agarose और polyacrylamide gel वैद्युतकणसंचलन के बीच मुख्य अंतर यह है कि agarose gel वैद्युतकणसंचलन डीएनए के तुलनात्मक रूप से बड़े टुकड़ों को अलग करने के लिए क्षैतिज रूप से डाला गया agarose जैल का उपयोग करता है, जबकि polyacrylamide gel वैद्युतकणसंचलन छोटे न्यूक्लिक एसिड के टुकड़ों को अलग करने के लिए लंबवत रूप से डाले गए पॉलीएक्रिलामाइड जैल का उपयोग करता है।
वैद्युतकणसंचलन एक प्रकार की तकनीक है जो डीएनए, आरएनए और प्रोटीन जैसे जैव-अणुओं को अलग करने के लिए एक जेल मैट्रिक्स में लागू विद्युत क्षेत्र का उपयोग करती है। वैद्युतकणसंचलन के माध्यम से डीएनए, आरएनए और प्रोटीन जैसे जैव-अणुओं का यह पृथक्करण आवेश और आकार पर आधारित होता है।नमूने जेल के कुओं में लोड किए जाते हैं। बाद में, विद्युत क्षेत्र को पूरे जेल में लागू किया जाता है। यह क्षेत्र ऋणावेशित अणुओं को धनात्मक इलेक्ट्रोड की ओर ले जाने का कारण बनता है। जेल मैट्रिक्स एक आणविक चलनी के रूप में कार्य करता है जिसके माध्यम से सबसे छोटे अणु तेजी से गुजरते हैं या यात्रा करते हैं जबकि बड़े अणु धीरे-धीरे चलते हैं। यह आवेश और आकार के आधार पर अणुओं को अलग करने में सक्षम बनाता है। इसलिए, agarose और polyacrylamide gel वैद्युतकणसंचलन दो प्रकार की जेल वैद्युतकणसंचलन तकनीकें हैं जो मुख्य रूप से अणुओं को उनके आकार और आवेश के आधार पर अलग करने में मदद करती हैं।
एग्रोसे जेल वैद्युतकणसंचलन क्या है?
एग्रोसे जेल वैद्युतकणसंचलन एक ऐसी तकनीक है जो डीएनए और आरएनए जैसे जैव-अणुओं को अलग करने के लिए agarose जैल का उपयोग करती है। यह मुख्य रूप से आकार के आधार पर न्यूक्लिक एसिड को अलग करने के लिए इस्तेमाल की जाने वाली तकनीक है। इस तकनीक में इस्तेमाल किया जाने वाला मुख्य यौगिक agarose एक पॉलीसेकेराइड है। यह समुद्री शैवाल से आता है। Agarose को उबलते बफर में भंग किया जा सकता है और फिर एक ट्रे में डाला जा सकता है जिसे क्षैतिज रूप से रखा जाता है।ट्रे में, यह ठंडा होने पर एक स्लैब बनाने के लिए जम जाता है। Agarose जैल को कुएं बनाने के लिए एक कंघी के साथ डाला जाता है जिसमें जेल के जमने के बाद डीएनए या आरएनए जैसे न्यूक्लिक एसिड लोड हो जाते हैं।
चित्र 01: अगारोस जेल वैद्युतकणसंचलन
जेल को बाद में एक उपयुक्त बफर में डुबोया जाता है, और पूरे जेल में करंट लगाया जाता है। डीएनए में एक समान ऋणात्मक आवेश होता है जो अणु की अनुक्रम संरचना से स्वतंत्र होता है। इसलिए, डीएनए अणु कैथोड (-) से एनोड (+) की ओर पलायन करेंगे। प्रवास की दर सीधे अणु के आकार पर निर्भर करती है। सबसे बड़े मैक्रोमोलेक्यूल्स में जेल के माध्यम से नेविगेट करने में सबसे कठिन समय होता है। दूसरी ओर, छोटे मैक्रोमोलेक्यूल्स तेजी से और काफी आसानी से जेल से फिसल जाते हैं।
पॉलीएक्रिलामाइड जेल वैद्युतकणसंचलन क्या है?
