पौरा प्लेट और स्प्रेड प्लेट के बीच मुख्य अंतर यह है कि नमूने की एक ज्ञात मात्रा स्प्रेड प्लेट में अगर माध्यम की सतह पर फैली हुई है, जबकि, डालना प्लेट में, नमूने की एक ज्ञात मात्रा के साथ मिलाया जाता है अगर और फिर एक प्लेट में डाल दिया। इन दो तकनीकों की सटीकता की तुलना करते समय, स्प्रेड प्लेट की तुलना में डालना प्लेट की सटीकता अधिक होती है।
मानक प्लेट गणना पद्धति एक वृद्धि आधारित दृष्टिकोण है जो एक नमूने के भीतर जीवित (बढ़ते/खेती योग्य/व्यवहार्य) सूक्ष्मजीवों की संख्या की गणना करता है। जीवित सूक्ष्मजीवों की संख्या का विश्लेषण करने के लिए कई सूक्ष्मजीवविज्ञानी क्षेत्रों में उपयोग में यह एक शक्तिशाली तरीका है।खाद्य और डेयरी, चिकित्सा, पर्यावरण, जलीय और कृषि, माइक्रोबियल आनुवंशिकी, आणविक सूक्ष्म जीव विज्ञान, विकास मीडिया विकास, और जैव प्रौद्योगिकी (बायोरिएक्टर प्रौद्योगिकी, किण्वन, अपशिष्ट / अपशिष्ट जल उपचार आदि) जैसे क्षेत्र इस तकनीक का उपयोग करते हैं। इसके अलावा, मानक प्लेट गणना करने के दो मुख्य तरीके हैं: वे हैं, स्प्रेड प्लेट तकनीक और पोर प्लेट तकनीक।
पोर प्लेट क्या है?
Pour प्लेट तकनीक एक नमूने में मौजूद कुछ व्यवहार्य कोशिकाओं की गणना करने के लिए एक माइक्रोबियल विधि है। डालना प्लेट विधि की विशेषता यह है कि नमूने के ज्ञात आयतन को पहले अगर के साथ मिलाया जाता है और फिर प्लेट में डाला जाता है।
चित्रा 01: प्लेट डालो
अन्य चरण अगले भाग में चर्चा की गई स्प्रेड प्लेट तकनीक के समान हैं।नमूने के साथ मिश्रित आगर डालने के बाद अगला कदम यह है कि इसे जमने और इनक्यूबेट करने की अनुमति दी जाए। ऊष्मायन के बाद, 1 ग्राम या 1 मिलीलीटर के लिए अंतिम सीएफयू की गणना करने के लिए व्यवहार्य कॉलोनियों की संख्या की गणना करना आवश्यक है।
स्प्रेड प्लेट क्या है?
स्प्रेड प्लेट एक नमूने में व्यवहार्य कोशिकाओं की गणना करने की एक तकनीक है। इस तकनीक के लिए, नमूना के लिए एक सीरियल कमजोर पड़ने की आवश्यकता है ताकि यह सुनिश्चित हो सके कि कम से कम एक कॉलोनियों की एक गणनीय संख्या को जन्म दे। यहां प्रक्रिया एक अगर प्लेट की सतह पर कमजोर पड़ने की एक निर्धारित मात्रा को पिपेट करना है और इसे एक ग्लास स्प्रेडर के साथ आगर की सतह पर जल्दी और समान रूप से फैलाना है, जिसे अल्कोहल फ्लेम और ठंडा किया गया है। विश्वसनीय माध्य मान प्राप्त करने के लिए प्रतिकृति करना आवश्यक है। अगला कदम इन प्लेटों को थोड़े समय के लिए सुखाना है, और फिर उन्हें उल्टा करके एक इनक्यूबेटर में विकास के लिए और एक निर्धारित ऊष्मायन अवधि के लिए उपयुक्त तापमान पर रखना है।
चित्रा 02: प्लेट फैलाएं
इन्क्यूबेशन के बाद, प्लेटों की जांच करने से वृद्धि दिखाई देगी। एक या अधिक तनुकरण पर, इनोकुलेंट्स (जैसे 100 या 200μl) में मौजूद कोशिकाओं की संख्या अग्र सतह पर 30 से 300 असतत कॉलोनियों को जन्म देगी। 30 से कम कॉलोनियों की संख्या सांख्यिकीय रूप से अविश्वसनीय है। 300 से ऊपर की गणना करना मुश्किल है और त्रुटि की संभावना है।
पोर प्लेट और स्प्रेड प्लेट में क्या समानताएं हैं?
