ब्रैडफोर्ड और लोरी प्रोटीन परख के बीच महत्वपूर्ण अंतर यह है कि ब्रैडफोर्ड प्रोटीन परख डाई Coomassie ब्रिलियंट ब्लू G-250 के अवशोषण बदलाव पर आधारित है, जबकि लोरी प्रोटीन परख कॉपर आयनों (Cu+) आयनों की प्रतिक्रिया पर आधारित है। फोलिन-सियोकाल्टू अभिकर्मक के साथ पेप्टाइड बांड के ऑक्सीकरण द्वारा उत्पादित।
एक परख एक विश्लेषणात्मक तकनीक है जो एक नमूने के प्रमुख कार्यात्मक घटकों को चिह्नित करने में मदद करती है। इसलिए, एक परख या तो गुणात्मक या मात्रात्मक परीक्षण हो सकता है। प्रयोगशाला चिकित्सा, औषध विज्ञान, पर्यावरण जीव विज्ञान, आणविक जीव विज्ञान, जैव रसायन, और प्रतिरक्षा विज्ञान सहित कई क्षेत्रों में नियमित रूप से इस तरह के परीक्षणों का उपयोग किया जाता है।ब्रैडफोर्ड और लोरी प्रोटीन परख दो जैव रासायनिक परख हैं जो एक नमूना समाधान में प्रोटीन एकाग्रता का निर्धारण करते हैं। दोनों परख परिणाम प्रदान करने के लिए वर्णमिति तकनीकों का उपयोग करते हैं।
ब्रैडफोर्ड प्रोटीन परख क्या है?
ब्रैडफोर्ड प्रोटीन परख प्रोटीन विश्लेषण के लिए एक तेजी से स्पेक्ट्रोस्कोपिक विश्लेषणात्मक प्रक्रिया है। किसी घोल में प्रोटीन की सांद्रता को मापते समय यह उच्च सटीकता दिखाता है। मैरियन ब्रैडफोर्ड ने 1976 में इस प्रक्रिया की शुरुआत की। इस परख में, कुल प्रतिक्रिया मापी गई प्रोटीन की अमीनो एसिड संरचना पर आधारित होती है। दूसरे शब्दों में, ब्रैडफोर्ड प्रोटीन परख एक वर्णमिति परख है। यह Coomassie शानदार नीले रंग का उपयोग करता है। इसलिए, यह वर्णमिति प्रोटीन परख डाई के अवशोषण बदलाव पर निर्भर करता है। Coomassie शानदार नीला G-250 तीन स्वरूपों में मौजूद है: cationic (लाल), anionic (नीला) और तटस्थ (हरा)। अम्लीय परिस्थितियों में, डाई का लाल रूप नीले रंग में परिवर्तित हो जाता है। यह प्रोटीन के बंधन की पुष्टि करता है। यदि प्रोटीन मौजूद नहीं है, तो घोल भूरे रंग का रह सकता है।
चित्रा 01: ब्रैडफोर्ड प्रोटीन परख
ब्रैडफोर्ड प्रोटीन परख अन्य प्रोटीन परख से अलग है क्योंकि यह प्रोटीन समाधान में मौजूद विभिन्न रासायनिक यौगिकों के हस्तक्षेप के लिए कम संवेदनशील है। इन यौगिकों में सोडियम, पोटेशियम, ग्लूकोज और सुक्रोज आदि शामिल हैं।
लोरी प्रोटीन परख क्या है?
लोरी प्रोटीन परख एक जैव रासायनिक परख है जिसका उपयोग किसी घोल में प्रोटीन के कुल स्तर को निर्धारित करने के लिए किया जाता है। ओलिवर एच। लोरी वह व्यक्ति है जिसने 1940 में इस अभिकर्मक को विकसित किया था। प्रक्रिया में रंग परिवर्तन द्वारा समाधान की कुल प्रोटीन एकाग्रता को दर्शाया गया है जो समाधान में प्रोटीन एकाग्रता के समानुपाती है। इसलिए, यह भी एक वर्णमिति प्रोटीन परख है।
पेप्टाइड बॉन्ड के ऑक्सीकरण द्वारा उत्पादित कॉपर आयनों (Cu+) और फोलिन-सियोकाल्टू अभिकर्मक के बीच की प्रतिक्रिया इस प्रक्रिया का आधार है।इसके अलावा, इस अभिकर्मक में फॉस्फोमोलिब्डिक एसिड और फॉस्फोर-टंगस्टिक एसिड होता है। हालांकि, लोरी प्रोटीन परख की प्रतिक्रिया तंत्र को अच्छी तरह से समझा नहीं गया है। लेकिन इसमें सिस्टीन, ट्रिप्टोफैन और टाइरोसिन अवशेषों का ऑक्सीकरण फोलिन-सियोकाल्टू अभिकर्मक की कमी से होता है।
चित्र 02: लोरी प्रोटीन परख
सिस्टीन अवशेष लोरी प्रोटीन परख में देखे गए अवशोषण में योगदान करते हैं और प्रतिक्रिया के परिणामस्वरूप एक शानदार नीला अणु होता है; हेटरोपॉली मोलिब्डेनम नीला। इस अणु की कमी को 660nm पर अवशोषण द्वारा मापा जाता है। इसलिए, सिस्टीन और ट्रिप्टोफैन अवशेषों की सांद्रता, जो फोलिन-सियोकाल्टू अभिकर्मक को कम करती है, घोल में प्रोटीन की कुल सांद्रता को घटा देती है।
ब्रैडफोर्ड और लोरी प्रोटीन परख के बीच समानताएं क्या हैं?
