मुख्य अंतर - क्षैतिज बनाम लंबवत जेल वैद्युतकणसंचलन
जेल वैद्युतकणसंचलन एक प्रयोगशाला तकनीक है जिसका उपयोग आनुवंशिकी में डीएनए, आरएनए और अन्य प्रोटीन युक्त मिश्रणों को उनके संबंधित आवेश और आणविक आकार के अनुसार अलग करने के लिए किया जाता है। डीएनए, आरएनए या प्रोटीन जिन्हें इस विधि में अलग करने की आवश्यकता होती है, एक जेल के माध्यम से चलाए जाते हैं जिसमें छोटे छिद्र होते हैं। अणु एक विद्युत क्षेत्र द्वारा जेल के माध्यम से संचालित होते हैं। अणु जेल के छिद्रों से गुजरते हैं, और गति की गति उनकी संबंधित लंबाई के व्युत्क्रमानुपाती होती है। इसलिए, कम आणविक आकार वाले अणु उच्च आणविक भार वाले अणुओं की तुलना में तेजी से आगे बढ़ेंगे।विद्युत क्षेत्र जेल के दो सिरों पर प्रभारी अंतर से उत्पन्न होता है। एक सिरे पर धनात्मक आवेश होता है और दूसरे सिरे पर ऋणात्मक आवेश होता है। चूंकि डीएनए और आरएनए अणु ऋणात्मक रूप से आवेशित होते हैं, इसलिए वे जेल के धनावेशित सिरे की ओर आकर्षित होंगे। जेल वैद्युतकणसंचलन दो अलग-अलग तरीकों से हो सकता है: क्षैतिज जेल वैद्युतकणसंचलन और ऊर्ध्वाधर जेल वैद्युतकणसंचलन। क्षैतिज जेल वैद्युतकणसंचलन में, जेल एक क्षैतिज अभिविन्यास में मौजूद होता है और एक निरंतर चलने वाले बफर में डूबा होता है जो जेल बॉक्स के अंदर ही मौजूद होता है। ऊर्ध्वाधर जेल वैद्युतकणसंचलन में, बफर सिस्टम लंबवत रूप से उन्मुख होता है और क्रमशः एक कैथोड और एक एनोड के साथ ऊपर और नीचे दो कक्षों के साथ बंद होता है। यह क्षैतिज और ऊर्ध्वाधर जेल वैद्युतकणसंचलन के बीच महत्वपूर्ण अंतर है।
क्षैतिज जेल वैद्युतकणसंचलन क्या है?
क्षैतिज जेल वैद्युतकणसंचलन डीएनए, आरएनए या प्रोटीन अणुओं को उनके संबंधित आणविक आकार और आवेश के अनुसार अलग करने के लिए मूल सिद्धांत का उपयोग करता है।इस तकनीक में, जेल एक क्षैतिज अभिविन्यास में मौजूद होता है और एक बफर में डूबा होता है जो निरंतर होता है। जेल बॉक्स को दो डिब्बों में अलग करने के लिए Agarose gel का उपयोग किया जाता है। जेल बॉक्स के एक सिरे में एनोड होता है जबकि दूसरे सिरे में कैथोड होता है। जब एक करंट लगाया जाता है, तो इस तकनीक में इस्तेमाल किया जाने वाला बफर चार्ज ग्रेडिएंट के निर्माण की अनुमति देता है। जब चार्ज लगाया जाता है, तो जेल गर्म हो जाता है। बफर शीतलक के रूप में भी कार्य करता है, जो तापमान को इष्टतम स्तर पर बनाए रखता है। चल रहे बफर का पुनरावर्तन पीएच ग्रेडिएंट के गठन को रोकता है। क्षैतिज जेल वैद्युतकणसंचलन में एक असंतत बफर सिस्टम का उपयोग नहीं किया जा सकता है क्योंकि जेल सिस्टम के दो डिब्बे रनिंग बफर से जुड़ जाते हैं। प्रोटीन मिश्रण को अलग करने के लिए जेल वैद्युतकणसंचलन के दौरान एक्रिलामाइड का उपयोग किया जाता है।
चित्रा 01: क्षैतिज जेल वैद्युतकणसंचलन
क्षैतिज जेल वैद्युतकणसंचलन में, एक्रिलामाइड का उपयोग नहीं किया जा सकता है क्योंकि जेल बॉक्स ऑक्सीजन के संपर्क में है। ऑक्सीजन की उपस्थिति के कारण, एक्रिलामाइड का पोलीमराइजेशन बाधित होता है, और यह जेल के निर्माण में बाधा डालता है। क्षैतिज जेल वैद्युतकणसंचलन एक सरल विधि है जिसका उपयोग डीएनए और आरएनए को अलग करने में किया जाता है।
ऊर्ध्वाधर जेल वैद्युतकणसंचलन क्या है?