- स्प्रेड प्लेट और डालना प्लेट नमूने में मौजूद व्यवहार्य कोशिकाओं की संख्या प्राप्त करने के लिए दो तकनीकें हैं।
- दोनों सीधे आगे के तरीके हैं।
- नमूना त्रुटि दोनों तरीकों से हो सकती है।
- विकास की स्थिति की सीमाएं दोनों विधियों के परिणाम को प्रभावित करती हैं।
- तकनीकी त्रुटियां भी दोनों विधियों के अंतिम परिणाम में हस्तक्षेप कर सकती हैं।
- यद्यपि व्यवहार्य होने के बावजूद, गैर-कृषि योग्य जीवाणुओं को विकसित करने के लिए दो विधियों का उपयोग नहीं किया जा रहा है।
पोर प्लेट और स्प्रेड प्लेट में क्या अंतर है?
डाल प्लेट एक माइक्रोबियल तकनीक है जो एक नमूने में कई व्यवहार्य कोशिकाओं की गणना करती है। स्प्रेड प्लेट तकनीक मीडिया की सतह पर उगने वाले जीवाणुओं की गणना करने की एक अन्य तकनीक है। डालना प्लेट तकनीक में, प्रक्रिया नमूना को डालना प्लेट पर जमी हुई मध्यम सतह पर जोड़ना है। लेकिन, स्प्रेड प्लेट तकनीक में, नमूना को पिघला हुआ अगर के साथ मिलाकर प्लेट में डालने की प्रक्रिया है।
इन दो तकनीकों की सटीकता के संबंध में, स्प्रेड प्लेट की तुलना में डालना प्लेट की सटीकता अधिक होती है। इसके अलावा, एक डालना प्लेट के विपरीत, एक स्प्रेड प्लेट पर सतह पर समान रूप से नमूना फैलाने के लिए एक ग्लास स्प्रेडर का उपयोग किया जाता है। इसके अलावा, डालना प्लेट का उपयोग करके, एरोबेस, अवायवीय और वैकल्पिक अवायवीय की गणना करना संभव है। हालांकि, स्प्रेड प्लेट का उपयोग करके केवल एरोबस की गणना करना संभव है।इसके अलावा, जमी हुई अगर प्लेटें स्प्रेड प्लेट करने के लिए आवश्यक हैं जबकि तरल पिघला हुआ अगर मीडिया डालना विधि के लिए आवश्यक हैं।
सारांश - प्लेट बनाम स्प्रेड प्लेट डालें
एक नमूने में माइक्रोबियल कोशिकाओं की गणना की सुविधा के लिए माइक्रोबायोलॉजी में पोर प्लेट और स्प्रेड प्लेट दो तकनीकें हैं। दोनों विधियां विकास आधारित हैं इसलिए व्यवहार्य कोशिकाओं को मापें। डालना प्लेट के दौरान, नमूने की एक ज्ञात मात्रा को पिघला हुआ अगर के साथ मिलाया जाता है और प्लेट में डाला जाता है। स्प्रेड प्लेट के दौरान, ठोस अगर माध्यम की सतह पर एक ज्ञात आयतन फैला होता है। डालना प्लेट और स्प्रेड प्लेट में यही अंतर है।
