है?
विद्युतीकरण एक परिवर्तन तकनीक है जो डीएनए को पौधों की कोशिकाओं और प्रोटोप्लास्ट में पहुंचाती है। यह तकनीक एक उच्च वोल्टेज विद्युत पल्स का उपयोग करती है। पादप सामग्री को डीएनए वाले बफर विलयन में इनक्यूबेट किया जाता है। फिर समाधान को एक उच्च वोल्टेज विद्युत पल्स के अधीन किया जाता है। उच्च वोल्टेज प्रेरित पोर्स प्लांट सेल मेम्ब्रेन में बनाए जाते हैं, और इन पोर्स के माध्यम से, डीएनए कोशिकाओं के अंदर माइग्रेट होता है और प्लांट जीनोमिक डीएनए के साथ एकीकृत होता है। इस विधि की दक्षता पौधों की सामग्री और उपचार की स्थिति पर निर्भर करती है।
चित्र 01: विद्युतीकरण
जब इलेक्ट्रोपोरेशन का उपयोग करके परिवर्तन किया जाता है, तो केवल 40 से 50% कोशिकाओं को डीएनए प्राप्त होता है। इसके अलावा, इस पद्धति के तहत केवल 50% रूपांतरित कोशिकाएं ही जीवित रह सकती हैं। हालांकि, यह विधि निष्पादित करना आसान है और कोशिकाओं की जैविक संरचना या कार्य को परिवर्तित नहीं करती है। इसके अलावा, इसका उपयोग कोशिकाओं की एक विस्तृत श्रृंखला के लिए किया जा सकता है।
माइक्रोइंजेक्शन क्या है?
माइक्रोइंजेक्शन एक परिवर्तन तकनीक है जो डीएनए को बड़ी कोशिकाओं में पेश करते समय विशेष रूप से उपयोगी होती है। यह विधि पौधे के प्रोटोप्लास्ट या पशु कोशिकाओं (ओसाइट्स, अंडे और भ्रूण) में डीएनए पहुंचाने के लिए एक महीन-इत्तला दे दी गई कांच की सुई या एक माइक्रोपिपेट का उपयोग करती है। वास्तव में, यह विधि चूहों जैसे ट्रांसजेनिक जानवरों को बनाने के लिए अधिक उपयुक्त है। इस विधि में डीएनए सीधे केन्द्रक या कोशिका द्रव्य में समाहित हो जाता है।
इलेक्ट्रोपोरेशन के समान, माइक्रोइंजेक्शन एक प्रत्यक्ष परिवर्तन तकनीक है। माइक्रोइंजेक्शन एक विशेष माइक्रोस्कोप सेटअप के तहत किया जाता है।पिपेट, सुई, माइक्रोस्कोप स्टेज और वीडियो तकनीक को रखने के कम्प्यूटरीकृत नियंत्रण ने इस तकनीक की प्रभावकारिता में वृद्धि की है। डीएनए को इंजेक्ट करते समय, एक डाई का उपयोग आसानी से रूपांतरित कोशिकाओं की पहचान करने के लिए किया जा सकता है। इसलिए, रूपांतरित कोशिकाओं की पहचान करने के लिए एक अलग विधि का उपयोग करने की आवश्यकता नहीं है। सबसे महत्वपूर्ण बात यह है कि माइक्रोइंजेक्शन प्रक्रिया के लिए मार्कर जीन की आवश्यकता नहीं होती है।
चित्र 02: सूक्ष्म इंजेक्शन
इसके अलावा, यह विधि बहुत प्रभावी और प्रतिलिपि प्रस्तुत करने योग्य है। हालांकि, यह विधि महंगी, समय लेने वाली और आवश्यक कुशल व्यक्तिगत है। साथ ही, इस विधि से केवल कुछ ही कोशिकाओं का उपचार किया जा सकता है।
इलेक्ट्रोपोरेशन और माइक्रोइंजेक्शन के बीच समानताएं क्या हैं?
- इलेक्ट्रोपोरेशन और माइक्रोइंजेक्शन दोनों दो तरह की ट्रांसफॉर्मेशन तकनीक हैं।
- ये विधियां डीएनए को पादप कोशिकाओं और प्रोटोप्लास्ट में पहुंचाती हैं।
- वे सीधे तरीके हैं।
- इसके अलावा, वे भौतिक या यांत्रिक तरीके हैं।
- ट्रांसजेनिक पौधों और जानवरों का उत्पादन करते समय दोनों विधियां सहायक होती हैं।
इलेक्ट्रोपोरेशन और माइक्रोइंजेक्शन में क्या अंतर है?
इलेक्ट्रोपोरेशन तकनीक डीएनए को पेश करने के लिए एक विद्युत क्षेत्र का उपयोग करती है जबकि माइक्रोइंजेक्शन तकनीक डीएनए को पेश करने के लिए एक माइक्रोपिपेट या एक महीन-टिप वाली कांच की सुई है। इस प्रकार, यह इलेक्ट्रोपोरेशन और माइक्रोइंजेक्शन के बीच महत्वपूर्ण अंतर है। इसके अलावा, इलेक्ट्रोपोरेशन का उपयोग ज्यादातर पादप कोशिकाओं और प्रोटोप्लास्ट के लिए किया जाता है जबकि माइक्रोइंजेक्शन का उपयोग ज्यादातर पशु कोशिकाओं के लिए किया जाता है। इसके अलावा, विद्युतीकरण माइक्रोइंजेक्शन जितना समय लेने वाला नहीं है।
नीचे दिया गया इन्फोग्राफिक इलेक्ट्रोपोरेशन और माइक्रोइंजेक्शन के बीच अंतर को सारणीबद्ध रूप में सारांशित करता है।
सारांश - इलेक्ट्रोपोरेशन बनाम माइक्रोइंजेक्शन
इलेक्ट्रोपोरेशन और माइक्रोइंजेक्शन जीन ट्रांसफर के दो भौतिक तरीके हैं। इलेक्ट्रोपोरेशन एक उच्च वोल्टेज विद्युत क्षेत्र का उपयोग करता है जबकि माइक्रोइंजेक्शन एक ग्लास सुई या माइक्रोपिपेट का उपयोग करता है। इस प्रकार, यह इलेक्ट्रोपोरेशन और माइक्रोइंजेक्शन के बीच महत्वपूर्ण अंतर है। हालाँकि, दोनों विधियाँ सीधे बहिर्जात डीएनए को मेजबान कोशिकाओं में पेश करती हैं।
