मुख्य अंतर – डीएमईएम बनाम ईएमईएम
पशु कोशिका संवर्धन कई शोध गतिविधियों को संचालित करने के लिए पशु कोशिका रेखाओं को बनाए रखने के लिए किया जाता है। पशु कोशिका रेखाएं बाँझ परिस्थितियों में बनी रहती हैं, और उन्हें विशेष तकनीकों की आवश्यकता होती है। उनका उपयोग टीके के उत्पादन से संबंधित अध्ययनों में, कार्सिनोजेन्स और उत्परिवर्तजनों के लिए कोशिका के व्यवहार की पहचान करने और कैंसर अनुसंधान में किया जाता है। सेल कल्चर मीडिया एनिमल सेल कल्चर की सफलता के लिए बहुत महत्वपूर्ण है। सेल कल्चर मीडिया के विभिन्न प्रकार हैं जैसे कि डल्बेको का संशोधित ईगल मीडियम (डीएमईएम) और ईगल का न्यूनतम आवश्यक माध्यम (ईएमईएम)। DMEM एक संशोधित बेसल माध्यम है जिसमें अमीनो एसिड और विटामिन सांद्रता चार गुना तक बढ़ जाती है।इसमें कुछ और प्रतिस्थापन भी शामिल हैं जो मीडिया के पोषक तत्वों की स्थिति को बढ़ाते हैं। EMEM हैरी ईगल द्वारा विकसित पहले प्रकार के एनिमल सेल कल्चर मीडिया में से एक है। यह पोषक तत्वों की न्यूनतम मात्रा के साथ एक सरल, बेसल मीडिया है। दो माध्यमों के बीच महत्वपूर्ण अंतर पोषक तत्वों की संरचना है। ईएमईएम संस्कृति के विकास के लिए आवश्यक पोषक तत्वों की न्यूनतम सांद्रता से बना है, जबकि डीएमईएम अमीनो एसिड और विटामिन की बढ़ी हुई सांद्रता के साथ एक बहुत ही जटिल मीडिया है।
डीएमईएम क्या है?
Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DMEM) एक संशोधित मीडिया प्रकार है जो एक क्रीमी सफेद पाउडर के रूप में व्यावसायिक रूप से तैयार किया जाता है। यह ईएमईएम से अनुकूलित है, और अमीनो एसिड और विटामिन की एकाग्रता को बढ़ाकर पोषक तत्व संरचना को संशोधित किया जाता है। बेसल माध्यम की तुलना में अमीनो एसिड की सांद्रता दो गुना तक बढ़ जाती है। विटामिन की मात्रा चार गुना तक बढ़ जाती है जिससे माध्यम में पोषक तत्व की मात्रा बढ़ जाती है।
DMEM को और अधिक लवण जैसे फेरिक नाइट्रेट, सोडियम पाइरूवेट और कुछ गैर-आवश्यक अमीनो एसिड जैसे सेरीन और ग्लाइसिन जोड़कर संशोधित किया जाता है। मीडिया में ग्लूकोज की सांद्रता भी बदल जाती है। मूल फॉर्मूलेशन 1000 मिलीग्राम / एल ग्लूकोज से बना है, जबकि डीएमईएम में, एकाग्रता 4500 मिलीग्राम / एल तक बढ़ जाती है। DMEM को सीरम माध्यम के पूरक की भी आवश्यकता होती है क्योंकि यह एक पूर्ण माध्यम नहीं है। अक्सर, डीएमईएम को भ्रूण गोजातीय सीरम (एफबीएस) के साथ पूरक किया जाता है। FBS संवर्धन प्रक्रिया के लिए आवश्यक प्रोटीन और वृद्धि कारक प्रदान करता है।
माध्यम का pH सोडियम बाइकार्बोनेट मिलाने पर बदलता रहता है। सोडियम बाइकार्बोनेट जोड़ने से पहले माध्यम का पीएच लगभग 6.80 - 7.40 है, जबकि पीएच, सोडियम बाइकार्बोनेट जोड़ने के बाद 7.60 - 8.20 की सीमा में है। मीडिया का भंडारण तापमान 2 - 8 0C. है
चित्र 01: डीएमईएम
डीएमईएम के आवेदन
- माउस भ्रूण कोशिकाओं में पॉलीओमावायरस की पट्टिका बनाने की क्षमता का अध्ययन करने के लिए।
- संपर्क निषेध अध्ययन में
- चिकन सेल कल्चर में
ईएमईएम क्या है?
