प्रतिस्पर्धी और गैर-प्रतिस्पर्धी एलिसा के बीच महत्वपूर्ण अंतर यह है कि प्रतिस्पर्धी एलिसा एक निषेध प्रतिजन का उपयोग करती है जबकि गैर प्रतिस्पर्धी एलिसा परख के लिए एक अवरोध प्रतिजन का उपयोग नहीं करती है।
एंजाइम-लिंक्ड इम्यूनोसॉर्बेंट परख (एलिसा) एक प्रतिरक्षाविज्ञानी परख है जो एंटीबॉडी, एंटीजन, प्रोटीन और ग्लाइकोप्रोटीन जैसे विभिन्न लक्ष्यों का पता लगाता है। यह प्रदर्शन करने का एक त्वरित और सरल तरीका है। इसलिए, इसका उपयोग अक्सर अनुसंधान और नैदानिक उद्देश्यों के लिए किया जाता है। एलिसा में एंजाइमों का उपयोग और एंटीबॉडी और एंटीजन के विशिष्ट बंधन शामिल हैं। प्रतिक्रियाएं कैसे होती हैं, इसके आधार पर एलिसा चार प्रकार की होती है: प्रत्यक्ष एलिसा, अप्रत्यक्ष एलिसा, सैंडविच एलिसा और निषेध एलिसा।प्रत्यक्ष, अप्रत्यक्ष और सैंडविच एलिसा गैर-प्रतिस्पर्धी एलिसा के प्रकार हैं जबकि निषेध एलिसा एक प्रकार का पूर्ण एलिसा है। इस लेख का मुख्य उद्देश्य प्रतिस्पर्धी और गैर-प्रतिस्पर्धी एलिसा के बीच अंतर पर चर्चा करना है।
प्रतिस्पर्धी एलिसा क्या है?
प्रतिस्पर्धी एलिसा सिग्नल हस्तक्षेप का पता लगाने के माध्यम से एक नमूने में एंटीजन एकाग्रता को मापता है। यहां, परख एक अवरोधक प्रतिजन का उपयोग करता है। इसलिए, यह एक प्रकार का निषेध एलिसा है। इस प्रक्रिया के दौरान, नमूने में मौजूद एंटीजन एक विशिष्ट मात्रा में लेबल एंटीबॉडी के लिए बाध्य करने के लिए चयनित संदर्भ एंटीजन के साथ प्रतिस्पर्धा करते हैं। इसके अलावा, यह प्रक्रिया नमूने के ऊष्मायन के साथ शुरू होती है, जिसमें लेबल एंटीबॉडी की अधिक मात्रा होती है। इसके अलावा, संदर्भ प्रतिजन को कई अच्छी तरह से परख प्लेट पर पूर्व-लेपित किया जाना चाहिए। फिर नमूना मिश्रण को परख प्लेट में जोड़ा जाना चाहिए जिसमें संदर्भ प्रतिजन होता है। नि: शुल्क एंटीबॉडी नमूने में प्रतिजन की मात्रा के आधार पर संदर्भ प्रतिजन के लिए बाध्य होंगे।इसलिए, यदि अधिक नमूना प्रतिजन मौजूद है, तो कम संदर्भ प्रतिजन का पता लगाया जाएगा। इस प्रकार, यह एक कमजोर संकेत बनाता है।
चित्र 01: एलिसा
इसके विपरीत, जब नमूने में प्रतिजन की मात्रा कम होती है, तो अधिक से अधिक संदर्भ प्रतिजन एंटीबॉडी पर कब्जा कर लेंगे और एक मजबूत संकेत देंगे। चूंकि प्रतिस्पर्धी एलिसा एक मजबूत संकेत देता है जब नमूने में एंटीजन की कम मात्रा होती है, प्रतिस्पर्धी एलिसा एक बहुत ही संवेदनशील परख होती है, यहां तक कि कम संख्या में एंटीजन वाले नमूनों के लिए भी।
कुछ प्रतिस्पर्धी एलिसा किट में, लेबल वाले एंटीबॉडी के बजाय एक लेबल एंटीजन का उपयोग किया जाता है। यहां, लेबल प्रतिजन और नमूना प्रतिजन प्राथमिक एंटीबॉडी के लिए बाध्य करने के लिए प्रतिस्पर्धा करेंगे। इसी तरह, जब नमूने में एंटीजन की मात्रा कम होती है, तो एंटीबॉडी से बंधे लेबल वाले एंटीजन की मात्रा अधिक होगी और एक मजबूत सिग्नल बनाएगा।
गैर-प्रतिस्पर्धी एलिसा क्या है?
