मुख्य अंतर - केशिका वैद्युतकणसंचलन बनाम जेल वैद्युतकणसंचलन
वैद्युतकणसंचलन एक ऐसी तकनीक है जिसका उपयोग कण आवेश, कण आकार और कण आकार के आधार पर जैव-अणुओं को अलग करने के लिए किया जाता है। अणु का प्रवास, जिसे इलेक्ट्रोफोरेटिक गतिशीलता के रूप में जाना जाता है, उपयोग किए गए बहुलक/जेल के प्रकार, इसके छिद्र आकार, प्रदान किए गए वोल्टेज, चलने का समय और सतह से आयतन अनुपात पर निर्भर करता है। उपयोग किए जाने वाले बायोमोलेक्यूल के प्रकार के आधार पर विभिन्न प्रकार की वैद्युतकणसंचलन तकनीकें हैं। पहले प्रकार के वैद्युतकणसंचलन का आविष्कार कागज वैद्युतकणसंचलन था जहां एक नाइट्रोसेल्यूलोज पेपर का उपयोग बायोमोलेक्यूल्स को अलग करने के लिए माध्यम के रूप में किया जाता था।जेल वैद्युतकणसंचलन का सिद्धांत जहां बायोमोलेक्यूल्स को अलग करने के लिए विभिन्न छिद्र आकार के जैल का उपयोग किया जाता था, बाद में आविष्कार किया गया था। जेल वैद्युतकणसंचलन तकनीक को तकनीक की सटीकता में सुधार के लिए और संशोधित किया गया था, और ऐसा ही एक संशोधन केशिका वैद्युतकणसंचलन है। केशिका वैद्युतकणसंचलन और जेल वैद्युतकणसंचलन के बीच महत्वपूर्ण अंतर यह है कि जेल वैद्युतकणसंचलन एक ऊर्ध्वाधर या क्षैतिज विमान में मानक छिद्र आकार के बहुलक जेल का उपयोग करके किया जाता है जबकि केशिका वैद्युतकणसंचलन एक बहुलक तरल या जेल के साथ केशिका ट्यूब में किया जाता है।
जेल वैद्युतकणसंचलन क्या है?
जेल वैद्युतकणसंचलन एक तकनीक है जिसका उपयोग मुख्य रूप से न्यूक्लिक एसिड, प्रोटीन या अमीनो एसिड को उसके आवेश, आकार और आकार के आधार पर अलग करने के लिए किया जाता है। यह तकनीक एक भौतिक जेल का उपयोग करती है, जो एक बहुलक पदार्थ है, पृथक्करण माध्यम के रूप में। सबसे अधिक उपयोग किए जाने वाले जैल एग्रोसे (न्यूक्लिक एसिड पृथक्करण के लिए) और पॉलीएक्रिलामाइड (प्रोटीन पृथक्करण के लिए) हैं। जेल इलेक्ट्रोफोरेटिक उपकरण में जेल तैयार करने के लिए जेल कास्टिंग ट्रे, कुओं, बफर टैंक, इलेक्ट्रोड - सकारात्मक (एनोड) और नकारात्मक (कैथोड) और वोल्टेज आपूर्ति इकाई तैयार करने के लिए कंघी कास्टिंग होती है।डीएनए या आरएनए जैसे अणु, जो नकारात्मक रूप से चार्ज होते हैं, कैथोड से एनोड में चले जाते हैं और अणु जो सकारात्मक रूप से चार्ज होते हैं, इसके विपरीत चलते हैं। जेल की तैयारी आवश्यकता के अनुसार की जाती है। यदि अणुओं के उच्च विभेदन या पृथक्करण की आवश्यकता होती है, तो कम ताकना आकार वाला उच्च सांद्रता वाला जेल तैयार किया जाना चाहिए। जेल मैट्रिक्स पर अलग किए गए अणुओं को एक धुंधला तकनीक के बाद देखा जाता है। पृथक अणु जेल मैट्रिक्स पर बैंड के रूप में दिखाई देते हैं।
चित्रा 01: जेल वैद्युतकणसंचलन
जेल वैद्युतकणसंचलन का उपयोग आणविक निदान में किया जाता है जैसे डीएनए फिंगरप्रिंटिंग एक विशेष डीएनए / आरएनए टुकड़े या एक प्रोटीन की उपस्थिति का निर्धारण करने के लिए। जेल वैद्युतकणसंचलन भी निकाले गए बायोमोलेक्यूल नमूने की शुद्धता निर्धारित करता है।जेल वैद्युतकणसंचलन में और संकरण के लिए प्रारंभिक चरण के रूप में और अनुक्रमण के बाद एक पुष्टिकरण विश्लेषण के रूप में किया जाता है।
केशिका वैद्युतकणसंचलन क्या है?
