मुख्य अंतर - ट्रांसफॉर्मेंट्स बनाम रिकॉम्बिनेंट्स
पुनर्संयोजन और परिवर्तन आनुवंशिक इंजीनियरिंग में दो महत्वपूर्ण चरण हैं, जहां किसी जीव की विशेषताओं को उसकी आनुवंशिक सामग्री में हेरफेर करके जानबूझकर संशोधित किया जाता है। पुनर्संयोजन एक ऐसी प्रक्रिया है जिसमें विदेशी डीएनए को एक वेक्टर जीनोम में शामिल किया जाता है और पुनः संयोजक डीएनए अणु का निर्माण होता है। परिवर्तन अगला चरण है जिसमें पुनः संयोजक अणु मेजबान जीव में प्रवेश किया जाता है। मेजबान कोशिका या जीव पुनः संयोजक अणु की अभिव्यक्ति की सुविधा प्रदान करता है। ट्रांसफार्मर और पुनः संयोजक के बीच महत्वपूर्ण अंतर यह है कि ट्रांसफार्मर कोशिकाएं या जीव होते हैं जो पुनः संयोजक अणु को अंदर ले जाते हैं और अभिव्यक्ति की सुविधा प्रदान करते हैं जबकि पुनः संयोजक वेक्टर होते हैं जो विदेशी डीएनए को अपने जीनोम में सम्मिलित करने और अभिव्यक्ति के लिए मेजबान ट्रांसफार्मर में परिवहन की अनुमति देते हैं।
ट्रांसफॉर्मेंट क्या हैं?
ट्रांसफॉर्मेंट वे कोशिकाएं या जीव हैं जिनमें अभिव्यक्ति के लिए पुनः संयोजक डीएनए लिया जाता है। जीवाणुओं को आमतौर पर आनुवंशिक इंजीनियरिंग में मेजबान जीवों के रूप में उपयोग किया जाता है क्योंकि वे प्रयोगशाला परिस्थितियों में बढ़ने, गुणा करने और संभालने में आसान होते हैं और अन्य जीवों की तुलना में परिवर्तन प्रक्रिया आसान होती है। जेनेटिक इंजीनियरिंग में उपयोग किया जाने वाला सबसे लोकप्रिय मेजबान जीवाणु ई कोलाई है।
रूपांतरण प्रक्रिया के दौरान, मेजबान कोशिकाओं को पुनः संयोजक लेने के लिए प्रेरित किया जाता है। हालांकि, कुछ मेजबान कोशिकाएं पुनः संयोजक अणु नहीं लेती हैं। उन्हें नॉनट्रांसफॉर्मेंट्स के रूप में जाना जाता है और जिन कोशिकाओं के अंदर पुनः संयोजक डीएनए अणु होते हैं उन्हें ट्रांसफॉर्मेंट के रूप में जाना जाता है। आणविक जीव विज्ञान में चयन योग्य मार्करों का उपयोग करके नॉनट्रांसफॉर्मेंट्स से ट्रांसफॉर्मेंट्स का चयन किया जाता है। डीएनए डालने के साथ चयन योग्य मार्कर वेक्टर जीनोम में डाले जाते हैं। आमतौर पर इस्तेमाल किए जाने वाले चुनिंदा मार्कर एंटीबायोटिक प्रतिरोधी जीन होते हैं।मार्कर जीन ट्रांसफॉर्मर के विभेदीकरण की सुविधा प्रदान करते हैं और प्रक्रिया को जारी रखते हैं। परिवर्तन प्रक्रिया के बाद, जीवाणु को एंटीबायोटिक युक्त माध्यम में उगाया जाता है। केवल ट्रांसफॉर्मर ही उस माध्यम पर बढ़ने में सक्षम होते हैं क्योंकि उनके अंदर पुनः संयोजक होते हैं।
एक बार जब पुनः संयोजक डीएनए अणु मेजबान जीव के अंदर बदल जाता है, तो विदेशी डीएनए या तो मेजबान कोशिका जीनोम में एकीकृत हो सकता है या साइटोप्लाज्म में गैर-एकीकृत रह सकता है। हालांकि, विदेशी डीएनए की अभिव्यक्ति और प्रतिकृति मेजबान जीव में होती है और प्रक्रिया से वांछित परिणाम उत्पन्न करती है।
पुनः संयोजक क्या हैं?
