एचपीएलसी और फास्ट एचपीएलसी के बीच मुख्य अंतर यह है कि एचपीएलसी के लिए हम जिस पंप प्रेशर का उपयोग करते हैं वह लगभग 40 एमपीए है जबकि फास्ट एचपीएलसी के लिए पंप प्रेशर लगभग 3-5 एमपीए है।
मिश्रण के घटकों को अलग करने के लिए हम जिस सबसे सामान्य तकनीक का उपयोग करते हैं, वह है "तरल क्रोमैटोग्राफी"। इस उद्देश्य को प्राप्त करने के लिए कई तकनीकें हैं जिनमें से एचपीएलसी बहुत लोकप्रिय है। एचपीएलसी उच्च प्रदर्शन तरल क्रोमैटोग्राफी के लिए खड़ा है जो एक तरल मिश्रण के घटकों को तेज और कुशल तरीके से पहचान, मात्रा और अलग करता है। फास्ट एचपीएलसी एचपीएलसी का एक विशेष अनुप्रयोग है जिसने हाल ही में समाधानों के अध्ययन में शामिल लोगों का ध्यान आकर्षित किया है।
एचपीएलसी क्या है?
एचपीएलसी उच्च प्रदर्शन तरल क्रोमैटोग्राफी है। यह सॉल्वैंट्स को धक्का देने के लिए एक उच्च दबाव का उपयोग करता है ताकि वे एक कॉलम से गुजरें। इसके अलावा, यह अमीनो एसिड, न्यूक्लिक एसिड, कार्बोहाइड्रेट, स्टेरॉयड, एंटीबायोटिक्स और हाइड्रोकार्बन जैसे विभिन्न यौगिकों को अलग करने और उनका अध्ययन करने का एक आदर्श तरीका है। मिश्रण को अलग करने के अन्य तरीकों जैसे उच्च रिज़ॉल्यूशन और तेज़ विश्लेषण पर एचपीएलसी के कई फायदे हैं। यह रीपैकिंग और पुनर्जनन की आवश्यकता को समाप्त करता है और मापदंडों पर बेहतर नियंत्रण प्रदान करता है और इस प्रकार, पृथक्करण की दक्षता में वृद्धि करता है। आदर्श रूप से, एचपीएलसी बड़े पैमाने पर अनुप्रयोगों के लिए उपयुक्त है क्योंकि यह बहुत छोटे कणों को अलग कर सकता है और उच्च दबाव के उपयोग की अनुमति देता है जिससे सॉल्वैंट्स को आसानी से प्रवाहित करना आसान हो जाता है।
चित्र 01: एचपीएलसी कॉलम
संक्षेप में एचपीएलसी तकनीक के संचालन की विधि इस प्रकार है। सबसे पहले, हमें एक पंप का उपयोग करके असतत छोटी मात्रा में नमूना को मोबाइल चरण की धारा में पेश करना चाहिए। पंप का दबाव 40 एमपीए पर बनाए रखा जाना चाहिए। मोबाइल चरण की यह धारा एचपीएलसी के कॉलम के माध्यम से फैलती है। फिर, नमूने के घटक भी कॉलम से गुजरते हैं। हालांकि, उनकी गति की गति एक दूसरे से भिन्न होती है क्योंकि नमूना घटकों और स्तंभ के अंदर सोखने वाले के बीच की बातचीत में अंतर होता है। हम इस अधिशोषक को स्थिर प्रावस्था कहते हैं क्योंकि यह स्तंभ के भीतर रहता है (गतिमान नहीं)। फिर, कॉलम के अंत में, हम उस सैंपल को इकट्ठा कर सकते हैं जो कॉलम से निकलता है, जिससे हम सैंपल में घटकों को अलग से इकट्ठा कर सकते हैं।
फास्ट एचपीएलसी क्या है?
हाल ही में, Schering Plow अनुसंधान संस्थान के अनुसंधान वैज्ञानिकों ने एक तीव्र HPLC तकनीक विकसित की है जो HPLC का एक उन्नत संस्करण है क्योंकि यह मिश्रण से यौगिकों को और भी तेज़ी से अलग करने की अनुमति देता है।इसके अलावा, तेजी से एचपीएलसी के रूप में जाना जाता है, यह तकनीक 2.7um फ्यूज्ड कोर सिलिका कणों का उपयोग करती है जो एक ठोस सिलिका कण पर 0.5um झरझरा सिलिका फ्यूज करके बनाई जाती हैं। ये विशिष्ट रूप से बनाए गए कण पृथक्करण की प्रक्रिया को बहुत तेज़ बनाते हैं और वह भी कम बैकप्रेशर पर जो हम एचपीएलसी में उपयोग करते हैं।
चित्र 02: एफपीएलसी उपकरण
फास्ट एचपीएलसी को यूपीएलसी की तुलना में परिणाम मिलते हैं, लेकिन वैज्ञानिकों का मानना है कि यह तकनीक बेहतर है क्योंकि इसमें बहुत महंगे अल्ट्राहाई प्रेशर उपकरण की आवश्यकता नहीं होती है। सबसे अच्छी बात यह है कि तेज एचपीएलसी को किसी नए प्रयोगशाला प्रोटोकॉल की आवश्यकता नहीं होती है।
एचपीएलसी और फास्ट एचपीएलसी में क्या अंतर है?
एचपीएलसी उच्च प्रदर्शन तरल क्रोमैटोग्राफी है और तेज एचपीएलसी उच्च प्रदर्शन तरल क्रोमैटोग्राफी का एक उन्नत रूप है।एचपीएलसी और तेज एचपीएलसी के बीच महत्वपूर्ण अंतर यह है कि हम एचपीएलसी के लिए जिस पंप दबाव का उपयोग करते हैं वह लगभग 40 एमपीए है। जबकि, तेज एचपीएलसी के लिए पंप का दबाव लगभग 3-5 एमपीए है। इसके अलावा, हम एचपीएलसी तकनीक का उपयोग करके अमीनो एसिड, न्यूक्लिक एसिड, कार्बोहाइड्रेट, स्टेरॉयड, एंटीबायोटिक्स और हाइड्रोकार्बन जैसे विभिन्न यौगिकों को अलग कर सकते हैं, जबकि फास्ट एचपीएलसी तकनीक मुख्य रूप से प्रोटीन को अलग करने के लिए उपयोग की जाती है।
नीचे दिया गया इन्फोग्राफिक एचपीएलसी और फास्ट एचपीएलसी के बीच अंतर के बारे में अधिक जानकारी प्रस्तुत करता है।
सारांश - एचपीएलसी बनाम फास्ट एचपीएलसी
एचपीएलसी तरल क्रोमैटोग्राफी की एक तकनीक है जो पूरी दुनिया में बहुत लोकप्रिय हो गई है। फास्ट एचपीएलसी एचपीएलसी का एक नया संस्करण है, शेरिंग प्लो इंस्टीट्यूट के शोध वैज्ञानिकों ने इस नई तकनीक को विकसित किया है।एचपीएलसी और तेज एचपीएलसी के बीच मुख्य अंतर पंप के दबाव पर है जो हम पृथक्करण के लिए उपयोग करते हैं। वह है; एचपीएलसी के लिए हम जिस पंप प्रेशर का उपयोग करते हैं वह लगभग 40 एमपीए है। लेकिन, तेज़ एचपीएलसी के लिए पंप का दबाव लगभग 3-5 एमपीए है।
