रेडियोइम्यूनोसे और इम्यूनोरेडियोमेट्रिक परख के बीच मुख्य अंतर यह है कि रेडियोइम्यूनोसे में, मापा जाने वाला नमूना या यौगिक संयोजन से पहले एक रेडियोधर्मी एंटीजन के साथ जोड़ा जाता है, जबकि इम्यूनोरेडियोमेट्रिक परख में, नमूना या यौगिक तुरंत रेडिओलेबेल्ड के साथ जुड़ जाता है एंटीबॉडी।
एक इम्यूनोएसे एक जैव रासायनिक परीक्षण है जो एंटीबॉडी या एंटीजन का उपयोग करके समाधान में मैक्रोमोलेक्यूल्स की उपस्थिति या एकाग्रता का पता लगाता है। एक नमूने में प्रतिजनों को मापने के लिए फ्लोरोसेंट और रेडियोधर्मी एंटीबॉडी का उपयोग किया जाता है। प्रारंभ में, एंटीबॉडी का उपयोग सीरम प्रोटीन विश्लेषण के लिए इम्यूनोप्रेजर्वेशन, इम्यूनोडिफ्यूजन और इम्यून-इलेक्ट्रोफोरेसिस जैसी वर्षा तकनीकों में किया गया था।वर्तमान में, अत्यधिक संवेदनशील तकनीकों जैसे कि रेडियोइम्यूनोसे और इम्यूनोरेडियोमेट्रिक परख का उपयोग दवाओं, ट्यूमर मार्करों और हार्मोन के मापन के लिए किया जाता है।
रेडियोइम्यूनोसे परख क्या है?
Radioimmunoassay (RIA) एक इम्युनोसे है जो रेडियोधर्मी तत्वों का उपयोग एंटीजन-एंटीबॉडी परिसरों के चरणबद्ध रूप से करता है। आरआईए आमतौर पर एक नमूने में एंटीजन की मात्रा का पता लगाने के लिए रेडियोधर्मी एंटीबॉडी का उपयोग करता है। आरआईए इन विट्रो परख में एक बहुत ही विशिष्ट और अत्यधिक संवेदनशील है। आरआईए के पीछे का सिद्धांत प्रतिस्पर्धी बंधन है। यहां, एक रेडियोधर्मी प्रतिजन एक गैर-रेडियोधर्मी प्रतिजन के खिलाफ एंटीबॉडी या रिसेप्टर बाध्यकारी साइटों की निरंतर मात्रा के लिए प्रतिस्पर्धा करता है। आरआईए को विशेष लाइसेंस और सावधानियों की आवश्यकता है क्योंकि रेडियोधर्मी पदार्थों का उपयोग किया जाता है, और यह सबसे कम खर्चीली तकनीकों में से एक है।
चित्रा 01: इम्यूनोसे
आरआईए के दौरान, टाइरोसिन से जुड़े आयोडीन के गामा-रेडियोधर्मी आइसोटोप के साथ लेबल करके एंटीजन की एक ज्ञात मात्रा को अक्सर रेडियोधर्मी बना दिया जाता है। फिर इस एंटीजन को एंटीबॉडी की एक ज्ञात मात्रा के साथ जोड़ा जाता है। यहां, एंटीजन और एंटीबॉडी दोनों विशेष रूप से एक दूसरे से बंधते हैं। फिर, विशिष्ट एंटीबॉडी के साथ सीरम में लेबल किए गए एंटीजन और लेबल रहित एंटीजन के बीच प्रतिस्पर्धी प्रतिक्रिया शुरू करने के लिए एक रक्त-सीरम नमूना जोड़ा जाता है। इस प्रतिक्रिया में, एंटीबॉडी एक निश्चित मात्रा में लेबल किए गए एंटीजन को छोड़ते हैं। यह मात्रा लेबल रहित प्रतिजन के अनुपात के समानुपाती होती है। अंत में, रोगी के रक्त सीरम में प्रतिजन की मात्रा प्राप्त करने के लिए एक बाध्यकारी वक्र उत्पन्न होता है।
इम्यूनोरेडियोमेट्रिक परख क्या है?
