मुख्य अंतर – आरपीएमआई बनाम डीएमईएम
अधिकांश शोध अध्ययनों में पशु कोशिका संवर्धन शामिल है और इस प्रकार, इन अध्ययनों में विशेष विकास स्थितियों के तहत पशु कोशिका लाइनों के रखरखाव की आवश्यकता होती है। दवा चयापचय की पहचान करने के लिए, रोग निदान में और कैंसर अनुसंधान में औषधीय अध्ययन में पशु कोशिका संवर्धन व्यापक रूप से किया जाता है। सेल कल्चर मीडिया एनिमल सेल कल्चर का एक महत्वपूर्ण पहलू है। Dulbecco's Modified ईगल मीडियम (DMEM) और रोसवेल पार्क मेमोरियल इंस्टीट्यूट मीडियम (RPMI) दो कल्चर मीडिया हैं जिनका इस्तेमाल एनिमल सेल कल्चरिंग में किया जाता है। RPMI निलंबन संस्कृति में स्तनधारी कोशिकाओं की संस्कृति के लिए व्यापक रूप से उपयोग किया जाने वाला मीडिया है। DMEM एक संशोधित प्रकार का बेसल माध्यम है, जिसमें अमीनो एसिड और विटामिन सांद्रता चार गुना तक बढ़ जाती है।DMEM का उपयोग अनुयाई संस्कृतियों में कोशिकाओं के संवर्धन में किया जाता है। दो मीडिया के बीच महत्वपूर्ण अंतर मीडिया की संस्कृति का प्रकार है। RPMI का उपयोग निलंबन संस्कृतियों पर किया जाता है, जबकि DMEM का उपयोग अनुयाई कोशिकाओं को पालने के लिए किया जाता है।
RPMI क्या है?
RPMI या रोसवेल पार्क मेमोरियल इंस्टीट्यूट मीडियम को RPMI 1640 के रूप में भी जाना जाता है। मीडिया का नाम उस संस्थान द्वारा लिया गया था जिसमें मीडिया की खोज की गई थी। इस मीडिया का उपयोग आमतौर पर पशु कोशिका संवर्धन में किया जाता है, विशेष रूप से स्तनधारी कोशिकाओं के विकास के लिए। वे मूल रूप से मानव लिम्फोसाइटों को विकसित करने के लिए विकसित किए गए थे।
RPMI में निम्नलिखित सामग्री शामिल हैं।
- ग्लूकोज
- पीएच संकेतक (फिनोल रेड)\
- लवण (सोडियम क्लोराइड, सोडियम बाइकार्बोनेट, डिसोडियम फॉस्फेट, पोटेशियम क्लोराइड, मैग्नीशियम सल्फेट और कैल्शियम नाइट्रेट)
- अमीनो एसिड
- विटामिन (आई-इनोसिटोल, कोलीन क्लोराइड, पैरा-एमिनोबेंजोइक एसिड, फोलिक एसिड, निकोटिनमाइड, पाइरिडोक्सिन हाइड्रोक्लोराइड, थायमिन हाइड्रोक्लोराइड, कैल्शियम पैंटोथेनेट, बायोटिन और राइबोफ्लेविन, सायनोकोबालामिन)
RPMI की विशेष विशेषता माध्यम में फॉस्फेट की बढ़ी हुई सांद्रता है। RPMI का उपयोग 5% कार्बन डाइऑक्साइड वातावरण में किया जाता है। यह कोशिका वृद्धि के लिए अधिकतम और इष्टतम स्थिति प्रदान करेगा। मीडिया का पीएच बाइकार्बोनेट बफरिंग सिस्टम द्वारा 8.0 पर बनाए रखा जाता है।
चित्र 01: पेट्री डिश पर सेल कल्चर
सेल संवर्धन में आरपीएमआई के अनुप्रयोग
- मानव टी और बी लिम्फोसाइट्स, अस्थि मज्जा कोशिकाओं और हाइब्रिडोमा की खेती।
- मानव नियोप्लास्टिक कोशिकाओं का अध्ययन करने के लिए उपयोग किया जाता है।
डीएमईएम क्या है?
