मुख्य अंतर - ग्राम दाग बनाम संस्कृति
चने का दाग एक धुंधला तकनीक है जो बैक्टीरिया को उनकी कोशिका की दीवार में पेप्टिडोग्लाइकन परत की मोटाई के अनुसार दो समूहों में अलग करने के लिए किया जाता है। संस्कृति विभिन्न विश्लेषणों के लिए प्रयोगशाला परिस्थितियों में सूक्ष्मजीवों को विकसित करने और बनाए रखने की एक विधि है। ग्राम दाग और संस्कृति के बीच महत्वपूर्ण अंतर उनका कार्य है; चने बैक्टीरिया की एक धुंधला तकनीक है जहां संस्कृति सूक्ष्मजीवों को विकसित करने और बनाए रखने की एक विधि है।
ग्राम दाग क्या है?
चने का दाग माइक्रोबायोलॉजी में बैक्टीरिया की पहचान के लिए इस्तेमाल की जाने वाली एक महत्वपूर्ण डिफरेंशियल स्टेनिंग तकनीक है।इस तकनीक को 1884 में डेनिश बैक्टीरियोलॉजिस्ट हंस क्रिश्चियन ग्राम द्वारा पेश किया गया था। ग्राम धुंधला बैक्टीरिया को दो प्रमुख समूहों में वर्गीकृत करता है: ग्राम सकारात्मक और ग्राम नकारात्मक; ये जीवाणु वर्गीकरण और पहचान में बहुत महत्वपूर्ण हैं। ग्राम धुंधलापन जीवाणु लक्षण वर्णन के लिए एक प्रारंभिक चरण के रूप में किया जाता है।
जीवाणुओं को उनकी कोशिका भित्ति में अंतर के आधार पर वर्गीकृत किया जाता है। ग्राम धनात्मक जीवाणुओं की कोशिका भित्ति में एक मोटी पेप्टिडोग्लाइकन परत होती है जबकि ग्राम ऋणात्मक जीवाणुओं की कोशिका भित्ति में एक पतली पेप्टिडोग्लाइकन परत होती है, जैसा कि चित्र 01 में दिखाया गया है। सेल की दीवार।
चित्र 1: ग्राम पॉजिटिव बैक्टीरिया और ग्राम नेगेटिव बैक्टीरिया
चार अलग-अलग अभिकर्मकों का उपयोग करके ग्राम धुंधलापन किया जाता है; प्राथमिक दाग, चुभने वाला, रंग बदलने वाला एजेंट और काउंटर दाग। क्रिस्टल वायलेट और सेफ्रेनिन क्रमशः प्राथमिक और काउंटर दाग के रूप में काम करते हैं, जबकि ग्राम आयोडीन और 95% अल्कोहल क्रमशः मॉर्डेंट और डीकोलाइज़र के रूप में काम करते हैं।
ग्राम दाग के मूल चरण
- एक साफ कांच की स्लाइड पर बैक्टीरियल स्मीयर तैयार किया जाता है, गर्मी को स्थिर और ठंडा किया जाता है।
- स्मीयर 1 - 2 मिनट के लिए क्रिस्टल वायलेट से भर जाता है।
- अतिरिक्त दाग हटाने के लिए स्मियर को धीमी गति से चलने वाले नल के पानी से धोया जाता है।
- 1 मिनट के लिए स्मियर पर ग्राम आयोडीन लगाया जाता है।
- स्मीयर को धीमी गति से चलने वाले नल के पानी से धोया जाता है
- स्मीयर को 95% अल्कोहल से 2-5 सेकंड के लिए धोया जाता है और धीमी गति से चलने वाले नल के पानी से धोया जाता है।
- स्मीयर को 1 मिनट के लिए सफ़्रानिन के साथ काउंटर दाग दिया जाता है
- स्मीयर को धीमी गति से चलने वाले नल के पानी से धोया जाता है, सुखाया जाता है और माइक्रोस्कोप के नीचे देखा जाता है।
चने के दाग के अंत में, ग्राम नकारात्मक बैक्टीरिया गुलाबी रंग में देखा जाएगा, जबकि ग्राम सकारात्मक बैक्टीरिया बैंगनी रंग में देखा जाएगा जैसा कि चित्र 02 में दिखाया गया है। ग्राम दाग का परिणाम मोटाई से तय होता है। उनकी कोशिका भित्ति में पेप्टिडोग्लाइकन परत की। विरंजन चरण के दौरान, प्राथमिक दाग और मोर्डेंट आसानी से ग्राम नकारात्मक बैक्टीरिया से हटा दिए जाते हैं और रंगहीन हो जाते हैं क्योंकि उनके पास एक पतली पेप्टिडोग्लाइकन परत होती है। ग्राम पॉजिटिव बैक्टीरिया में प्राथमिक दाग बरकरार रहता है क्योंकि उनके पास एक मोटी पेप्टिडोग्लाइकन परत होती है। प्राथमिक दाग के प्रतिधारण के कारण ग्राम पॉजिटिव बैक्टीरिया के लिए काउंटर दाग प्रभावी नहीं होगा। तो ग्राम पॉजिटिव बैक्टीरिया प्राइमरी स्टेन कलर यानी बैंगनी रंग में दिखाई देंगे। काउंटर स्टेन ग्राम नेगेटिव बैक्टीरिया को दाग देगा और पिक कलर में दिखाई देगा जो कि सेफ्रेनिन कलर है। इसलिए, चने के दाग से बैक्टीरिया को दो समूहों में वर्गीकृत करना आसान है और यह बैक्टीरिया के भेदभाव और पहचान में मूल्यवान है।
चित्र 2: ग्राम स्ट्रेन
संस्कृति क्या है?
