रैंडम प्राइमर और ओलिगो डीटी के बीच महत्वपूर्ण अंतर यह है कि रैंडम प्राइमर सभी संभावित हेक्सामर ऑलिगोन्यूक्लियोटाइड अनुक्रमों का मिश्रण होता है, जबकि ओलिगो डीटी प्राइमर में 12-18 डीऑक्सीथाइमिडीन का एकल-फंसे खिंचाव होता है।
रिवर्स ट्रांसक्रिप्शन एक ऐसा तंत्र है जिसमें एमआरएनए या आरएनए की किसी भी प्रजाति का उपयोग करके सीडीएनए को संश्लेषित किया जा सकता है। सीडीएनए का उत्पादन करने के लिए, रिवर्स ट्रांसक्रिपटेस एंजाइम और अन्य आवश्यक घटक प्रदान किए जाने चाहिए, विशेष रूप से टेम्पलेट और प्राइमर। प्राइमर लघु डीएनए अनुक्रम हैं जो विशेष रूप से लक्ष्य अनुक्रमों के प्रवर्धन के लिए डिज़ाइन किए गए हैं। रैंडम प्राइमर और ओलिगो डीटी प्राइमर दो सामान्य प्रकार के प्राइमर हैं जिनका उपयोग रिवर्स ट्रांसक्रिप्शन में किया जाता है।इसलिए, यादृच्छिक प्राइमर या ओलिगो डीटी प्राइमर छोटे डीएनए ऑलिगोन्यूक्लियोटाइड अनुक्रम हैं जो रिवर्स ट्रांसक्रिपटेस को रिवर्स ट्रांसक्रिप्शन शुरू करने के लिए आवश्यक हैं। आरएनए टेम्प्लेट के आधार पर, इन दो प्राइमर प्रकारों में से उपयुक्त प्राइमर का चयन किया जा सकता है।
रैंडम प्राइमर क्या होते हैं?
रैंडम प्राइमर ऑलिगोन्यूक्लियोटाइड्स का मिश्रण है जो सभी संभावित हेक्सामर अनुक्रमों का प्रतिनिधित्व करता है। यादृच्छिक प्राइमर का प्राइमर अनुक्रम 5´ - d (NNNNNN) -3´ N=G, A, T या C है। इसलिए, यादृच्छिक प्राइमरों का उपयोग डीएनए पोलीमरेज़ या रिवर्स ट्रांसक्रिपटेस द्वारा एकल-फंसे डीएनए या आरएनए के प्रवर्धन के लिए किया जा सकता है, क्रमश। इसके अलावा, यादृच्छिक प्राइमर मिश्रण सीडीएनए उत्पन्न करने के लिए आरएनए के सभी क्षेत्रों को बढ़ाने में सक्षम है। इस प्रकार, यह सीडीएनए की विभिन्न लंबाई पैदा करता है।
चित्र 01: रैंडम प्राइमर
सबसे महत्वपूर्ण बात यह है कि यादृच्छिक प्राइमर मिश्रण टेम्पलेट विशिष्टता नहीं दिखाता है। यह एमआरएनए और अन्य आरएनए प्रजातियों को भेद करने में असमर्थ है। और, यह नमूने में आरएनए की किसी भी प्रजाति के साथ घोषणा करता है। हालांकि, यादृच्छिक प्राइमर मिश्रण पॉली (ए) पूंछ के बिना आरएनए के रिवर्स ट्रांसक्रिप्शन के लिए उपयुक्त है, जैसे आरआरएनए, टीआरएनए, गैर-कोडिंग आरएनए, छोटे आरएनए, प्रोकैरियोटिक एमआरएनए इत्यादि, खराब आरएनए, और ज्ञात माध्यमिक संरचनाओं के साथ आरएनए।
ओलिगो डीटी क्या है?
