मुख्य अंतर - जेल वैद्युतकणसंचलन बनाम एसडीएस पृष्ठ
जेल वैद्युतकणसंचलन एक ऐसी तकनीक है जो एक विद्युत क्षेत्र में मैक्रोमोलेक्यूल्स को अलग करती है। आणविक आकार के अनुसार मिश्रण से डीएनए, आरएनए और प्रोटीन को अलग करने के लिए आणविक जीव विज्ञान में यह एक सामान्य तरीका है। एसडीएस पेज एक प्रकार का जेल वैद्युतकणसंचलन है जिसका उपयोग प्रोटीन को उनके आकार के आधार पर प्रोटीन मिश्रण से अलग करने के लिए किया जाता है। जेल वैद्युतकणसंचलन एक शब्द है जिसका उपयोग डीएनए, आरएनए और प्रोटीन पृथक्करण के लिए लागू सामान्य तकनीक को संदर्भित करने के लिए किया जाता है जबकि एसडीएस पृष्ठ एक प्रकार का जेल वैद्युतकणसंचलन है। यह जेल वैद्युतकणसंचलन और एसडीएस पृष्ठ के बीच महत्वपूर्ण अंतर है।
जेल वैद्युतकणसंचलन क्या है?
जेल वैद्युतकणसंचलन एक सामान्य तकनीक है जिसका उपयोग प्रयोगशालाओं में आवेशित अणुओं जैसे डीएनए, आरएनए, प्रोटीन आदि को उनके मिश्रण से अलग करने के लिए किया जाता है। जेल वैद्युतकणसंचलन में एक जेल का उपयोग किया जाता है। यह एक आणविक चलनी के रूप में कार्य करता है। जेल वैद्युतकणसंचलन में दो प्रकार के जैल का उपयोग किया जाता है, अर्थात् agarose और polyacrylamide। जेल वैद्युतकणसंचलन में विचार करने के लिए जेल और जेल की तैयारी का चयन महत्वपूर्ण कारक हैं क्योंकि जेल वैद्युतकणसंचलन के माध्यम से अणुओं के अच्छे पृथक्करण के लिए जेल के छिद्र आकार को सावधानीपूर्वक हेरफेर किया जाना चाहिए। जेल वैद्युतकणसंचलन में जेल के दो सिरों से जुड़ा एक विद्युत क्षेत्र होता है। जेल का एक सिरा धनात्मक आवेश दिखाता है जबकि दूसरा सिरा ऋणात्मक रूप से आवेशित होता है।
डीएनए और आरएनए ऋणात्मक रूप से आवेशित अणु हैं। एक बार जब वे जेल के नकारात्मक छोर से जेल में लोड हो जाते हैं और विद्युत क्षेत्र में लागू हो जाते हैं, तो वे जेल छिद्रों के माध्यम से जेल के सकारात्मक रूप से चार्ज किए गए छोर की ओर पलायन करते हैं।प्रवास की गति आवेश और अणु के आकार पर निर्भर करती है। बड़े अणुओं की तुलना में छोटे अणु आसानी से जेल के छिद्रों से पलायन कर जाते हैं। इसलिए, छोटे अणु जेल के माध्यम से लंबी दूरी तय करते हैं और बड़े अणु कम दूरी की यात्रा करते हैं। जेल पर अणुओं की यात्रा का निरीक्षण करने के लिए, विशेष प्रकार के रंगों का उपयोग किया जाता है। विद्युत क्षेत्र को एक निश्चित समय अवधि के लिए लागू किया जाता है और अणुओं के नुकसान को रोकने और अणुओं को उनकी यात्रा की स्थिति में रखने के लिए रोक दिया जाता है। जेल में विभिन्न बैंड देखे जा सकते हैं। ये बैंड विभिन्न आकारों के अणुओं का प्रतिनिधित्व करते हैं। इसलिए, जेल वैद्युतकणसंचलन अणुओं को उनके आकार के अनुसार अलग करने के लिए उपयोगी है।
जेल वैद्युतकणसंचलन को आणविक जीव विज्ञान में एक प्रारंभिक तकनीक के रूप में शामिल किया गया है जैसे कि पीसीआर, आरएफएलपी, क्लोनिंग, डीएनए अनुक्रमण, दक्षिणी सोख्ता, जीनोम मैपिंग, आदि।
चित्र 01: अगारोज जेल वैद्युतकणसंचलन
एसडीएस पेज क्या है?
