मुख्य अंतर - क्षणिक बनाम स्थिर अभिकर्मक
ट्रांसफेक्शन एक प्रक्रिया है जो रासायनिक या भौतिक तरीकों का उपयोग करके यूकेरियोटिक कोशिकाओं के जीन स्थानांतरण में शामिल है। अभिकर्मक को मुख्य दो प्रकारों में वर्गीकृत किया जा सकता है जिन्हें क्षणिक अभिकर्मक और स्थिर अभिकर्मक कहा जाता है। क्षणिक अभिकर्मक के दौरान, ब्याज का जीन मेजबान जीनोम के साथ एकीकृत करने में विफल रहता है और अस्थायी रूप से अल्पावधि के लिए मेजबान के भीतर व्यक्त किया जाता है, जबकि स्थिर अभिकर्मक में, ब्याज की जीन मेजबान जीनोम के साथ एकीकृत होती है और कई पीढ़ियों में लंबे समय तक बनी रहती है।. क्षणिक और स्थिर अभिकर्मक के बीच यह महत्वपूर्ण अंतर है।दोनों ही मामलों में, अभिकर्मक सफल होता है, और जीन व्यक्त किए जाते हैं।
क्षणिक संक्रमण क्या है?
यूकैरियोटिक कोशिकाओं में जीन डालने के लिए ट्रांसफेक्शन एक महत्वपूर्ण उपकरण है। दो प्रकार के अभिकर्मकों में, जीन स्थानांतरण में क्षणिक अभिकर्मक एक सामान्य तरीका है। एक वेक्टर के माध्यम से, विदेशी जीन मेजबान कोशिकाओं के अंदर बदल जाते हैं। एक बार जब विदेशी डीएनए मेजबान सेल में प्रवेश करता है, तो उसके पास दो विकल्प होते हैं। यह या तो मेजबान जीनोम के साथ एकीकृत हो सकता है और दोहरा सकता है, या जीनोम में एकीकृत किए बिना अंदर रह सकता है। क्षणिक अभिकर्मक मेजबान जीनोम में एकीकृत किए बिना सम्मिलित जीन की अस्थायी अभिव्यक्ति को प्रदर्शित करता है। कोशिका विभाजित होने तक जीन कोडित प्रोटीन को व्यक्त और उत्पादन करते हैं। हालांकि, एकीकरण की अक्षमता के कारण, यह दोहराने और भावी पीढ़ियों में प्रवेश नहीं कर सकता है। इस प्रकार का अभिकर्मक थोड़े समय के लिए सफल होता है। कोशिका विभाजन के दौरान या कुछ अन्य कारकों के कारण, विदेशी डीएनए का क्षरण होता है। क्षणिक अभिकर्मक तब दिखाया जाता है जब विदेशी डीएनए अत्यधिक कुंडलित डीएनए के रूप में होता है।
चित्र 01: क्षणिक संक्रमण
स्थिर अभिकर्मक क्या है?
स्थिर अभिकर्मक मेजबान जीनोम में सफल विदेशी जीन एकीकरण को दर्शाता है। एक बार जब विदेशी डीएनए मेजबान सेल के अंदर प्रवेश कर जाता है, तो विदेशी डीएनए का हिस्सा मेजबान जीनोम के साथ एकीकृत हो जाता है और इसका हिस्सा बन जाता है। इसलिए, जब मेजबान जीनोम दोहराता है तो विदेशी डीएनए भी प्रतिकृति करता है और भविष्य की पीढ़ियों में गुजरता है। इस प्रकार का अभिकर्मक जटिल और दुर्लभ है। हालांकि, जीनोम में स्थिर संक्रमण के कारण, यह विशेषता कई पीढ़ियों की लंबी अवधि तक बनी रहती है।
स्थिर अभिकर्मक एक कठिन प्रक्रिया है और इसके जीनोम में डीएनए की प्रभावी डिलीवरी और विदेशी डीएनए के सेल अधिग्रहण की आवश्यकता होती है। इसलिए, रैखिक डीएनए वृत्ताकार डीएनए की तुलना में स्थिर अभिकर्मक का पक्षधर है।हालांकि, स्थिर ट्रांसफेक्शन दर 104 रूपांतरित कोशिकाओं में लगभग एक है। एक चयन योग्य मार्कर के कोट्रांसफोमेशन और एक माध्यम पर कृत्रिम चयन करके स्थिर अभिकर्मक देखा जा सकता है।
चित्र 02: स्थिर अभिकर्मक
क्षणिक और स्थिर अभिकर्मक में क्या अंतर है?
