कुल सेल काउंट और व्यवहार्य सेल काउंट के बीच महत्वपूर्ण अंतर यह है कि टोटल सेल काउंट एक नमूने में जीवित और मृत दोनों माइक्रोबियल कोशिकाओं सहित सभी कोशिकाओं का अनुमान लगाता है जबकि व्यवहार्य सेल काउंट एक नमूने में केवल जीवित माइक्रोबियल कोशिकाओं का अनुमान लगाता है।
अधिकांश प्रायोगिक कार्य के लिए किसी आबादी के भीतर जीवों की संख्या गिनना आवश्यक माना जाता है। इसलिए, हम प्रत्यक्ष और अप्रत्यक्ष तरीकों का उपयोग करके एक नमूने के भीतर रोगाणुओं की संख्या का विश्लेषण करने का प्रयास करते हैं। प्रत्यक्ष माप में ऐसे तरीके शामिल हैं जो सीधे सेल नंबरों की गणना करते हैं। अप्रत्यक्ष माप में कुछ पैरामीटर को मापना शामिल है जो सेल नंबर से संबंधित हो सकते हैं जैसे सेल घनत्व, शुष्क वजन, आदि।कुछ विधियाँ एक नमूने में केवल जीवित माइक्रोबियल कोशिकाओं की मात्रा निर्धारित करती हैं। व्यवहार्य सेल गिनती एक ऐसी विधि है। प्रत्यक्ष सूक्ष्म गणना एक सूक्ष्मदर्शी का उपयोग करके माध्यम/नमूने की ज्ञात मात्रा में सभी कोशिकाओं की मात्रा निर्धारित करती है। इसलिए, यह जीवित और मृत दोनों कोशिकाओं को गिनता है। यह कुल सेल काउंट का एक प्रकार है।
कुल सेल काउंट क्या है?
कुल सेल काउंट वह तरीका है जिसमें माइक्रोस्कोप और एक काउंटिंग चैंबर (हेमोसाइटोमीटर) का उपयोग करके सभी कोशिकाओं को माध्यम/नमूने की ज्ञात मात्रा में गिनना शामिल है। व्यवहार्य गणनाओं के विपरीत, जीवित और मृत दोनों कोशिकाओं की गणना की जाती है। इसलिए, यह कुल गणना है जब तक कि अवलोकन के दौरान व्यवहार्यता दाग लागू नहीं किया जाता है। माइक्रोस्कोपी में, कोशिकाओं को सीधे माइक्रोस्कोप के नीचे देखा जाता है और गिना जाता है। यह एक सेल निलंबन का उपयोग करता है जिसमें माइक्रोबियल कोशिकाएं होती हैं। गिनती में आसानी और सटीक माप के लिए, नमूने को पतला किया जा सकता है। कोशिकाओं के बहुत उच्च/निम्न सांद्रता में, सूक्ष्मदर्शी का उपयोग करके कुल कोशिका गणना प्राप्त करना एक कठिन कार्य है।
चित्र 01: मतगणना कक्ष - हेमोसाइटोमीटर
गणना कक्ष आसान, सस्ते और कुल सेल गिनती लेने में त्वरित हैं। सबसे महत्वपूर्ण बात यह है कि काउंटिंग चैंबर यूकेरियोट्स और प्रोकैरियोट्स दोनों की गिनती के लिए उपयोगी होते हैं। हम कुल सेल गिनती को मापने के लिए ज्ञात मात्रा के चयनित वर्गों में कोशिकाओं की गणना करते हैं।
वायबल सेल काउंट क्या है?
