रिवर्स चरण और सामान्य चरण एचपीएलसी के बीच महत्वपूर्ण अंतर यह है कि रिवर्स चरण एचपीएलसी एक गैर-ध्रुवीय स्थिर चरण और एक ध्रुवीय मोबाइल चरण का उपयोग करता है जबकि सामान्य चरण एचपीएलसी एक ध्रुवीय स्थिर चरण और एक कम ध्रुवीय मोबाइल चरण का उपयोग करता है।
सामान्य चरण एचपीएलसी एचपीएलसी की सबसे पुरानी तकनीक है जिसे स्वेट ने पौधों के अर्क के अपने पृथक्करण में इस्तेमाल किया; उन्होंने कांच के स्तंभ में चाक का इस्तेमाल किया। यह क्रोमैटोग्राफी की शास्त्रीय विधा थी जिसके कारण इसे "सामान्य" तकनीक का नाम दिया गया। दूसरी ओर, रिवर्स-फेज एचपीएलसी, सामान्य तकनीक के विपरीत है, जिसे वैज्ञानिकों ने हाल ही में विकसित किया है।
रिवर्स फेज HPLC क्या है?
रिवर्स फेज एचपीएलसी एक क्रोमैटोग्राफिक तकनीक है जिसमें हम हाइड्रोफोबिक स्थिर फेज का उपयोग करते हैं। सभी एचपीएलसी विधियों में, हम इसकी व्यापक प्रयोज्यता और पुनरुत्पादकता के कारण लगभग 70% के लिए इस पद्धति का उपयोग करते हैं। स्थिर चरण गैर-ध्रुवीय है और मोबाइल चरण ध्रुवीय है।
ज्यादातर, वैज्ञानिक मोबाइल चरण के रूप में एसीटोनिट्राइल या मेथनॉल जैसे गलत, ध्रुवीय कार्बनिक विलायक के साथ पानी के जलीय मिश्रण का उपयोग करते हैं। इसलिए, विश्लेषक गैर-ध्रुवीय स्थिर चरण के साथ बातचीत करते हैं।
सामान्य चरण एचपीएलसी क्या है?
सामान्य चरण एचपीएलसी एक क्रोमैटोग्राफिक तकनीक है जिसमें हम हाइड्रोफिलिक स्थिर चरण का उपयोग करते हैं। यह एचपीएलसी का पारंपरिक तरीका है, हालांकि हम इसका उतना उपयोग नहीं करते हैं। स्थिर चरण ध्रुवीय है, और मोबाइल चरण गैर-ध्रुवीय है। इससे भी महत्वपूर्ण बात यह है कि इस तकनीक का मोबाइल चरण 100% जैविक है। यानी इसमें पानी का इस्तेमाल नहीं होता।
चित्र 01: विश्लेषण में घटकों की ध्रुवता के अनुसार सामान्य चरण और रिवर्स चरण एचपीएलसी क्रोमैटोग्राम के लिए एक नमूना प्रोफ़ाइल।
आमतौर पर, स्थिर चरण में सिलिका, सायनो, डायोल, अमीनो बंधुआ चरण आदि होते हैं। मोबाइल चरणों में कार्बनिक सॉल्वैंट्स जैसे हेक्सेन, एथिल एसीटेट, आदि शामिल हैं। यह तकनीक विलायक या विश्लेषण अणुओं के प्रतिधारण पर आधारित है। ध्रुवीय स्थिर चरण।
रिवर्स फेज और नॉर्मल फेज HPLC में क्या अंतर है?
रिवर्स फेज एचपीएलसी एक क्रोमैटोग्राफिक तकनीक है जिसमें हम हाइड्रोफोबिक स्थिर फेज का उपयोग करते हैं। इस तकनीक का स्थिर चरण गैर-ध्रुवीय है जबकि मोबाइल चरण ध्रुवीय है। इसके अलावा, वैज्ञानिक विपरीत चरण एचपीएलसी में मोबाइल चरण के रूप में एसीटोनिट्राइल या मेथनॉल जैसे गलत, ध्रुवीय कार्बनिक विलायक के साथ पानी के जलीय मिश्रण का उपयोग करते हैं।इसके विपरीत, सामान्य चरण एचपीएलसी एक क्रोमैटोग्राफिक तकनीक है जिसमें हम हाइड्रोफिलिक स्थिर चरण का उपयोग करते हैं। इस तकनीक का स्थिर चरण ध्रुवीय है जबकि मोबाइल चरण गैर-ध्रुवीय है। इसके अलावा, वैज्ञानिक सामान्य चरण एचपीएलसी के मोबाइल चरण के रूप में हेक्सेन, एथिल एसीटेट इत्यादि जैसे कार्बनिक सॉल्वैंट्स का उपयोग करते हैं। नीचे दिया गया इन्फोग्राफिक रिवर्स फेज और नॉर्मल फेज एचपीएलसी के बीच अंतर को सारणीबद्ध रूप में प्रस्तुत करता है।
सारांश - रिवर्स फेज बनाम नॉर्मल फेज एचपीएलसी
रिवर्स फेज और नॉर्मल फेज एचपीएलसी तकनीक दो लिक्विड क्रोमैटोग्राफिक तकनीक हैं। रिवर्स चरण और सामान्य चरण एचपीएलसी के बीच महत्वपूर्ण अंतर यह है कि रिवर्स चरण एचपीएलसी एक गैर-ध्रुवीय स्थिर चरण और एक ध्रुवीय मोबाइल चरण का उपयोग करता है जबकि सामान्य चरण एचपीएलसी एक ध्रुवीय स्थिर चरण और एक कम ध्रुवीय मोबाइल चरण का उपयोग करता है।
