मुख्य अंतर - सीएफयू बनाम एमपीएन
कालोनी बनाने वाली इकाई (CFU) और सबसे संभावित संख्या (MPN) नमूनों में सूक्ष्मजीवों की गणना करने के लिए उपयोग की जाने वाली दो विधियाँ हैं। पानी के नमूनों में पानी की गुणवत्ता और मल संकेतक बैक्टीरिया का पता लगाने के लिए दोनों मापदंडों का उपयोग किया जाता है। कॉलोनी बनाने वाली इकाई किसी दिए गए नमूने की विशिष्ट मात्रा या वजन में व्यवहार्य जीवाणु कोशिकाओं या कवक कोशिकाओं की संख्या की गणना करने के लिए उपयोग किया जाने वाला एक उपाय है। इस पैरामीटर के लिए मानक इकाई सीएफयू/एमएल या सीएफयू/जी है। सबसे संभावित संख्या एक अन्य इकाई है जिसका उपयोग तरल नमूने में व्यवहार्य जीवाणु कोशिकाओं की संख्या को मापने के लिए किया जाता है। सीएफयू और एमपीएन के बीच महत्वपूर्ण अंतर यह है कि सीएफयू की गणना एक ठोस अगर प्लेट पर उगने वाले बैक्टीरिया और कवक कालोनियों से की जाती है, जबकि एमपीएन की गणना एक तरल माध्यम में बढ़ने वाले व्यवहार्य बैक्टीरिया से की जाती है।
सीएफयू क्या है?
कॉलोनी बनाने वाली इकाई (CFU) एक पैरामीटर है जो किसी दिए गए नमूने में व्यवहार्य जीवाणु या कवक कोशिकाओं की संख्या को मापता है। कॉलोनी बनाने वाली इकाइयों की गणना करने वाली विधि को मानक प्लेट काउंट कहा जाता है। अग्र प्लेटों पर दिखाई देने वाली व्यवहार्य कॉलोनियों को तरल पदार्थ के लिए नमूने के प्रति 1 मिलीलीटर (कॉलोनी बनाने वाली इकाई प्रति मिलीलीटर) के रूप में व्यक्त किया जाता है या ठोस पदार्थों के लिए नमूने के प्रति 1 ग्राम (कॉलोनी बनाने वाली इकाई प्रति ग्राम) के रूप में व्यक्त किया जाता है।
एक नमूने में सीएफयू को मापने के लिए दो सामान्य तरीकों का इस्तेमाल किया जाता है। वे प्लेट विधि फैलाते हैं और प्लेट विधि डालते हैं। इन दो विधियों को धारावाहिक कमजोर पड़ने नामक तकनीक द्वारा समर्थित किया जाता है। क्रमिक रूप से पतला नमूने अगर सतह पर कालोनियों की एक गणनीय संख्या प्राप्त करने में सक्षम होते हैं। नमूने की एक ज्ञात मात्रा को अगर प्लेट की सतह पर फैलाया जा सकता है, या अगर के साथ मिलाया जा सकता है और प्लेट पर डाला जा सकता है। फिर प्लेट को इनक्यूबेट किया जाता है और उत्पन्न होने वाली कॉलोनियों को गिना जाता है। कालोनियों की संख्या मूल नमूने के भीतर सूक्ष्मजीवों की संख्या से संबंधित है।जो प्लेटें बहुत अधिक कॉलोनियों या बहुत कम कॉलोनियों को दिखाती हैं उन्हें गिनती से बाहर रखा जाता है क्योंकि परिणाम उन प्लेटों पर सांख्यिकीय रूप से सटीक नहीं हो सकते हैं। सांख्यिकीय रूप से, सबसे अच्छी रेंज एक अगर प्लेट पर 30 - 300 कॉलोनियां हैं। इसलिए, सटीक गणना के लिए सही प्लेटों का चयन किया जाना चाहिए। उपरोक्त फ़ंक्शन के लिए सीरियल कमजोर पड़ने का प्रदर्शन किया जाता है।
एक बार जब आप प्लेटों पर व्यवहार्य कॉलोनियों की संख्या की गणना कर लेते हैं, तो सीएफयू/एमएल की गणना निम्नलिखित समीकरण का उपयोग करके की जा सकती है।
CFU प्रति मिलीलीटर मूल नमूने=एक प्लेट पर कॉलोनियों की संख्या X कमजोर पड़ने वाला कारक
डायल्यूशन फैक्टर=(1/ प्लेट का कमजोर पड़ना)
उदाहरण के लिए, यदि आपको 10-4 कमजोर पड़ने की प्लेट पर 149 कॉलोनियां मिलती हैं, तो मूल नमूने के 1 मिलीलीटर में बैक्टीरिया की संख्या की गणना निम्नानुसार की जा सकती है:
सीएफयू/एमएल=(149) x (1/10-4)
=149 × 104 या 1490000
=1. 49 x 106
चित्र 01: कॉलोनी बनाने वाली इकाई
एमपीएन क्या है?