क्षणिक बनाम स्थिर संक्रमण |
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| विदेशी डीएनए एक मेजबान जीनोम में एकीकृत नहीं होता है। | विदेशी डीएनए मेजबान जीनोम के साथ एकीकृत होता है और इसका एक हिस्सा बन जाता है। |
| होस्ट के भीतर प्रतिकृति | |
| अस्थायी रूप से ट्रांसफ़ेक्ट जीन मेजबान के भीतर दोहराए नहीं जाते हैं। इसलिए जीन अगली पीढ़ियों को पारित नहीं होते हैं। | जीन्स को मेजबान के भीतर दोहराया जाता है और भविष्य की पीढ़ियों को पारित किया जाता है। |
| जीन अभिव्यक्ति की समय अवधि | |
| जीन एक निश्चित समय अवधि के लिए व्यक्त किए जाते हैं और उसके बाद वे नष्ट हो जाते हैं। | जीन जीनोम का हिस्सा बन जाते हैं और एक लंबी अवधि के लिए पीढ़ी के भीतर व्यक्त किए जाते हैं। |
| उपयोग | |
| यह जीन या जीन उत्पादों की अल्पकालिक अभिव्यक्ति के प्रभावों का अध्ययन करने के लिए उपयोगी है। | यह लंबे समय तक जीन अभिव्यक्ति के प्रभावों का अध्ययन करने के लिए उपयोगी है। |
| संक्रमण का पता लगाना | |
| जीन व्यक्त किए जाते हैं और एक रिपोर्टर जीन डालने से आसानी से पता लगाया जा सकता है। | चयन योग्य मार्कर डालने और मीडिया पर कृत्रिम चयन के माध्यम से चयन करके स्थिर अभिकर्मक का आसानी से पता लगाया जा सकता है। |
| घटना और प्रक्रिया | |
| क्षणिक संक्रमण सामान्य है और निष्पादित करने के लिए जटिल नहीं है। | स्थिर अभिकर्मक दुर्लभ है और प्रदर्शन करने के लिए जटिल है। |
| डीएनए की प्रकृति | |
| अत्यधिक सुपरकोल्ड डीएनए क्षणिक अभिकर्मक के लिए उपयुक्त हैं। | रैखिक डीएनए स्थिर अभिकर्मक के लिए उपयुक्त होते हैं। |
| आवेदन | |
| इसका उपयोग जीन नॉकडाउन या निरोधात्मक आरएनए के साथ साइलेंसिंग के अध्ययन के लिए किया जाता है, छोटे पैमाने पर प्रोटीन का उत्पादन | इसका उपयोग बड़े पैमाने पर प्रोटीन उत्पादन के लिए किया जाता है, लंबी अवधि के फार्माकोलॉजी अध्ययन, जीन थेरेपी, दीर्घकालिक आनुवंशिक विनियमन के तंत्र पर शोध |
सारांश - क्षणिक बनाम स्थिर अभिकर्मक
गैर-वायरल आधारित प्रणालियों द्वारा यूकेरियोटिक कोशिकाओं में स्थानांतरित होने वाले जीन के दौरान दिखाए गए क्षणिक और स्थिर संक्रमण दो प्रकार के संक्रमण हैं। रूपांतरित विदेशी डीएनए क्षणिक अभिकर्मक में मेजबान जीनोम के साथ एकीकृत नहीं होता है, जबकि यह स्थिर अभिकर्मक में मेजबान जीनोम के साथ एकीकृत होता है। वृत्ताकार कुंडलित डीएनए को क्षणिक अभिकर्मक दिखाया गया है जबकि रैखिक डीएनए स्थिर अभिकर्मक को पसंद करता है। यह क्षणिक और स्थिर अभिकर्मक के बीच का अंतर है। हालांकि क्षणिक अभिकर्मक स्थिर अभिकर्मक की तुलना में अधिक सामान्य और आसान है। लेकिन दो में से एक का चयन जीन स्थानांतरण के उद्देश्य और अनुसंधान परियोजना की अवधि पर निर्भर करता है।
