ओडीएस और बीडीएस कॉलम के बीच महत्वपूर्ण अंतर यह है कि ओडीएस कॉलम में फ्री-ओएच कार्यात्मक समूह होते हैं, जबकि बीडीएस कॉलम में निष्क्रिय-ओएच समूह होते हैं।
रिवर्स-फेज एचपीएलसी एक क्रोमैटोग्राफिक तकनीक है जहां हम हाइड्रोफोबिक स्थिर चरण का उपयोग करते हैं। यह स्थिर चरण अधिकांश कार्बनिक विश्लेषणों के प्रतिधारण के लिए अच्छा काम करता है। रिवर्स चरण एचपीएलसी का मोबाइल चरण ध्रुवीय है। इस क्रोमैटोग्राफिक तकनीक के लिए विभिन्न प्रकार के कॉलम का उपयोग किया जाता है। ODS और BDS ऐसे दो कॉलम हैं।
ओडीएस कॉलम क्या है?
ODS कॉलम एक प्रकार का रिवर्स-फेज HPLC कॉलम है जिसमें फ्री-ओएच फंक्शनल ग्रुप होते हैं।इसे C18 कॉलम के रूप में भी संक्षिप्त किया गया है क्योंकि इसमें ऑक्टाडेसीलेन चेन होते हैं। इसका मतलब है कि हम एक सी 18 कॉलम को ऑक्टाडेसीसिल समूहों (इन्हें ओडीएस समूह या सी 18 समूह के रूप में भी नामित किया गया है) की पैकिंग के साथ भर सकते हैं जो रासायनिक रूप से सिलिका जेल वाहक से बंधे होते हैं। ये ODS कॉलम विशेष रूप से रिवर्स-फेज क्रोमैटोग्राफिक तकनीकों के लिए उपयोग किए जाते हैं। इन स्तंभों में एक उच्च सैद्धांतिक प्लेट संख्या होती है और यह तेजी से संतुलन भी दिखाती है। चूंकि इन स्तंभों को संचालित करने के लिए केवल कम लागत की आवश्यकता होती है, इसलिए इन्हें आमतौर पर रिवर्स-फेज क्रोमैटोग्राफी में उपयोग किया जाता है।
हालांकि, क्रोमैटोग्राफी में इन ओडीएस कॉलम का उपयोग करने में कई कमियां हैं। उदाहरण के लिए, समग्र रेफरेंस बहुत तेज़ है, इसलिए मिश्रण में कुछ घटकों को अलग करना मुश्किल है, और स्तंभ के स्थिरीकरण में तुलनात्मक रूप से लंबा समय लगता है।
चित्र 01: एचपीएलसी कॉलम
ओडीएस कॉलम की रासायनिक संरचना पर विचार करते समय, इसमें हाइड्रॉक्सिल समूह (-ओएच) होते हैं जो सिलिका जेल वाहक की सतह से जुड़े होते हैं जहां इसकी संरचना सी-ओएच होती है। इस संरचना को "सिलानोल" के रूप में जाना जाता है। ODS कॉलम पैकिंग में, ODS समूहों को रासायनिक प्रतिक्रियाओं के माध्यम से सिलानॉल से जोड़कर पैकिंग की जाती है। ये ODS समूह भारी हैं, और ये अत्यधिक प्रतिक्रियाशील नहीं हैं। इसलिए, इस कॉलम में बहुत से अप्राप्य सिलनोल समूह मौजूद हैं। हालांकि, यह मुक्त सिलानॉल विश्लेषण के दौरान त्रुटियों का कारण बन सकता है, इसलिए हमें इन समूहों को कुछ अन्य यौगिकों जैसे कि टीएमएस (ट्राइमिथाइलसिलिल) समूहों के साथ कैप करना होगा जो भारी नहीं बल्कि अत्यधिक प्रतिक्रियाशील हैं। इस प्रक्रिया को एंड-कैपिंग कहा जाता है।
बीडीएस कॉलम क्या है?
बीडीएस कॉलम एक प्रकार का रिवर्स-फेज एचपीएलसी कॉलम है जिसने –OH समूहों को अवरुद्ध कर दिया है। इसका मतलब है कि इस कॉलम में हाइड्रॉक्सिल समूह निष्क्रिय/मुक्त नहीं हैं। इसे BDS C18 कॉलम के रूप में भी नामित किया गया है, और यह कॉलम ऑक्टाडेसीलेन चेन से भरा हुआ है।बीडीएस शब्द बेस डिएक्टिवेटेड सिलिका के लिए है। इसलिए, इन स्तंभों को एंडकैप कॉलम के रूप में भी नामित किया गया है।
क्रोमैटोग्राफी में यह कॉलम बहुत महत्वपूर्ण है क्योंकि इसमें इसके अवशिष्ट सिलानॉल समूह कैपिंग द्वारा निष्क्रिय कर दिए गए हैं। इस प्रकार, न्यूनतम अवशिष्ट सिलानॉल गतिविधि है। इसके अलावा, यह कॉलम बुनियादी यौगिकों के विश्लेषण के लिए विशिष्ट है। यहाँ, क्षार सिलिका पैकिंग में Si-OH समूहों के साथ प्रतिक्रिया करते हैं। बीडीएस कॉलम पीक टेलिंग को कम करने के लिए डिज़ाइन किए गए हैं, जो क्रोमैटोग्राफी में एक बड़ी समस्या है (एक निश्चित चोटी को पहचानने में असमर्थ)।
ओडीएस और बीडीएस कॉलम में क्या अंतर है?
ODS और BDS दो कॉलम हैं जिनका उपयोग रिवर्स-फेज क्रोमैटोग्राफी के लिए किया जाता है। ओडीएस और बीडीएस कॉलम के बीच महत्वपूर्ण अंतर यह है कि ओडीएस कॉलम में फ्री-ओएच कार्यात्मक समूह होते हैं, जबकि बीडीएस कॉलम में निष्क्रिय-ओएच समूह होते हैं। इसके अलावा, ओडीएस कॉलम में उच्च चोटी की पूंछ होती है जबकि बीडीएस कॉलम को चोटी की पूंछ को कम करने के लिए डिज़ाइन किया गया है।
निम्न तालिका ओडीएस और बीडीएस कॉलम के बीच अंतर को सारांशित करती है।
सारांश – ओडीएस बनाम बीडीएस कॉलम
ODS और BDS दो कॉलम हैं जिनका उपयोग रिवर्स फेज HPLC के लिए किया जाता है। ओडीएस और बीडीएस कॉलम के बीच महत्वपूर्ण अंतर यह है कि ओडीएस कॉलम में फ्री-ओएच कार्यात्मक समूह होते हैं, जबकि बीडीएस कॉलम में निष्क्रिय-ओएच समूह होते हैं।