व्यवहार्य कोशिका गणना एक नमूने में जीवित माइक्रोबियल कोशिकाओं की गणना करने की एक विधि है। यह नमूने में केवल जीवित कोशिकाओं की गणना करता है। व्यवहार्य प्लेट गिनती, झिल्ली निस्पंदन, और सबसे संभावित संख्या कुछ व्यवहार्य सेल गिनती तकनीकें हैं। ये दृष्टिकोण विकास आधारित हैं। व्यवहार्य प्लेट गिनती विधि भोजन और डेयरी सूक्ष्म जीव विज्ञान, चिकित्सा सूक्ष्म जीव विज्ञान, पर्यावरण सूक्ष्म जीव विज्ञान, माइक्रोबियल आनुवंशिकी, विकास मीडिया विकास और जैव प्रौद्योगिकी सहित कई सूक्ष्मजीवविज्ञानी क्षेत्रों में उपयोग की जाने वाली एक शक्तिशाली विधि है।
व्यवहार्य जीवाणुओं को गिनने का सबसे सामान्य तरीका एक अगर माध्यम पर कॉलोनियों को बनाने में सक्षम नमूने का उपयोग करना है। प्लेट काउंट करने के दो मुख्य तरीके हैं: प्लेट तकनीक फैलाएं और प्लेट तकनीक डालें। नमूने की एक ज्ञात मात्रा को या तो एक अगर प्लेट की सतह पर फैलाया जा सकता है, या अगर में मिलाया जा सकता है। फिर प्लेट को इनक्यूबेट किया जाता है, और उत्पन्न होने वाली कॉलोनियों को गिना जाता है। उपनिवेशों की संख्या मूल नमूने के भीतर सूक्ष्मजीवों की संख्या से संबंधित है। व्यवहार्य गणना केवल उन कोशिकाओं को मापती है जो जीवित और बढ़ रही हैं।
चित्र 02: व्यवहार्य प्लेट गणना
मोस्ट संभावित नंबर (एमपीएन) व्यवहार्य कोशिकाओं के जनसंख्या घनत्व के आकलन के लिए प्लेट काउंट विधियों का एक विकल्प है। यह तरल संस्कृति में बढ़ने वाले जीवों की गणना करता है और इस प्रकार मुख्य रूप से बैक्टीरियोलॉजिकल तकनीक है।यह जीवों की कम सांद्रता के लिए विशेष रूप से उपयोगी है उदा। दूध, पीने योग्य पानी।
मेम्ब्रेन फिल्ट्रेशन तकनीक अधिक उपयुक्त होती है जब रोगाणु बहुत पतले होते हैं जैसे कि शहर की पानी की आपूर्ति में। यह केवल एक फिल्टर के माध्यम से तरल की एक ज्ञात मात्रा को पारित करके और पोषक माध्यम पर इनक्यूबेट करके किया जाता है। फिल्टर पर विकसित होने वाली कॉलोनियों की गणना की जाती है, और नमूने के प्रति मिलीलीटर बैक्टीरिया की गणना की जाती है।
कुल सेल गणना और व्यवहार्य सेल गणना के बीच समानताएं क्या हैं?
- कुल सेल काउंट और व्यवहार्य सेल काउंट दो प्रकार की माइक्रोबियल तकनीकें हैं जो कोशिकाओं की मात्रा निर्धारित करती हैं।
- वे आमतौर पर माइक्रोबायोलॉजी लैब में गणना तकनीक का उपयोग करते हैं।
कुल सेल गणना और व्यवहार्य सेल गणना के बीच क्या अंतर है?
कुल कोशिका संख्या एक नमूने में सभी जीवित और मृत माइक्रोबियल कोशिकाओं की गणना करती है। इसके विपरीत, व्यवहार्य कोशिका गणना एक नमूने में केवल जीवित कोशिकाओं की गणना करती है।तो, यह कुल सेल काउंट और व्यवहार्य सेल काउंट के बीच महत्वपूर्ण अंतर है। कुल कोशिका गणना अग्र प्लेटों पर कॉलोनियों की वृद्धि से स्वतंत्र होती है जबकि व्यवहार्य कोशिका गणना एक वृद्धि-आधारित तकनीक है और यह अग्र प्लेटों पर माइक्रोबियल कॉलोनियों की वृद्धि पर निर्भर करती है।
नीचे दी गई जानकारी-ग्राफिक कुल सेल गिनती और व्यवहार्य सेल गिनती के बीच अंतर को सारांशित करती है।
सारांश - कुल सेल गणना बनाम व्यवहार्य सेल गणना
कुल कोशिका गणना जीवित और मृत माइक्रोबियल कोशिकाओं दोनों की गणना करती है जबकि व्यवहार्य कोशिका गणना केवल जीवित कोशिकाओं की गणना करती है। इस प्रकार, यह कुल सेल काउंट और व्यवहार्य सेल काउंट के बीच महत्वपूर्ण अंतर है। इसके अलावा, व्यवहार्य सेल गिनती कुल सेल गिनती के विपरीत, विकास-आधारित तकनीक है।इसके अलावा, दृश्यमान कॉलोनियों को प्राप्त करने तक इसे प्लेटों के ऊष्मायन की आवश्यकता होती है। व्यवहार्य प्लेट गिनती, एमपीएन और झिल्ली निस्पंदन व्यवहार्य सेल गिनती की कुछ तकनीकें हैं जबकि प्रत्यक्ष माइक्रोस्कोपी और हेमोसाइटोमीटर का उपयोग कुल सेल गिनती की दो तकनीकें हैं।