केशिका वैद्युतकणसंचलन जेल वैद्युतकणसंचलन का एक संशोधन है जो आवेश, अणु के आकार के आधार पर पृथक्करण के समान सिद्धांत का उपयोग करता है, लेकिन एक केशिका ट्यूब में या तो एक जेल पदार्थ या एक तरल बहुलक के साथ किया जाता है। केशिकाएं फ्यूज्ड सिलिका से तैयार की जाती हैं, और प्रत्येक केशिका ट्यूब का आंतरिक व्यास 50-100μm होता है और लंबाई 25-100cm होती है। नमूनों को बहुलक सामग्री युक्त केशिका ट्यूब में अंतःक्षिप्त किया जाता है और पारंपरिक जेल वैद्युतकणसंचलन की तुलना में बहुत तेजी से अलग किया जाता है। केशिका प्रणाली एक इन्सुलेटर जैकेट के अंदर अच्छी तरह से सुरक्षित है जो नमूने को किसी भी संदूषण से बचाता है। केशिकाओं को तरल पॉलिमर जैसे हाइड्रॉक्सीएथाइल सेलुलोज या उच्च-रिज़ॉल्यूशन जैल जैसे पॉलीएक्रिलामाइड से भरा जा सकता है। केशिका वैद्युतकणसंचलन अधिक संकल्प प्रदान करता है; इसलिए अलगाव अधिक सटीक है।केशिका वैद्युतकणसंचलन स्पेक्ट्रोफोटोमेट्रिक विश्लेषण के माध्यम से एक स्वचालित डिटेक्टर सिस्टम का उपयोग करता है। यह उच्च सतह क्षेत्र और आयतन अनुपात के कारण है।
चित्रा 02: केशिका वैद्युतकणसंचलन
केशिका वैद्युतकणसंचलन का उपयोग फोरेंसिक जैसी स्थितियों में किया जाता है जहां उच्च सटीकता की आवश्यकता होती है और आमतौर पर इसका उपयोग नहीं किया जाता है क्योंकि यह महंगी तकनीक है।
केशिका वैद्युतकणसंचलन और जेल वैद्युतकणसंचलन के बीच समानताएं क्या हैं?
- दोनों तकनीकों में अणुओं का पृथक्करण अणु के आवेश और आकार पर आधारित होता है।
- दोनों तकनीकों का उपयोग न्यूक्लिक एसिड और प्रोटीन दोनों को अलग करने के लिए किया जा सकता है।
- दोनों तकनीकों का नमूना आयतन समान है।
- दोनों तकनीकों में अलगाव की सुविधा के लिए बफर का उपयोग किया जाता है।
केशिका वैद्युतकणसंचलन और जेल वैद्युतकणसंचलन के बीच अंतर क्या है?
केशिका वैद्युतकणसंचलन बनाम जेल वैद्युतकणसंचलन |
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| केशिका वैद्युतकणसंचलन एक ऐसी तकनीक है जो एक तरल या जेल बहुलक माध्यम का उपयोग करके एक केशिका ट्यूब पर जैव-अणुओं को अलग करती है। | जेल वैद्युतकणसंचलन एक ऐसी तकनीक है जो एक बहुलक जेल माध्यम का उपयोग करके एक ऊर्ध्वाधर या क्षैतिज तल पर जैव-अणुओं को अलग करती है। |
| अलग करना | |
| केशिका वैद्युतकणसंचलन में, एक केशिका ट्यूब के अंदर पृथक्करण किया जाता है। | जेल वैद्युतकणसंचलन में, पृथक्करण एक ऊर्ध्वाधर या क्षैतिज तल पर किया जाता है। |
| अलग करने का माध्यम | |
| हाइड्रॉक्सीएथाइलसेलुलोज जैसे तरल बहुलक केशिका वैद्युतकणसंचलन में उपयोग किए जाते हैं। | जैल, या तो agarose या polyacrylamide, जेल वैद्युतकणसंचलन में एक माध्यम के रूप में उपयोग किया जाता है। |
| क्रॉस लिंकेज | |
| केशिका वैद्युतकणसंचलन से उच्च संकल्प प्राप्त किया जा सकता है। | जेल वैद्युतकणसंचलन में संकल्प कम है। |
| सतह क्षेत्र से आयतन अनुपात | |
| केशिका वैद्युतकणसंचलन में सतह से आयतन अनुपात अधिक होता है। | जेल वैद्युतकणसंचलन में सतह से आयतन अनुपात कम होता है। |
| पहचान तकनीक | |
| केशिका वैद्युतकणसंचलन में स्पेक्ट्रोफोटोमेट्रिक स्वचालित डिटेक्टरों के माध्यम से पता लगाया जाता है। | यूवी ट्रांसिल्यूमिनेटर के माध्यम से धुंधला हो जाना और निरीक्षण करना जेल वैद्युतकणसंचलन में पता लगाने की तकनीक के रूप में किया जाता है। |
सारांश - केशिका वैद्युतकणसंचलन बनाम जेल वैद्युतकणसंचलन
आणविक निदान वैज्ञानिक दुनिया में एक प्रमुख भूमिका निभाता है। डीएनए, आरएनए और प्रोटीन की पहचान और शुद्धिकरण नैदानिक प्रक्रियाओं में महत्वपूर्ण कदम हैं। वैद्युतकणसंचलन एक ऐसी तकनीक है जो जेल वैद्युतकणसंचलन और बहुत उन्नत केशिका जेल वैद्युतकणसंचलन दोनों में बायोमोलेक्यूल्स को अलग और पहचानती है। जेल वैद्युतकणसंचलन मानक छिद्र आकार के एक बहुलक जेल का उपयोग करके एक ऊर्ध्वाधर या क्षैतिज विमान में किया जाता है जबकि केशिका वैद्युतकणसंचलन एक बहुलक तरल या एक जेल के साथ एक केशिका ट्यूब में किया जाता है। यह केशिका वैद्युतकणसंचलन और जेल वैद्युतकणसंचलन के बीच का अंतर है। वैद्युतकणसंचलन तकनीक के पूरा होने पर, जैव-अणुओं को संकरण के माध्यम से या फ़िंगरप्रिंटिंग जैसी तकनीकों के माध्यम से उच्च स्तर की जानकारी प्राप्त करने के लिए संसाधित किया जाता है।
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