मुख्य अंतर - वाईएसी बनाम बीएसी वैक्टर
आणविक क्लोनिंग में सदिशों का प्रयोग किया जाता है। एक वेक्टर को डीएनए अणु के रूप में परिभाषित किया जा सकता है जो विदेशी आनुवंशिक सामग्री को दूसरे सेल में ले जाने के लिए एक वाहन के रूप में व्यवहार करता है। विदेशी डीएनए युक्त एक वेक्टर को पुनः संयोजक डीएनए के रूप में जाना जाता है और इसमें मेजबान जीव के भीतर इसे दोहराने और व्यक्त करने की क्षमता होनी चाहिए। यीस्ट आर्टिफिशियल क्रोमोसोम (YAC) और बैक्टीरियल आर्टिफिशियल क्रोमोसोम (BAC) क्लोनिंग में शामिल दो प्रकार के वैक्टर हैं। वाईएसी और बीएसी के बीच महत्वपूर्ण अंतर यह है कि वाईएसी एक कृत्रिम रूप से निर्मित वेक्टर प्रणाली है जो खमीर कोशिकाओं के लिए आनुवंशिक सामग्री के बड़े खंडों को सम्मिलित करने के लिए खमीर गुणसूत्र के एक विशिष्ट क्षेत्र का उपयोग करती है जबकि बीएसी ई के एक विशिष्ट क्षेत्र का उपयोग करके कृत्रिम रूप से निर्मित वेक्टर प्रणाली है।ई. कोलाई कोशिकाओं में डीएनए के बड़े खंडों को सम्मिलित करने के लिए कोलाई गुणसूत्र।
YAC वैक्टर क्या हैं?
YAC (यीस्ट कृत्रिम गुणसूत्र) एक कृत्रिम रूप से निर्मित गुणसूत्र है जिसमें विदेशी डीएनए के एक बड़े खंड को ले जाने और खमीर कोशिकाओं के भीतर दोहराने की क्षमता होती है। इसमें एक सेंट्रोमियर, टेलोमेरेस के साथ-साथ स्वायत्त रूप से प्रतिकृति अनुक्रम हैं जो प्रतिकृति और स्थिरता के लिए आवश्यक हैं। YAC को एक प्रभावी क्लोनिंग वेक्टर बनाने के लिए एक चयनात्मक मार्कर या मार्कर और प्रतिबंध साइटों को भी धारण करना चाहिए। 1000 kb से 2000 kb तक के बड़े अनुक्रम को YAC में डाला जा सकता है और खमीर में स्थानांतरित किया जा सकता है। YAC की परिवर्तन क्षमता बहुत कम है।
चित्र 01: वाईएसी वेक्टर
बीएसी वेक्टर क्या हैं?
जीवाणु कृत्रिम गुणसूत्र (बीएसी) आणविक क्लोनिंग के लिए कृत्रिम रूप से निर्मित गुणसूत्र है।इसमें ई. कोलाई एफ प्लास्मिड के विशिष्ट क्षेत्र हैं और यह गोलाकार और सुपर कुंडलित है। बीएसी को डीएनए अंशों को बैक्टीरिया, विशेष रूप से ई. कोलाई में क्लोन करने के लिए विकसित किया गया है। यह 300 kb तक के आकार वाले डीएनए अंशों को सहन कर सकता है। YAC की तुलना में, BAC क्लोनिंग इंसर्ट आकार में छोटे होते हैं। बीएसी 1992 में विकसित किए गए थे और यह अभी भी अपनी स्थिरता और निर्माण में आसानी के कारण लोकप्रिय है। बीएसी टीके विकसित करने में भी उपयोगी हैं।
चित्र 02: आणविक क्लोनिंग में बीएसी वेक्टर
YAC और BAC वेक्टर में क्या अंतर है?
YAC बनाम BAC वेक्टर |
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| YAC क्लोनिंग के उद्देश्य से यीस्ट डीएनए के उपयोग के साथ आनुवंशिक रूप से इंजीनियर गुणसूत्र है। | बीएसी एक आनुवंशिक रूप से इंजीनियर डीएनए अणु है जो क्लोनिंग के उद्देश्य से ई. कोलाई डीएनए का उपयोग करता है। |
| लिंग | |
| YACs को जीनोमिक डीएनए के बड़े टुकड़ों को यीस्ट में क्लोन करने के लिए डिज़ाइन किया गया था। | बीएसी बड़े जीनोमिक अंशों को एस्चेरिचिया कोलाई में क्लोन करने के लिए विकसित किए गए थे। |
| लंबाई डालें | |
| YAC में मेगाबेस के आकार के जीनोमिक इंसर्ट हो सकते हैं।(1000 kb - 2000 kb)। | बीएसी 200-300 केबी या उससे कम के इंसर्ट ले जा सकते हैं। |
| निर्माण | |
| YAC डीएनए अक्षुण्ण शुद्ध करना मुश्किल है और YAC वेक्टर सिस्टम बनाने के लिए उच्च सांद्रता की आवश्यकता होती है। | बीएसी को शुद्ध करना आसान है और इसे आसानी से बनाया जा सकता है। |
| चिमरवाद | |
| YAC अक्सर काइमरिक होते हैं। | बीएसी शायद ही कभी काइमरिक होते हैं। |
| स्थिरता | |
| YAC अस्थिर है। | बीएसी स्थिर है। |
| संशोधन | |
| यीस्ट पुनर्संयोजन बहुत संभव है और हमेशा सक्रिय रहता है। इसलिए यह YAC में विलोपन और अन्य पुनर्व्यवस्था उत्पन्न कर सकता है। | ई. कोलाई पुनर्संयोजन को रोका जाता है और आवश्यकता पड़ने पर चालू किया जाता है। इसलिए, यह बीएसी में अवांछित पुनर्व्यवस्था को कम करता है। |
| रखरखाव | |
| पुनः संयोजक YACs में हेरफेर करने के लिए आमतौर पर YAC को बाद में हेरफेर के लिए E. कोलाई में स्थानांतरित करने की आवश्यकता होती है। इसलिए, यह एक श्रमसाध्य प्रक्रिया है। | बीएसी संशोधन सीधे ई. कोलाई में होता है। इसलिए डीएनए ट्रांसफर की कोई जरूरत नहीं है। इसलिए, प्रक्रिया श्रमसाध्य नहीं है। |
सारांश - वाईएसी बनाम बीएसी वैक्टर
YAC डीएनए के बड़े टुकड़ों को मेजबान जीव में क्लोन करने की क्षमता के कारण क्लोनिंग प्रक्रियाओं में एक आवश्यक शोध उपकरण बन गया है। हालाँकि, YAC के कई नुकसान हैं जैसे कि निर्माण कठिनाइयाँ, चिमरवाद, अस्थिरता आदि। इसलिए इन समस्याओं को दूर करने के लिए, वैज्ञानिकों ने BAC वैक्टर विकसित किए हैं। बीएसी का निर्माण ई. कोलाई क्रोमोसोम के विशिष्ट क्षेत्रों का उपयोग करके किया गया है। यह एक स्थिर वेक्टर है और इसे आसानी से बनाया जा सकता है। हालाँकि, डीएनए की लंबाई जिसे बीएसी संभाल सकता है, वाईएसी की तुलना में 20 गुना कम है। यह YAC और BAC वेक्टर सिस्टम के बीच का अंतर है। आजकल, प्रयोगशालाओं में YAC की तुलना में BAC को अधिक पसंद किया जाता है।