ऊर्ध्वाधर जेल वैद्युतकणसंचलन तकनीक जेल वैद्युतकणसंचलन के प्राथमिक सिद्धांत के अनुसार कार्य करती है, लेकिन इसे क्षैतिज जेल वैद्युतकणसंचलन विधि की तुलना में अधिक जटिल माना जाता है। यह तकनीक एक असंतत बफर का उपयोग करती है। एक कैथोड शीर्ष कक्ष में स्थित होता है, और एनोड निचले कक्ष में स्थित होता है। प्रत्येक डिब्बे में मौजूद इलेक्ट्रोड आवश्यक विद्युत क्षेत्र प्रदान करते हैं। दो घुड़सवार कांच की प्लेटों के बीच जेल की एक पतली परत डाली जाती है। इसलिए, जेल का शीर्ष भाग शीर्ष कक्ष में डूबा हुआ है, और जेल का निचला भाग नीचे के कक्ष में डूबा हुआ है।एक बार करंट लगाने के बाद, बफर का एक छोटा हिस्सा जेल के माध्यम से शीर्ष कक्ष से नीचे के कक्ष में चला जाता है। इस तकनीक में प्रयुक्त धारा मिनट इकाई की होती है।
चित्र 02: कार्यक्षेत्र जेल वैद्युतकणसंचलन
ऊर्ध्वाधर जेल वैद्युतकणसंचलन में, बफर केवल जेल के माध्यम से बहता है। यह पृथक्करण चरण के दौरान वोल्टेज के ढाल के सटीक नियंत्रण की अनुमति देता है। एक्रिलामाइड जेल का उपयोग किया जा सकता है क्योंकि डिब्बे वायुमंडलीय ऑक्सीजन के संपर्क में नहीं आते हैं। एक्रिलामाइड जेल के छोटे छिद्रों के आकार के कारण, उच्च रिज़ॉल्यूशन के साथ सटीक पृथक्करण प्राप्त किया जा सकता है।
क्षैतिज और लंबवत जेल वैद्युतकणसंचलन के बीच समानताएं क्या हैं?
- दोनों प्रणालियां जेल वैद्युतकणसंचलन के मूल सिद्धांत के अनुसार कार्य करती हैं।
- दोनों प्रणालियों में आवश्यक विद्युत क्षेत्र प्रदान करने के लिए एनोड और कैथोड का उपयोग किया जाता है।
क्षैतिज और लंबवत जेल वैद्युतकणसंचलन के बीच अंतर क्या है?
क्षैतिज बनाम लंबवत जेल वैद्युतकणसंचलन |
|
| क्षैतिज जेल वैद्युतकणसंचलन एक जेल वैद्युतकणसंचलन तकनीक है जिसमें जेल एक क्षैतिज अभिविन्यास में मौजूद होता है। | ऊर्ध्वाधर जेल वैद्युतकणसंचलन एक जेल वैद्युतकणसंचलन तकनीक है जिसमें जेल लंबवत रूप से उन्मुख होता है। |
| बफर | |
| क्षैतिज जेल वैद्युतकणसंचलन में एक निरंतर बफर होता है। | चल रहा बफर ऊर्ध्वाधर जेल वैद्युतकणसंचलन में बंद है। |
| एक्रिलामाइड का उपयोग | |
| एक्रिलामाइड का उपयोग क्षैतिज जेल वैद्युतकणसंचलन के लिए नहीं किया जा सकता है क्योंकि जेल बॉक्स वायुमंडलीय ऑक्सीजन के संपर्क में है। | चूंकि जेल दो अलग-अलग कक्षों के कारण वायुमंडलीय ऑक्सीजन के संपर्क में नहीं आता है, एक्रिलामाइड का उपयोग ऊर्ध्वाधर जेल वैद्युतकणसंचलन के लिए किया जा सकता है। |
| कार्य | |
| क्षैतिज जेल वैद्युतकणसंचलन का उपयोग अक्सर डीएनए और आरएनए मिश्रण को अलग करने के लिए किया जाता है लेकिन प्रोटीन के लिए नहीं। | ऊर्ध्वाधर जेल वैद्युतकणसंचलन का उपयोग प्रोटीन के मिश्रण को अलग करने के लिए किया जाता है। |
सारांश - क्षैतिज बनाम लंबवत जेल वैद्युतकणसंचलन
जेल वैद्युतकणसंचलन प्रयोगशाला तकनीक है जिसका व्यापक रूप से डीएनए, आरएनए और प्रोटीन के अणुओं वाले मिश्रण को अलग करने में उपयोग किया जाता है। जेल वैद्युतकणसंचलन के दो तरीके हैं: क्षैतिज और ऊर्ध्वाधर जेल वैद्युतकणसंचलन।क्षैतिज जेल वैद्युतकणसंचलन में, ऊर्ध्वाधर जेल वैद्युतकणसंचलन में चलने वाला बफर निरंतर होता है, यह बंद होता है। यह क्षैतिज और ऊर्ध्वाधर जेल वैद्युतकणसंचलन के बीच का अंतर है। दोनों प्रणालियाँ जेल वैद्युतकणसंचलन के सामान्य सिद्धांत के अनुसार कार्य करती हैं।
क्षैतिज बनाम लंबवत जेल वैद्युतकणसंचलन का पीडीएफ संस्करण डाउनलोड करें
आप इस लेख का पीडीएफ संस्करण डाउनलोड कर सकते हैं और उद्धरण नोट के अनुसार इसे ऑफ़लाइन उद्देश्यों के लिए उपयोग कर सकते हैं। कृपया पीडीएफ संस्करण यहां डाउनलोड करें क्षैतिज और लंबवत जेल वैद्युतकणसंचलन के बीच अंतर।