- ब्रैडफोर्ड और लोरी प्रोटीन परख एक समाधान में प्रोटीन एकाग्रता का निर्धारण करते हैं।
- दोनों विधियाँ वर्णमिति विधियाँ हैं।
- साथ ही, दोनों विधियों की संवेदनशीलता अधिक है।
ब्रैडफोर्ड और लोरी प्रोटीन परख में क्या अंतर है?
ब्रैडफोर्ड और लोरी प्रोटीन परख दो प्रकार की परख हैं जो किसी घोल में प्रोटीन की मात्रा निर्धारित करती हैं। ब्रैडफोर्ड प्रोटीन परख डाई Coomassie ब्रिलियंट ब्लू G-250 के अवशोषण बदलाव पर निर्भर करता है जबकि लोरी प्रोटीन परख पेप्टाइड बॉन्ड के ऑक्सीकरण द्वारा उत्पादित कॉपर आयनों की प्रतिक्रिया पर निर्भर करता है, जिसमें फोलिन-सियोकाल्टू अभिकर्मक होता है। तो, यह ब्रैडफोर्ड और लोरी प्रोटीन परख के बीच महत्वपूर्ण अंतर है। ब्रैडफोर्ड प्रोटीन परख परिणाम उत्पन्न करने में 15 मिनट लगते हैं जबकि लोवी प्रोटीन परख परिणाम उत्पन्न करने में 40-60 मिनट लगते हैं। इस प्रकार, यह ब्रैडफोर्ड और लोरी प्रोटीन परख के बीच एक और अंतर है। इसके अलावा, ब्रैडफोर्ड प्रोटीन परख अमीनो एसिड संरचना पर निर्भर है जबकि लोरी प्रोटीन परख आंशिक रूप से अमीनो एसिड संरचना पर निर्भर है।इसलिए, यह भी ब्रैडफोर्ड और लोरी प्रोटीन परख के बीच का अंतर है।
नीचे इन्फोरैफिक ब्रैडफोर्ड और लोरी प्रोटीन परख के बीच अंतर पर अधिक विवरण प्रदान करता है।
सारांश – ब्रैडफोर्ड बनाम लोरी प्रोटीन परख
एक परख एक विश्लेषणात्मक तकनीक है जिसका उपयोग नमूने के प्रमुख कार्यात्मक घटक को चिह्नित करने के लिए किया जाता है। ब्रैडफोर्ड और लोरी प्रोटीन परख दो प्रकार के प्रोटीन परख हैं जो वर्णमिति तकनीकों के तहत कार्य करते हैं। ब्रैडफोर्ड और लोरी प्रोटीन परख दोनों एक समाधान में प्रोटीन एकाग्रता का निर्धारण करते हैं। हालाँकि, ब्रैडफोर्ड और लोरी प्रोटीन परख के बीच महत्वपूर्ण अंतर उनके द्वारा उपयोग की जाने वाली वर्णमिति तकनीक पर है। ब्रैडफोर्ड प्रोटीन परख Coomassie ब्रिलियंट ब्लू G-250 का उपयोग करता है जबकि लोरी प्रोटीन परख कॉपर आयनों (Cu+) आयनों और Folin-Cioc alteu अभिकर्मक का उपयोग करता है।इसके अलावा, ब्रैडफोर्ड विधि लोरी प्रोटीन परख की तुलना में त्वरित परिणाम देती है। हालाँकि, दोनों विधियाँ अत्यधिक संवेदनशील विधियाँ हैं और विभिन्न पदार्थों के हस्तक्षेप के अधीन हैं।