माइक्रोबियल कल्चर विभिन्न प्रयोजनों के लिए प्रयोगशाला परिस्थितियों में सूक्ष्मजीवों के संवर्धन और रखरखाव की एक विधि है। सूक्ष्मजीव संवर्धन के प्रकार और उद्देश्य के आधार पर ठोस, अर्ध-ठोस और तरल मीडिया में संस्कृतियों को उगाया जाता है। संस्कृतियों को आवश्यक पोषक तत्व और सूक्ष्मजीवों के लिए आवश्यक वृद्धि की स्थिति प्रदान की जाती है। एक संस्कृति माध्यम के विभिन्न घटक होते हैं जैसे कि ऊर्जा स्रोत, कार्बन स्रोत, नाइट्रोजन स्रोत, खनिज, सूक्ष्म पोषक तत्व, पानी, ठोस एजेंट, आदि। इष्टतम तापमान, ऑक्सीजन और पीएच को उगाए गए सूक्ष्मजीव के प्रकार के अनुसार समायोजित किया जाना चाहिए।
विभिन्न प्रकार की माइक्रोबियल संस्कृतियां हैं; उदाहरण के लिए, बैच कल्चर, कंटीन्यूअस कल्चर, स्टैब कल्चर, अगर प्लेट कल्चर, ब्रोथ कल्चर आदि।बढ़ते माध्यम की संरचना के अनुसार, विभिन्न प्रकार के संस्कृति मीडिया हैं जिन्हें सिंथेटिक मीडिया, अर्ध-सिंथेटिक मीडिया और प्राकृतिक मीडिया के रूप में जाना जाता है। लैमिनार वायु प्रवाह नामक एक विशेष कक्ष के अंदर माइक्रोबियल संस्कृतियों को बाँझ परिस्थितियों में तैयार किया जाता है। वांछित सूक्ष्मजीव के टीकाकरण से पहले बढ़ते माध्यम और कांच के बने पदार्थ को निष्फल कर दिया जाता है। उचित बाँझ परिस्थितियों में, लक्ष्य सूक्ष्मजीव को निष्फल पोषक माध्यम में स्थानांतरित किया जाता है और इष्टतम तापमान पर ऊष्मायन किया जाता है। माध्यम के अंदर, सूक्ष्मजीव बढ़ेगा और प्रदान किए गए पोषक तत्वों का उपयोग करके गुणा करेगा।
चित्र 3: प्लेट पर जीवाणु संवर्धन
ग्राम दाग और संस्कृति में क्या अंतर है?
ग्राम दाग बनाम संस्कृति |
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| ग्राम स्ट्रेन एक डिफरेंशियल स्टेनिंग तकनीक है जिसका उपयोग बैक्टीरिया के विभेदन और पहचान के लिए किया जाता है। | माइक्रोबियल कल्चर प्रयोगशाला में सूक्ष्मजीवों को उगाने की एक विधि है। |
| घटक | |
| यह दो दागों सहित विभिन्न अभिकर्मकों का उपयोग करता है। | यह पोषक तत्वों और अन्य आवश्यक शर्तों से बना ठोस, अर्ध-ठोस और तरल मीडिया जैसे विभिन्न संस्कृति मीडिया का उपयोग करता है। |
| मूल कार्य | |
| यह बैक्टीरिया को दो समूहों में समूहित करने की अनुमति देता है: ग्राम नकारात्मक और ग्राम सकारात्मक। | यह विभिन्न प्रयोजनों के लिए सूक्ष्मजीवों के गुणन की अनुमति देता है। |
| आधार | |
| चने के दाग का परिणाम कोशिका भित्ति की पेप्टिडोग्लाइकन परत में अंतर पर आधारित होता है। | संस्कृति मीडिया के अंदर सूक्ष्मजीव बढ़ेंगे और गुणा करेंगे। |
| परिणाम | |
| ग्राम नेगेटिव बैक्टीरिया गुलाबी रंग में और ग्राम पॉजिटिव बैक्टीरिया बैंगनी रंग में दिखाई देते हैं। | प्लेटों पर सूक्ष्मजीवों की कॉलोनियां देखी जा सकती हैं। तरल मीडिया पर, सूक्ष्मजीव निलंबित रूप में होते हैं। |
सारांश – ग्राम दाग बनाम संस्कृति
माइक्रोबियल कल्चर विभिन्न प्रयोजनों जैसे भंडारण, परीक्षण, रासायनिक शोधन, आदि के लिए प्रयोगशाला स्थितियों के तहत तैयार और बनाए रखा जाता है। ग्राम दाग एक धुंधला प्रक्रिया है जो बैक्टीरिया को दो मुख्य समूहों में विभाजित करती है जिन्हें ग्राम नकारात्मक बैक्टीरिया और ग्राम सकारात्मक बैक्टीरिया कहा जाता है।इसलिए, ग्राम दाग और संस्कृति के बीच का अंतर यह है कि ग्राम दाग बैक्टीरिया की एक धुंधला तकनीक है जबकि संस्कृति प्रयोगशालाओं में सूक्ष्मजीवों को विकसित करने और बनाए रखने की एक विधि है।