एलिसा के चार प्रकारों में से तीन प्रकार गैर-प्रतिस्पर्धी एलिसा हैं। वे प्रत्यक्ष एलिसा, अप्रत्यक्ष एलिसा और सैंडविच एलिसा हैं। सभी तीन प्रारूप एलिसा के सामान्य सिद्धांत के तहत काम करते हैं, उनकी कार्यप्रणाली में थोड़े अंतर के साथ।
डायरेक्ट एलिसा प्राथमिक एंटीबॉडी लेबल वाले एंजाइम का उपयोग करता है। इसलिए, इसे द्वितीयक एंटीबॉडी की आवश्यकता नहीं होती है। इसलिए, प्रत्यक्ष एलिसा अन्य प्रकार के एलिसा से तेज है। प्राथमिक एंटीबॉडी प्लेट में मौजूद स्थिर लक्ष्य प्रतिजन से सीधे जुड़ जाएगा। इसलिए, एंजाइम-सब्सट्रेट प्रतिक्रिया एक दृश्य संकेत उत्पन्न करते हुए होगी।
चित्र 02: सैंडविच एलिसा
प्रत्यक्ष एलिसा के विपरीत, अप्रत्यक्ष एलिसा एक गैर-लेबल प्राथमिक एंटीबॉडी और द्वितीयक एंटीबॉडी लेबल वाले एंजाइम का उपयोग करता है।एक बार जब प्राथमिक प्रतिरक्षी स्थिर प्रतिजन से बंध जाता है, तो द्वितीयक प्रतिरक्षी प्राथमिक प्रतिरक्षी से बंध जाता है। द्वितीयक एंटीबॉडी में एंजाइम प्रतिजन के साथ प्रतिक्रिया करेगा और एक दृश्य संकेत उत्पन्न करेगा। सैंडविच एलिसा प्रत्यक्ष और अप्रत्यक्ष एलिसा दोनों से अलग है। यहां, एंटीबॉडी परख प्लेट की दीवार पर स्थिर हो जाती है।
प्रतिस्पर्धी और गैर-प्रतिस्पर्धी एलिसा के बीच समानताएं क्या हैं?
- प्रतिस्पर्धी और गैर-प्रतिस्पर्धी एलिसा दो प्रकार की इम्यूनोसॉर्बेंट परख तकनीकें हैं।
- वे अत्यधिक लचीली और संवेदनशील तकनीक हैं।
- इसके अलावा, प्रतिस्पर्धी और गैर-प्रतिस्पर्धी एलिसा दोनों एंजाइम-लिंक्ड इम्युनोसे हैं।
- साथ ही, दोनों विधियाँ एक एंजाइम-सब्सट्रेट प्रतिक्रिया के कारण एक संकेत उत्पन्न करती हैं।
प्रतिस्पर्धी और गैर-प्रतिस्पर्धी एलिसा में क्या अंतर है?
प्रतिस्पर्धी एलिसा एक प्रकार का एलिसा है जो विशिष्ट एंटीबॉडी की सीमित मात्रा के लिए एनालिटिक एंटीजन और लेबल एंटीजन के बीच पूरा होने पर निर्भर करता है।दूसरी ओर, गैर-प्रतिस्पर्धी एलिसा में रुचि के प्रतिजन और संदर्भ प्रतिजन के बीच ऐसी कोई प्रतिस्पर्धा मौजूद नहीं है। इस प्रकार, प्रतिस्पर्धी और गैर-प्रतिस्पर्धी एलिसा के बीच यह महत्वपूर्ण अंतर है। इसी तरह, प्रतिस्पर्धी एलिसा एक निषेध एलिसा है जबकि गैर-प्रतिस्पर्धी एलिसा एक निषेध एलिसा नहीं है। तो, यह प्रतिस्पर्धी और गैर-प्रतिस्पर्धी एलिसा के बीच का अंतर भी है।
इसके अलावा, प्रतिस्पर्धी एलिसा ब्याज के प्रतिजन की कम मात्रा को मापने के लिए अधिक उपयुक्त है। यह एक संवेदनशील तरीका है। दूसरी ओर, गैर-प्रतिस्पर्धी एलिसा एक नमूने में मौजूद एंटीजन की संख्या पर निर्भर नहीं करता है। इसलिए, यह प्रतिस्पर्धी और गैर-प्रतिस्पर्धी एलिसा के बीच का अंतर भी है।
नीचे इन्फोग्राफिक तुलनात्मक रूप से प्रतिस्पर्धी और गैर-प्रतिस्पर्धी एलिसा के बीच अंतर बताता है।
सारांश - प्रतिस्पर्धी बनाम गैर-प्रतिस्पर्धी एलिसा
प्रतिस्पर्धी और गैर-प्रतिस्पर्धी एलिसा दो प्रमुख प्रकार के एलिसा या एंजाइम से जुड़े इम्युनोसॉरबेंट परख हैं। प्रतिस्पर्धी और गैर-प्रतिस्पर्धी एलिसा के बीच अंतर को सारांशित करते हुए, प्रतिस्पर्धी एलिसा सीमित मात्रा में एंटीबॉडी के प्रति रुचि के प्रतिजन और संदर्भ प्रतिजन के बीच प्रतिस्पर्धा पर निर्भर करता है। इसलिए, प्रतिस्पर्धी एलिसा को निषेध एलिसा भी कहा जाता है। दूसरी ओर, गैर-प्रतिस्पर्धी एलिसा लक्ष्य प्रतिजनों और संदर्भ प्रतिजनों के बीच प्रतिस्पर्धा पर निर्भर नहीं करती है। यह ब्याज के विश्लेषण की ओर लेबल वाले विशिष्ट एंटीबॉडी की अधिकता का उपयोग करता है। इस प्रकार, प्रतिस्पर्धी और गैर-प्रतिस्पर्धी एलिसा के बीच यह महत्वपूर्ण अंतर है। प्रत्यक्ष एलिसा, अप्रत्यक्ष एलिसा, और सैंडविच एलिसा तीन मुख्य प्रकार के गैर-प्रतिस्पर्धी एलिसा हैं।