Dulbecco का मॉडिफाइड ईगल मीडियम (DMEM) एक संशोधित माध्यम है जो व्यावसायिक रूप से तैयार किया जाता है। मध्यम पाउडर का मूल बनावट पीला है। DMEM में, विटामिन की मात्रा चार गुना तक बढ़ जाती है जिससे माध्यम में पोषक तत्वों की मात्रा बढ़ जाती है।
DMEM को और अधिक लवण जैसे फेरिक नाइट्रेट, सोडियम पाइरूवेट और कुछ गैर-आवश्यक अमीनो एसिड जैसे सेरीन और ग्लाइसिन जोड़कर संशोधित किया जाता है। मीडिया में ग्लूकोज का निर्माण भी बदल जाता है। मूल फॉर्मूलेशन 1000 मिलीग्राम / एल ग्लूकोज से बना है, जबकि डीएमईएम में, एकाग्रता 4500 मिलीग्राम / एल तक बढ़ जाती है। DMEM को सीरम माध्यम के पूरक की भी आवश्यकता होती है क्योंकि यह एक पूर्ण माध्यम नहीं है। अक्सर, डीएमईएम को भ्रूण गोजातीय सीरम (एफबीएस) के साथ पूरक किया जाता है। FBS संवर्धन प्रक्रिया के लिए आवश्यक प्रोटीन और वृद्धि कारक प्रदान करता है।
माध्यम का pH सोडियम बाइकार्बोनेट मिलाने पर बदलता रहता है। सोडियम बाइकार्बोनेट जोड़ने से पहले माध्यम का पीएच लगभग 6.80 - 7.40 है, जबकि सोडियम बाइकार्बोनेट जोड़ने के बाद पीएच 7.60 - 8.20 की सीमा में है। माध्यम का भंडारण तापमान 2 - 8 0C. है
चित्र 02: डीएमईएम
डीएमईएम के आवेदन
- माउस भ्रूण कोशिकाओं में पॉलीओमावायरस की पट्टिका बनाने की क्षमता का अध्ययन करने के लिए।
- संपर्क निषेध अध्ययन में।
- अनुसंधान और विश्लेषण में चिकन सेल कल्चर।
RPMI और DMEM में क्या समानताएं हैं?
- RPMI और DMEM दोनों का उपयोग पशु कोशिका संवर्धन में किया जाता है।
- RPMI और DMEM दोनों मीडिया लिक्विड फॉर्म्युलेशन हैं।
- RPMI और DMEM दोनों मीडिया में विकास के लिए आवश्यक अमीनो एसिड, विटामिन और अकार्बनिक लवण होते हैं।
- RPMI और DMEM दोनों मीडिया अधूरे हैं। इसलिए सीरम मिलाना चाहिए।
- RPMI और DMEM दोनों मीडिया ग्लूकोज को कार्बन स्रोत के रूप में उपयोग करते हैं।
- RPMI और DMEM मीडिया दोनों का pH अधिक होता है।
RPMI और DMEM में क्या अंतर है?
आरपीएमआई बनाम डीएमईएम |
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| RPMI एक निलंबन संस्कृति में स्तनधारी कोशिकाओं के संवर्धन के लिए व्यापक रूप से उपयोग किया जाने वाला माध्यम है। | DMEM बढ़े हुए अमीनो एसिड और विटामिन सांद्रता के साथ एक संशोधित प्रकार का बेसल माध्यम है। |
| अतिरिक्त फॉस्फेट की उपस्थिति | |
| RPMI में उपस्थित। | डीएमईएम में अनुपस्थित। |
| उपयोग | |
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अनुयाई संस्कृतियों में संस्कृति कोशिकाओं के लिए प्रयुक्त। इसका उपयोग किया जाता है,
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| संस्कृति के प्रकार | |
| RPMI का उपयोग निलंबन संस्कृतियों के लिए किया जाता है। | DMEM का उपयोग सेल पालन वाली संस्कृतियों के लिए किया जाता है। |
सारांश – आरपीएमआई बनाम डीएमईएम
RPMI और DMEM दोनों का व्यापक रूप से पशु कोशिका संवर्धन में उपयोग किया जाता है, विशेष रूप से इन विट्रो में लिम्फोसाइटों सहित पशु कोशिका लाइनों की संस्कृति के लिए। डीएमईएम एक संशोधित बेसल माध्यम है जहां पोषक तत्वों की मात्रा में वृद्धि होती है। RPMI को रोसवेल पार्क मेमोरियल इंस्टीट्यूट द्वारा विकसित किया गया है, और यह विशेष रूप से स्तनधारी लिम्फोसाइटों के लिए पशु कोशिका संवर्धन में उपयोग किया जाने वाला माध्यम भी है।दोनों मीडिया व्यावसायिक रूप से उपलब्ध हैं। आरपीएमआई और डीएमईएम में यही अंतर है।