इम्युनोरेडियोमेट्रिक परख (IRMA) एक इम्यूनोएसे है जो रेडिओलेबेल्ड एंटीबॉडी का उपयोग करता है। IRMA में, एंटीबॉडी को रेडियोआइसोटोप का उपयोग करके लेबल किया जाता है। ये एंटीबॉडी एक विशिष्ट नमूने में मौजूद एंटीजन से बंधते हैं।एक सकारात्मक नमूने में, रेडियोधर्मी लेबल वाले एंटीबॉडी एंटीजन के मुक्त एपिटोप से बंधे होते हैं। यह एक एंटीजन-एंटीबॉडी कॉम्प्लेक्स बनाता है।
दूसरी प्रतिक्रिया के दौरान, लेबल किए गए एंटीबॉडी जो अनबाउंड होते हैं, एक ठोस चरण प्रतिजन का उपयोग करके हटा दिए जाते हैं। समाधान में रेडियोधर्मी एंटीबॉडी की शेष संख्या प्रतिजन एकाग्रता का प्रत्यक्ष कार्य है। IRMA को एक अतिरिक्त अभिकर्मक परख के रूप में जाना जाता है जहां रेडिओलेबेल्ड एंटीबॉडी की एक अतिरिक्त मात्रा को अभिकर्मक के रूप में उपयोग किया जाता है। यहां, लेबल किए गए एंटीबॉडी या एंटीजन की एक अतिरिक्त एकाग्रता को प्रतिक्रिया करने की अनुमति है। अंतिम चरण के रूप में, प्रतिजन-बाध्य और मुक्त एंटीबॉडी को अलग किया जाता है, और प्रतिजन बाध्य अंश को रेडियोधर्मी assays के अधीन किया जाता है। यहाँ, अंश की गतिविधि प्रतिजन की सांद्रता के सीधे आनुपातिक है।
रेडियोइम्यूनोसे और इम्यूनोरेडियोमेट्रिक परख के बीच समानताएं क्या हैं?
- रेडियोइम्यूनोएसे और इम्यूनोरेडियोमेट्रिक परख दोनों ही इम्युनोसे हैं जो एंटीजन-एंटीबॉडी कॉम्प्लेक्स के चरणबद्ध गठन में रेडियोधर्मी तत्वों का उपयोग करते हैं।
- वे एक एंटीजन-एंटीबॉडी कॉम्प्लेक्स बनाते हैं।
रेडियोइम्यूनोसे और इम्यूनोरेडियोमेट्रिक परख में क्या अंतर है?
Radioimmunoassay एक इम्युनोसे है जो एक रेडियो आइसोटोप के साथ लेबल किए गए एंटीजन द्वारा एंटीबॉडी के स्तर को निर्धारित करता है जबकि इम्यूनोरेडियोमेट्रिक परख एक अतिरिक्त अभिकर्मक परख है जो रेडिओलेबेल्ड एंटीबॉडी की एक अतिरिक्त एकाग्रता का उपयोग करता है। इस प्रकार, यह रेडियोइम्यूनोसे और इम्यूनोरेडियोमेट्रिक परख के बीच महत्वपूर्ण अंतर है। IRMA RIA की तुलना में अधिक संवेदनशीलता प्रदान करने में सक्षम है। आरआईए में, एंटीजन को आयोडीन के गामा-रेडियोधर्मी आइसोटोप के साथ लेबल किया जाता है जबकि आईआरएमए एंटीबॉडी में, आयोडीन के आइसोटोप का उपयोग करके लेबल किया जाता है। तो, यह रेडियोइम्यूनोसे और इम्यूनोरेडियोमेट्रिक परख के बीच का अंतर भी है। चूंकि IRMA एक अतिरिक्त अभिकर्मक तकनीक है, इसलिए परख RIA की तुलना में कम समय में की जाती है।
निम्न तालिका रेडियोइम्यूनोसे और इम्यूनोरेडियोमेट्रिक परख के बीच अंतर को सारांशित करती है।
सारांश - रेडियोइम्यूनोसे बनाम इम्यूनोरेडियोमेट्रिक परख
रेडियोइम्यूनोएसे एक इम्यूनोएसे है जो एंटीबॉडी के स्तर को निर्धारित करने के लिए रेडियोधर्मी तत्वों का चरणबद्ध गठन में उपयोग करता है। आरआईए आमतौर पर रेडियोधर्मी एंटीबॉडी का उपयोग करता है। एक रेडियोधर्मी प्रतिजन एक गैर-रेडियोधर्मी प्रतिजन के खिलाफ एंटीबॉडी या रिसेप्टर बाध्यकारी साइटों की निरंतर मात्रा के लिए प्रतिस्पर्धा करता है। इम्यूनोरेडियोमेट्रिक परख रेडिओलेबेल्ड एंटीबॉडी का उपयोग करके एक नमूने के एंटीजन स्तर को निर्धारित करने के लिए किया जाने वाला एक इम्युनोसे है। ये एंटीबॉडी एक विशिष्ट नमूने में मौजूद एंटीजन से बंधते हैं। प्रत्येक परख के अंत में, एक एंटीजन-एंटीबॉडी कॉम्प्लेक्स बनता है। परख के परिणाम प्राप्त करने के लिए, एक बाध्यकारी वक्र खींचा जाता है। रेडियोइम्यूनोसे में, लेबल की गई प्रतिजन मात्रा लेबल रहित प्रतिजन के अनुपात के समानुपाती होती है, लेकिन एक इम्यूनोरेडियोमेट्रिक परख में, प्रतिजन बाध्य अंश की गतिविधि प्रतिजन की एकाग्रता के सीधे आनुपातिक होती है। यह रेडियोइम्यूनोसे और इम्यूनोरेडियोमेट्रिक परख के बीच अंतर का सारांश है।
