मुख्य अंतर - प्रत्यक्ष बनाम अप्रत्यक्ष एलिसा
एक एंजाइम-लिंक्ड इम्युनोसे (एलिसा), जिसे एंजाइम इम्यूनोसे के रूप में भी जाना जाता है, एक सीरोलॉजिकल परीक्षण है जो रक्त में एंटीबॉडी का पता लगाता है। इसका उपयोग निदान उपकरण के रूप में यह पता लगाने के लिए किया जाता है कि क्या रोगी किसी विशेष प्रकार के वायरस या किसी अन्य संक्रामक एजेंट (एंटीजन) के संपर्क में आया है और क्या शरीर ने संक्रमण के खिलाफ एंटीबॉडी का उत्पादन किया है। एलिसा पिछले और वर्तमान संक्रमणों की पहचान भी कर सकती है। इसलिए, एलिसा अक्सर बीमारियों के गहन विश्लेषण से पहले डॉक्टरों द्वारा एक पूर्व-स्क्रीनिंग परीक्षण के रूप में प्रयोग किया जाता है। यह परीक्षण रोगी से रक्त का नमूना लेकर प्रयोगशाला में किया जा सकता है।एलिसा परीक्षण दो प्रकार के होते हैं: प्रत्यक्ष एलिसा और अप्रत्यक्ष एलिसा। प्रत्यक्ष और अप्रत्यक्ष एलिसा के बीच महत्वपूर्ण अंतर यह है कि अप्रत्यक्ष एलिसा अधिक संवेदनशील है और इसके लिए द्वितीयक एंटीबॉडी को जोड़ने की आवश्यकता होती है जबकि प्रत्यक्ष एलिसा कम संवेदनशील होती है और केवल प्राथमिक एंटीबॉडी का उपयोग करती है।
डायरेक्ट एलिसा क्या है?
एलिसा एक रोग निदान परीक्षण है जो रक्त में विशेष एंटीजन या एंटीबॉडी की उपस्थिति की पहचान करने के लिए किया जाता है। यह एक प्लेट परख के रूप में किया जाता है। यह आसानी से परखने वाले एंजाइमों से जुड़े एंटीबॉडी का उपयोग करता है। सीरम नमूने में एंटीजन की उपस्थिति एंजाइम से जुड़े विशिष्ट एंटीबॉडी के साथ बंधती है। अंतिम चरण में, एंजाइम के साथ प्रतिक्रिया करने के लिए एक विशिष्ट सब्सट्रेट जोड़ा जाता है। एंजाइम सब्सट्रेट को रंगीन या सिग्नल-उत्पादक उत्पाद में परिवर्तित करता है। रासायनिक सब्सट्रेट में रंग परिवर्तन से सीरम नमूने में एक विशेष एंटीबॉडी की उपस्थिति का पता चलता है। प्रत्यक्ष एलिसा परीक्षण केवल एंजाइम से जुड़े प्राथमिक एंटीबॉडी का उपयोग करता है। एंटीजन के साथ बंधने पर, यह रक्त में संक्रामक एजेंट की उपस्थिति का संकेत देते हुए, रंग को जल्दी से बदल देता है।हालांकि, प्रत्यक्ष एलिसा में संकेतों की तीव्रता कमजोर होती है क्योंकि एपिटोप्स एंटीजन के बंधन तक सीमित होते हैं। इसलिए, प्रत्यक्ष एलिसा अप्रत्यक्ष एलिसा की तुलना में कम संवेदनशील है।
चित्र 01: प्रत्यक्ष एलिसा परीक्षण
अप्रत्यक्ष एलिसा क्या है?