एक पुनः संयोजक एक जीव या एक कोशिका है जिसमें विदेशी डीएनए युक्त पुनर्संयोजित जीनोम होता है। पुनर्योगज आनुवंशिक इंजीनियरिंग प्रक्रिया का परिणाम हैं।वे कृत्रिम रूप से इन विट्रो में रुचि के जीन डालने और जीनोम को संशोधित करके निर्मित होते हैं। अक्सर जीवाणु प्लास्मिड और बैक्टीरियोफेज आनुवंशिक इंजीनियरिंग में पुनः संयोजक के रूप में कार्य करते हैं। इसमें विभिन्न डीएनए की कल्पना है। पुनः संयोजक डीएनए अणु विदेशी डीएनए को मेजबान जीव में ले जाता है और इसे व्यक्त करता है और वांछित उत्पाद बनाता है।
पुनः संयोजक अणुओं का निर्माण प्रतिबंध एंडोन्यूक्लाइजेस और डीएनए लिगेज का उपयोग करके किया जाता है। वांछित डीएनए खंड को मूल जीव से अलग किया जाता है और परिवर्तन के लिए पुनः संयोजक बनाने के लिए वेक्टर में डाला जाता है। रुचि के जीन को काटना और वेक्टर जीव को खोलना एक ही प्रतिबंध एंजाइम का उपयोग करके संगत चिपचिपा सिरों को एक साथ जोड़ने के लिए बनाया जाना चाहिए। एक बार जब विदेशी डीएनए को वेक्टर जीनोम में शामिल कर लिया जाता है, तो इसे पुनः संयोजक या पुनः संयोजक डीएनए अणु के रूप में जाना जाता है।
चित्र 02: पुनः संयोजक डीएनए
ट्रांसफॉर्मेंट्स और रिकॉम्बिनेंट्स में क्या अंतर है?
ट्रांसफॉर्मेंट्स बनाम रिकॉम्बिनेंट्स |
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| ट्रांसफॉर्मेंट वे कोशिकाएं हैं जिनके अंदर पुनः संयोजक डीएनए अणु होते हैं। | पुनः संयोजक वाहक अणु होते हैं जिनके अपने जीनोम में विदेशी डीएनए डाला जाता है। |
| विदेशी डीएनए की अभिव्यक्ति | |
| वे मेजबान कोशिकाएं हैं जो पुनः संयोजक डीएनए को व्यक्त करने में सक्षम हैं। | उन्हें मेजबान जीव के भीतर आत्म-प्रतिकृति करने में सक्षम होना चाहिए। |
| चयन | |
| कोशिकाएं जिन्हें आसानी से उगाया और गुणा किया जा सकता है उन्हें मेजबान कोशिकाओं के रूप में चुना जाता है। | उन्हें आसानी से निकाला जा सकता है और उनमें चयन योग्य मार्कर होने चाहिए। |
सारांश – ट्रांसफॉर्मेंट्स बनाम रिकॉम्बिनेंट्स
ट्रांसफॉर्मेंट कोशिकाएं या जीव होते हैं जिनके अंदर पुनः संयोजक डीएनए अणु होते हैं। पुनः संयोजक वे जीव या कोशिकाएँ हैं जिनका आनुवंशिक पुनर्संयोजन हुआ है और उनके जीनोम के भीतर विदेशी डीएनए है। जीवाणु कोशिकाओं को अक्सर परिवर्तन के लिए मेजबान कोशिकाओं के रूप में उपयोग किया जाता है और प्लास्मिड और बैक्टीरियोफेज को अक्सर पुनः संयोजक डीएनए प्रौद्योगिकी में वैक्टर के रूप में उपयोग किया जाता है। ट्रांसफॉर्मेंट्स और रीकॉम्बिनेंट्स के बीच यही अंतर है।