सबसे संभावित संख्या सीएफयू/एमएल का एक वैकल्पिक उपाय है। एमपीएन एक तरल नमूने में व्यवहार्य कोशिकाओं का भी अनुमान लगाता है। यह एक तरल संस्कृति में बढ़ने वाले जीवों की गणना करता है और मुख्य रूप से बैक्टीरियोलॉजिकल तकनीक है। यह विधि उन नमूनों के लिए विशेष रूप से उपयोगी है जिनमें जीवाणु कोशिकाओं की कम सांद्रता होती है; उदाहरण के लिए, दूध, पीने योग्य पानी आदि। एमपीएन मान 100 मिलीलीटर मात्रा के लिए व्यक्त किया जाता है। एमपीएन संभाव्यता सिद्धांत पर आधारित एक सांख्यिकीय पद्धति पर निर्भर करता है। नमूने के प्रति 100 मिलीलीटर एमपीएन मूल्यों को खोजने के लिए डिज़ाइन की गई सांख्यिकीय तालिकाएँ हैं। ये तालिकाएं 95% विश्वास सीमा पर परिणाम दिखाती हैं।
एमपीएन मूल्य की गणना मल्टीपल ट्यूब किण्वन विधि नामक तकनीक का प्रदर्शन करने के बाद की जाती है। उपयुक्त कल्चर माध्यम वाले ट्यूबों के तीन सेटों को नमूने के तीन अलग-अलग संस्करणों जैसे कि 10 मिली, 1 मिली, और 0 के साथ टीका लगाया जाता है।1 मिली और विकास के लिए इनक्यूबेट किया गया। ऊष्मायन अवधि के बाद, वृद्धि की उपस्थिति या अनुपस्थिति के लिए ट्यूबों को + (सकारात्मक) या - (नकारात्मक) स्कोर किया जाता है। फिर सकारात्मक और नकारात्मक परिणामों के पैटर्न की तुलना सूक्ष्मजीवों की संख्या का अनुमान लगाने के लिए सांख्यिकीय संभावनाओं की एक एमपीएन तालिका से की जाती है। फिर नमूने के 100 मिलीलीटर के लिए एमपीएन मान दिया जाता है। एमपीएन का व्यापक रूप से पानी के नमूनों में मौजूद कोलीफॉर्म बैक्टीरिया का पता लगाने के लिए उपयोग किया जाता है।
चित्र 02: एमपीएन तालिका
CFU और MPN में क्या अंतर है?
सीएफयू बनाम एमपीएन |
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CFU एक उपाय है जिसका उपयोग किसी दिए गए नमूने में व्यवहार्य जीवाणु या कवक कालोनियों की संख्या को व्यक्त करने के लिए किया जाता है। | एमपीएन सीएफयू का एक वैकल्पिक उपाय है और एक तरल नमूने में व्यवहार्य जीवाणु कोशिकाओं की संख्या को मापता है। |
इकाई | |
सीएफयू/एमएल या सीएफयू/जी | एमपीएन/100 मिली |
गणना | |
CFU की गणना आगर प्लेटों पर उगाई गई कॉलोनियों की संख्या की गणना करके की जाती है। | एमपीएन की गणना एमपीएन सांख्यिकीय तालिका के साथ ट्यूबों के सकारात्मक और नकारात्मक पैटर्न की तुलना करके की जाती है। |
सीरियल प्रदूषण तकनीक | |
नमूनों को आगर प्लेटों पर रखने से पहले सीरियल कमजोर पड़ने का प्रदर्शन किया जाता है। | एमपीएन की गणना करते समय सामान्य रूप से सीरियल कमजोर पड़ने का प्रदर्शन नहीं किया जाता है |
तरीके | |
स्प्रेड प्लेट विधि और डालना प्लेट विधि CFU प्राप्त करने के लिए दो प्रकार की विधियाँ हैं। | एकाधिक ट्यूब किण्वन MPN मान प्राप्त करने की विधि है। |
सारांश – सीएफयू बनाम एमपीएन
सूक्ष्मजीवों की वृद्धि को मापना कई कारणों से आवश्यक है। खाद्य प्रसंस्करण संयंत्रों में, भोजन में सूक्ष्मजीवों के स्तर और प्रकार को मापना आवश्यक है। खाद्य उद्योग और चिकित्सा में, यह सुनिश्चित करना आवश्यक है कि नसबंदी उपचार प्रभावी ढंग से लागू होते हैं। सीवेज ट्रीटमेंट प्लांट में नियमित रूप से माइक्रोबियल काउंट लेना जरूरी होता है। आणविक जीव विज्ञान में प्रक्रिया का अनुकूलन करते समय, प्लेटों पर कॉलोनियों की संख्या को मापना आवश्यक है। इसलिए, अलग-अलग गणना और विकास माप विधियां उपलब्ध हैं। CFU और MPN दो ऐसे तरीके हैं जो विभिन्न क्षेत्रों में व्यापक रूप से अपनाए जा रहे हैं। सीएफयू किसी दिए गए नमूने में मौजूद व्यवहार्य जीवाणु और कवक कालोनियों की संख्या का एक उपाय है। इसकी गणना मानक प्लेट काउंट विधि या व्यवहार्य प्लेट काउंट विधि का उपयोग करके की जाती है। एमपीएन एक अन्य उपाय है जो तरल नमूने की एक निश्चित मात्रा में मौजूद जीवाणु कोशिकाओं की संख्या को व्यक्त करता है।इसकी गणना कई ट्यूब किण्वन विधि और एमपीएन तालिका का उपयोग करके की जाती है। सीएफयू और एमपीएन में यही अंतर है।
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