ऑलिगो डीटी प्राइमर 12 - 18 डीऑक्सीथाइमाइन (डीटी) का खिंचाव है। प्राइमर अनुक्रम को 5´-d (TTT TTT TTT TTT TTT TTT)-3 के रूप में दर्शाया जा सकता है। इसका उपयोग पॉली (ए) टेल युक्त एमआरएनए से सीडीएनए के उत्पादन के लिए किया जाता है। मूल रूप से, यह रिवर्स ट्रांसक्रिपटेस द्वारा उत्प्रेरित प्रतिक्रिया के लिए एक प्राइमर के रूप में कार्य करता है। रिवर्स ट्रांसक्रिप्शन के दौरान, ओलिगो डीटी प्राइमर अधिकांश यूकेरियोटिक एमआरएनए के 3´ छोर पर पाए जाने वाले पॉली-एडेनिलेटेड पूंछ के साथ एनील करता है और प्रक्रिया शुरू करता है।
चित्र 02: ओलिगो डीटी प्राइमर का उपयोग करके रिवर्स ट्रांसक्रिप्शन
रैंडम प्राइमर के विपरीत, ओलिगो डीटी प्राइमर डिग्रेडेड आरएनए या आरएनए के लिए उपयुक्त नहीं है जिसमें प्रोकैरियोटिक आरएनए और माइक्रोआरएनए सहित पॉली (ए) टेल की कमी होती है।
रैंडम प्राइमर और ओलिगो डीटी के बीच समानताएं क्या हैं?
- रैंडम प्राइमर और ओलिगो डीटी प्राइमर दो प्रकार के प्राइमर हैं जिनका उपयोग रिवर्स ट्रांसक्रिप्शन और सीडीएनए बनाने में किया जाता है।
- रैंडम प्राइमर और ओलिगो डीटी प्राइमर का एक साथ उपयोग करने से सीडीएनए संश्लेषण की संवेदनशीलता बढ़ जाती है।
- वे एकल-फंसे लघु न्यूक्लियोटाइड अनुक्रम हैं।
रैंडम प्राइमर और ओलिगो डीटी में क्या अंतर है?
रैंडम प्राइमर एक छोटा ऑलिगोन्यूक्लियोटाइड अनुक्रम है जो एक यादृच्छिक अनुक्रम से बना होता है।इस बीच, ओलिगो डीटी प्राइमर 12 से 18 डीऑक्सीथाइमिडीन से बना एक छोटा किनारा है। तो, यह यादृच्छिक प्राइमर और ओलिगो डीटी के बीच महत्वपूर्ण अंतर है। यादृच्छिक प्राइमर का क्रम 5´ - d (NNNNNN) -3´ N=G, A, T या C है। जबकि, oligo dT प्राइमर का क्रम 5´-d (TTT TTT TTT TTT TTT TTT)-3´ है।. इसलिए, हम इसे यादृच्छिक प्राइमरों और ओलिगो डीटी के बीच एक और अंतर के रूप में मान सकते हैं।
इसके अलावा, यादृच्छिक प्राइमर टेम्पलेट विशिष्टता नहीं दिखाते हैं, और वे आरएनए की किसी भी प्रजाति के साथ एनील करते हैं, जबकि ओलिगो डीटी प्राइमर यूकेरियोटिक एमआरएनए की पॉली (ए) पूंछ के लिए विशिष्टता दिखाते हैं।
नीचे दिया गया इन्फोग्राफिक रैंडम प्राइमर और ओलिगो डीटी के बीच अंतर को सारांशित करता है।
सारांश - रैंडम प्राइमर बनाम ओलिगो डीटी
रैंडम प्राइमर और ओलिगो डीटी प्राइमर सीडीएनए संश्लेषण में उपयोग किए जाने वाले दो प्रकार के प्राइमर हैं।रैंडम प्राइमर में ऑलिगोन्यूक्लियोटाइड्स का मिश्रण होता है, जो सभी संभावित हेक्सामर अनुक्रमों का प्रतिनिधित्व करता है, जबकि ओलिगो डीटी प्राइमर 12 से 18 डीऑक्सीथाइमिडीन का एकल-फंसे अनुक्रम है। तो, यह यादृच्छिक प्राइमर और ओलिगो डीटी के बीच महत्वपूर्ण अंतर है। इसके अलावा, ओलिगो डीटी प्राइमर पॉली (ए) टेल के साथ आरएनए के पूर्ण-लंबाई रिवर्स ट्रांसक्रिप्शन के लिए उपयोगी होते हैं, जबकि रैंडम प्राइमर अधिकांश आरएनए प्रजातियों के रिवर्स ट्रांसक्रिप्शन के लिए उपयोगी होते हैं, जिसमें डिग्रेडेड आरएनए, आरएनए जिसमें पॉली (ए) टेल और आरएनए युक्त नहीं होता है। माध्यमिक संरचनाएं। इसलिए, यादृच्छिक प्राइमर टेम्पलेट विशिष्टता नहीं दिखाता है जबकि ओलिगो डीटी प्राइमर पॉली (ए) पूंछ युक्त यूकेरियोटिक एमआरएनए के प्रति विशिष्टता दिखाता है।