एलिसा दो प्रकार के एंटीबॉडी का उपयोग करके किया जा सकता है; प्राथमिक एंटीबॉडी और माध्यमिक एंटीबॉडी। अप्रत्यक्ष एलिसा उपकरण बेहतर पहचान के लिए संकेतों को बढ़ाने के लिए दोनों प्रकार के एंटीबॉडी का उपयोग करता है। अप्रत्यक्ष एलिसा तकनीक निम्नानुसार की जाती है।
- प्लेट्स को एंटीजन के साथ जोड़ा जाता है और गैर-विशिष्ट बंधन को अवरुद्ध करने के लिए धोया जाता है।
- फिर प्राथमिक एंटीबॉडी को जोड़ा और धोया जाता है।
- एंजाइम से जुड़े द्वितीयक एंटीबॉडी को जोड़ा और धोया जाता है।
- एक सब्सट्रेट जोड़ा जाता है और एंजाइमों के साथ प्रतिक्रिया करने की अनुमति दी जाती है।
- संकेतों का पता लगाया जाता है, और नमूने में विशिष्ट प्रतिजन की उपस्थिति या अनुपस्थिति की पहचान की जाती है।
अप्रत्यक्ष एलिसा परीक्षण में, कई द्वितीयक एंटीबॉडी एक प्राथमिक एंटीबॉडी से जुड़ सकते हैं। माध्यमिक एंटीबॉडी आसानी से परख किए गए एंजाइमों से जुड़े होते हैं। इसलिए, एक से अधिक इंटरैक्शन के कारण एक बंधन एक मजबूत संकेत बना सकता है। इसलिए, प्रत्यक्ष एलिसा की तुलना में अप्रत्यक्ष एलिसा अधिक संवेदनशील है। हालांकि, अप्रत्यक्ष एलिसा द्वितीयक एंटीबॉडी की क्रॉस प्रतिक्रियाओं के कारण गैर-विशिष्ट संकेत दे सकता है।
चित्र 02: अप्रत्यक्ष एलिसा परीक्षण
प्रत्यक्ष और अप्रत्यक्ष एलिसा में क्या अंतर है?
प्रत्यक्ष बनाम अप्रत्यक्ष एलिसा |
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| डायरेक्ट एलिसा अप्रत्यक्ष एलिसा की तुलना में कम संवेदनशील है। | अप्रत्यक्ष एलिसा अधिक संवेदनशील है। |
| समय लिया | |
| प्रत्यक्ष एलिसा परीक्षण एक त्वरित प्रक्रिया है। | अप्रत्यक्ष एलिसा समय लेने वाली है। |
| एंटीबॉडीज का प्रयोग | |
| प्रत्यक्ष एलिसा में केवल एक प्रकार के एंटीबॉडी (प्राथमिक एंटीबॉडी) का उपयोग किया जाता है। | अप्रत्यक्ष एलिसा के लिए प्राथमिक और द्वितीयक एंटीबॉडी का उपयोग किया जाता है। |
| एंजाइम के साथ लिंक | |
| प्राथमिक एंटीबॉडी एंजाइम से जुड़े होते हैं। | माध्यमिक एंटीबॉडी एंजाइम से जुड़े होते हैं। |
| दूसरी एंटीबॉडी की क्रॉस-रिएक्टिविटी | |
| डायरेक्ट एलिसा दूसरे एंटीबॉडी की क्रॉस-रिएक्टिविटी को खत्म करता है। | अप्रत्यक्ष एलिसा दूसरे एंटीबॉडी की क्रॉस-रिएक्टिविटी से प्रभावित होता है। |
| सिग्नल | |
| अप्रत्यक्ष एलिसा की तुलना में सिग्नल कमजोर हैं। | संकेत अप्रत्यक्ष एलिसा में प्रवर्धित होते हैं। इसलिए, इसका पता लगाना आसान है। |
सारांश - प्रत्यक्ष बनाम अप्रत्यक्ष एलिसा
एलिसा एक जैव रासायनिक तकनीक है जिसका उपयोग मुख्य रूप से प्रतिरक्षा विज्ञान में एक रोगी के रक्त के नमूने में एंटीबॉडी या एंटीजन की उपस्थिति का पता लगाने के लिए किया जाता है। यह दो प्रक्रियाओं के माध्यम से किया जा सकता है जिन्हें प्रत्यक्ष या अप्रत्यक्ष एलिसा के रूप में जाना जाता है। प्रत्यक्ष एलिसा परीक्षण एंटीजन का पता लगाने के लिए केवल प्राथमिक एंटीबॉडी का उपयोग करता है जबकि अप्रत्यक्ष एलिसा प्राथमिक और द्वितीयक एंटीबॉडी दोनों का उपयोग करता है।प्रत्यक्ष एलिसा में, प्राथमिक एंटीबॉडी को लेबल किया जाता है जबकि अप्रत्यक्ष एलिसा में द्वितीयक एंटीबॉडी को लेबल किया जाता है। प्रत्यक्ष और अप्रत्यक्ष एलिसा में यही अंतर है।