सोडियम डोडेसिल सल्फेट पॉलीएक्रिलामाइड जेल वैद्युतकणसंचलन (एसडीएस पेज) एक प्रकार का जेल वैद्युतकणसंचलन है जिसका उपयोग प्रोटीन को अलग करने के लिए किया जाता है। जब प्रोटीन को अलग करने के लिए जेल वैद्युतकणसंचलन का उपयोग किया जाता है, तो विशेष उपचार की आवश्यकता होती है क्योंकि प्रोटीन डीएनए और आरएनए की तरह नकारात्मक रूप से चार्ज नहीं होते हैं और सकारात्मक अंत या नकारात्मक छोर की ओर पलायन नहीं करते हैं। इसलिए, जेल वैद्युतकणसंचलन से पहले प्रोटीन को विकृत किया जाता है और एक नकारात्मक चार्ज के साथ लेपित किया जाता है। यह सोडियम डोडेसिल सल्फेट (एसडीएस) नामक डिटर्जेंट का उपयोग करके किया जाता है। जेल वैद्युतकणसंचलन जो सहायक माध्यम के लिए एसडीएस और एक पॉलीएक्रिलामाइड जेल का उपयोग करता है उसे एसडीएस पेज के रूप में जाना जाता है। इस तकनीक का प्रयोग आमतौर पर जैव रसायन, आनुवंशिकी, फोरेंसिक और आणविक जीव विज्ञान में किया जाता है।
एसडीएस पेज के दौरान, एसडीएस के साथ प्रोटीन मिलाया जाता है। एसडीएस प्रोटीन को एक रैखिक आकार में प्रकट करता है और उन पर उनके आणविक द्रव्यमान के समानुपाती ऋणात्मक आवेश के साथ कोट करता है।ऋणात्मक आवेश के कारण, प्रोटीन अणु जेल के धनात्मक आवेश सिरे की ओर पलायन करते हैं और अपने आणविक द्रव्यमान के अनुसार अलग हो जाते हैं। एसडीएस पेज में, जेल के लिए ठोस समर्थन के रूप में पॉलीएक्रिलामाइड का उपयोग किया जाता है। प्रोटीन का वास्तविक पृथक्करण मुख्य रूप से जेल के गुणों पर निर्भर करता है। इसलिए, पॉलीएक्रिलामाइड जेल की तैयारी सावधानी से की जानी चाहिए और पॉलीएक्रिलामाइड की सही सांद्रता का उपयोग किया जाना चाहिए। Polyacrylamide जैल agarose जैल की तुलना में उच्च रिज़ॉल्यूशन दिखाते हैं। इसलिए, एसडीएस पेज को प्रोटीन पृथक्करण के लिए एक उच्च-रिज़ॉल्यूशन तकनीक माना जाता है।
एसडीएस पेज जेल वैद्युतकणसंचलन को विकृत करने का एक प्रकार है। प्रोटीन विश्लेषण में इसकी एक प्रमुख सीमा है। चूंकि एसडीएस अलग होने से पहले प्रोटीन का खंडन करता है, यह एंजाइमी गतिविधि, प्रोटीन बाइंडिंग इंटरैक्शन, प्रोटीन कॉफ़ैक्टर्स आदि का पता लगाने की अनुमति नहीं देता है।
चित्र 02: एसडीएस पृष्ठ
जेल वैद्युतकणसंचलन और एसडीएस पेज में क्या अंतर है?
जेल वैद्युतकणसंचलन बनाम एसडीएस पृष्ठ |
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| जेल वैद्युतकणसंचलन एक विद्युत क्षेत्र का उपयोग करके मैक्रोमोलेक्यूल्स को अलग करने के लिए की जाने वाली एक विधि है। | एसडीएस पेज एक उच्च-रिज़ॉल्यूशन जेल वैद्युतकणसंचलन तकनीक है जिसका उपयोग प्रोटीन को उनके द्रव्यमान के आधार पर अलग करने के लिए किया जाता है। |
| जेल रन | |
| इसे क्षैतिज या लंबवत तरीके से किया जा सकता है। | एसडीएस पेज हमेशा लंबवत चलता है। |
| अलग होने का आधार | |
| अलगाव आवेश और आकार के अनुसार होता है। | प्रोटीन पृथक्करण द्रव्यमान और आवेश के अनुसार होता है। |
| संकल्प | |
| Agarose gel वैद्युतकणसंचलन का रिज़ॉल्यूशन कम होता है और पॉलीएक्रिलामाइड जेल वैद्युतकणसंचलन का रिज़ॉल्यूशन अधिक होता है | एसडीएस पृष्ठ का बेहतर समाधान है। |
| विकृतीकरण | |
| जेल वैद्युतकणसंचलन में विकृतीकरण और गैर विकृतीकरण तकनीक दोनों शामिल हैं। | एसडीएस पेज अलग होने से पहले प्रोटीन का खंडन करता है। |
सारांश - जेल वैद्युतकणसंचलन बनाम एसडीएस पृष्ठ
जेल वैद्युतकणसंचलन एक सामान्य तकनीक है जिसका उपयोग डीएनए, आरएनए और प्रोटीन के आकार और आवेश के आधार पर पृथक्करण और विश्लेषण के लिए किया जाता है। जेल वैद्युतकणसंचलन के दो मुख्य प्रकार हैं, अर्थात् agarose gel वैद्युतकणसंचलन और पॉलीएक्रिलामाइड जेल वैद्युतकणसंचलन। Agarose जैल मुख्य रूप से न्यूक्लिक एसिड पृथक्करण के लिए उपयोग किया जाता है; जब उच्च रिज़ॉल्यूशन की आवश्यकता होती है, तो पॉलीएक्रिलामाइड जैल का उपयोग किया जाता है।एसडीएस पेज एक प्रकार का जेल वैद्युतकणसंचलन है जो आमतौर पर प्रोटीन के जटिल मिश्रण को अलग करने के लिए उपयोग किया जाता है। इसे एक उच्च-रिज़ॉल्यूशन प्रोटीन पृथक्करण तकनीक माना जाता है। जेल वैद्युतकणसंचलन और एसडीएस पृष्ठ के बीच यही अंतर है।