पॉलीएक्रिलामाइड जेल वैद्युतकणसंचलन (पेज) एक ऐसी तकनीक है जो बायोमोलेक्यूलस को अलग करने के लिए पॉलीएक्रिलामाइड जैल का उपयोग करती है। यह एक ऐसी तकनीक है जिसका व्यापक रूप से जैविक मैक्रोमोलेक्यूल्स, आमतौर पर प्रोटीन और न्यूक्लिक एसिड को उनकी इलेक्ट्रोफोरेटिक गतिशीलता के अनुसार अलग करने के लिए उपयोग किया जाता है। एक्रिलोनिट्राइल के जलयोजन के परिणामस्वरूप नाइट्राइल हाइड्रैटेज़ द्वारा एक्रिलामाइड अणुओं का निर्माण होता है। एक्रिलामाइड पानी में घुलनशील है, और फ्री रेडिकल सर्जक के अलावा, एक्रिलामाइड पोलीमराइज़ करता है, जिसके परिणामस्वरूप पॉलीएक्रिलामाइड जेल बनता है। आम तौर पर, एक्रिलामाइड की बढ़ी हुई सांद्रता के परिणामस्वरूप जेल में छिद्रों का आकार कम हो जाता है। Polyacrylamide जैल agarose जैल के विपरीत लंबवत रूप से डाला जाता है।
चित्र 02: पॉलीएक्रिलामाइड जेल वैद्युतकणसंचलन
पॉलीएक्रिलामाइड जेल वैद्युतकणसंचलन में, अणु अपनी मूल अवस्था में चल सकते हैं, अणुओं की उच्च-क्रम संरचना को संरक्षित करते हुए। इस विधि को नेटिव पेज कहा जाता है। वैकल्पिक रूप से, उच्च-क्रम संरचना को हटाने और अणु को एक असंरचित अणु में बदलने के लिए एक रासायनिक denaturant भी जोड़ा जा सकता है जिसकी गतिशीलता केवल इसकी लंबाई पर निर्भर करती है। इस प्रकार को एसडीएस-पेज कहा जाता है।
एग्रोसे और पॉलीएक्रिलामाइड जेल वैद्युतकणसंचलन के बीच समानताएं क्या हैं?
- एग्रोसे और पॉलीएक्रिलामाइड जेल वैद्युतकणसंचलन दो प्रकार की जेल वैद्युतकणसंचलन तकनीकें हैं।
- वास्तव में, वे आणविक जैविक तकनीक हैं।
- दोनों तकनीकों का उपयोग डीएनए और प्रोटीन जैसे जैविक मैक्रोमोलेक्यूल्स का पता लगाने के लिए किया जाता है।
- इन तकनीकों को कुशल तकनीशियनों या शोधकर्ताओं द्वारा किया जाता है।
- दोनों तकनीकों में, मैक्रोमोलेक्यूल्स का पृथक्करण आवेश और आकार पर आधारित होता है।
- दोनों तकनीकें डीएनए और आरएनए जैसे न्यूक्लिक एसिड को अलग करने की अनुमति देती हैं।
एग्रोसे और पॉलीएक्रिलामाइड जेल वैद्युतकणसंचलन के बीच अंतर क्या है?
Agarose gel वैद्युतकणसंचलन एक ऐसी तकनीक है जो जैव-अणुओं को अलग करने के लिए क्षैतिज रूप से डाले गए agarose जैल का उपयोग करती है, जबकि पॉलीएक्रिलामाइड जेल वैद्युतकणसंचलन एक ऐसी तकनीक है जो जैव-अणुओं को अलग करने के लिए लंबवत रूप से डाले गए पॉलीएक्रिलामाइड जैल का उपयोग करती है। यह agarose और polyacrylamide gel वैद्युतकणसंचलन के बीच महत्वपूर्ण अंतर है। इसके अलावा, agarose gel वैद्युतकणसंचलन का उपयोग DNA और RNA के पृथक्करण के लिए किया जाता है, जबकि polyacrylamide gel वैद्युतकणसंचलन का उपयोग DNA, RNA, या प्रोटीन जैसे न्यूक्लिक एसिड के पृथक्करण के लिए किया जाता है।
निम्न तालिका agarose और polyacrylamide gel वैद्युतकणसंचलन के बीच अंतर को सारांशित करती है।
सारांश - अगारोस बनाम पॉलीएक्रिलामाइड जेल वैद्युतकणसंचलन
Agarose और polyacrylamide gel वैद्युतकणसंचलन आणविक जीव विज्ञान प्रयोगशालाओं में उपयोग की जाने वाली दो प्रकार की जेल वैद्युतकणसंचलन तकनीकें हैं।Agarose gel वैद्युतकणसंचलन जैव-अणुओं को अलग करने के लिए agarose gel का उपयोग करता है। Agarose आम तौर पर मनुष्यों के लिए जहरीला नहीं है, जबकि polyacrylamide मनुष्यों के लिए जहरीला है। इसके अलावा, agarose gel वैद्युतकणसंचलन एक कम रिज़ॉल्यूशन दिखाता है जबकि पॉलीएक्रिलामाइड जेल वैद्युतकणसंचलन अधिक रिज़ॉल्यूशन दिखाता है। Polyacrylamide gel वैद्युतकणसंचलन जैव-अणुओं को अलग करने के लिए एक पॉलीक्रिलामाइड जेल का उपयोग करता है। यह agarose और polyacrylamide gel वैद्युतकणसंचलन के बीच अंतर को सारांशित करता है