ईगल का न्यूनतम आवश्यक माध्यम (ईएमईएम) पशु सेल लाइनों के सेल संवर्धन में पहले विकसित मीडिया में से एक है। EMEM का उपयोग करके उगाई जाने वाली पहली प्रकार की पशु कोशिका रेखाओं में माउस L कोशिकाएँ और HeLa कोशिकाएँ शामिल हैं। EMEM मीडिया भी एक प्रकार का संशोधित मीडिया है। हैरी ईगल ने सबसे पहले ईएमईएम माध्यम तैयार किया। ईएमईएम मीडिया में आवश्यक अमीनो एसिड और विटामिन शामिल हैं जो सेल प्रकारों के लिए आवश्यक न्यूनतम एकाग्रता में हैं। गैर-आवश्यक अमीनो एसिड को सूत्रीकरण में शामिल नहीं किया गया था, और ग्लूकोज और सोडियम बाइकार्बोनेट सांद्रता कम हो जाती है। यद्यपि मीडिया में कोशिकाओं के सफल विकास के लिए न्यूनतम विकास आवश्यकताओं की संतुलित मात्रा निहित थी।
EMEM पूर्ण माध्यम नहीं है। इसलिए, स्तनधारी कोशिकाओं के सफल विकास के लिए सीरम के साथ पूरकता की आवश्यकता होती है। EMEM का उपयोग विभिन्न प्रकार की कोशिकाओं पर किया जाता है और अभी भी सेल कल्चर शोधकर्ताओं के बीच एक लोकप्रिय मीडिया है।
डीएमईएम और ईएमईएम में क्या समानताएं हैं?
- पशु कोशिका संवर्धन में दोनों मीडिया प्रकारों का उपयोग किया जाता है।
- दोनों मीडिया प्रकार तरल फॉर्मूलेशन हैं।
- दोनों मीडिया प्रकार बेसल मीडिया से संशोधित मीडिया हैं।
- दोनों मीडिया प्रकारों में आवश्यक अमीनो एसिड, विटामिन और अकार्बनिक लवण होते हैं जो विकास के लिए आवश्यक होते हैं।
- दोनों प्रकार के मीडिया अधूरे हैं। इसलिए सीरम मिलाना चाहिए।
- दोनों मीडिया प्रकार ग्लूकोज को कार्बन स्रोत के रूप में उपयोग करते हैं।
- दोनों मीडिया प्रकारों का पीएच अधिक होता है और सोडियम बाइकार्बोनेट जोड़कर समायोजित किया जाता है।
डीएमईएम और ईएमईएम में क्या अंतर है?
डीएमईएम बनाम ईएमईएम |
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| DMEM एक संशोधित प्रकार का बेसल माध्यम है, जिसमें अमीनो एसिड और विटामिन सांद्रता में वृद्धि होती है। इसमें कुछ और प्रतिस्थापन भी शामिल हैं जो मीडिया के पोषक तत्वों की स्थिति को बढ़ाते हैं। | EMEM हैरी ईगल द्वारा विकसित पहले प्रकार के एनिमल सेल कल्चर मीडिया में से एक है। यह पोषक तत्वों की न्यूनतम मात्रा के साथ एक सरल, बेसल मीडिया है। |
| अमीनो एसिड के संशोधन | |
| डीएमईएम माध्यम में अमीनो एसिड की मात्रा दुगनी हो गई है। | EMEM में अमीनो एसिड की न्यूनतम सांद्रता का उपयोग किया जाता है। |
| विटामिन के संशोधन | |
| डीएमईएम में विटामिन की मात्रा चार गुना तक बढ़ गई है। | EMEM में विटामिन की न्यूनतम सांद्रता का उपयोग किया जाता है। |
| ग्लूकोज एकाग्रता | |
| DMEM में ग्लूकोज की मात्रा 4500 mg/L तक बढ़ गई है। | EMEM में ग्लूकोज़ की मात्रा 1000 mg/L है। |
| गैर-आवश्यक अमीनो एसिड की उपस्थिति | |
| डीएमईएम में उपस्थित। | ईएमईएम में अनुपस्थित। |
| अतिरिक्त घटकों की उपस्थिति | |
| DMEM में फेरिक नाइट्रेट, सोडियम पाइरूवेट जैसे घटक मौजूद होते हैं। | EMEM में पोषक तत्वों की न्यूनतम मात्रा होती है। |
सारांश – डीएमईएम बनाम ईएमईएम
DMEM और EMEM दो लोकप्रिय एनिमल सेल कल्चर मीडिया हैं जो मुख्य रूप से अपनी पोषक संरचना में भिन्न हैं।DMEM EMEM का संशोधित रूप है, जहां कुछ नए घटकों को जोड़ने के साथ-साथ पोषक तत्वों की सांद्रता बढ़ाई जाती है। EMEM एक न्यूनतम मीडिया है और इसमें पशु सेल लाइनों के सफल विकास के लिए आवश्यक सभी आवश्यक कारक शामिल हैं। इन मीडिया का उपयोग उच्च बाँझ परिस्थितियों में किया जाना चाहिए, और दोनों मीडिया को उपयोग करने से पहले सीरम के साथ पूरक होना चाहिए। डीएमईएम और ईएमईएम में यही अंतर है।
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