मुख्य अंतर - गुणसूत्र चलना बनाम कूदना
क्रोमोसोम वॉकिंग और क्रोमोसोम जंपिंग दो तकनीकी उपकरण हैं जिनका उपयोग आणविक जीव विज्ञान में क्रोमोसोम पर जीन का पता लगाने और जीनोम के भौतिक मानचित्रण के लिए किया जाता है। क्रोमोसोम वॉकिंग एक ऐसी तकनीक है जिसका उपयोग जीनोमिक लाइब्रेरी में लक्ष्य जीन को बार-बार आइसोलेशन और जीनोमिक लाइब्रेरी के आसन्न क्लोनों के क्लोनिंग द्वारा क्लोन करने के लिए किया जाता है। क्रोमोसोमल जंपिंग क्रोमोसोमल वॉकिंग का एक विशेष संस्करण है जो क्रोमोसोमल वॉकिंग के ब्रेकप्वाइंट पर काबू पाता है। क्रोमोसोमल वॉकिंग केवल क्रोमोसोम की छोटी लंबाई को अनुक्रम और मैप कर सकता है जबकि क्रोमोसोमल जंपिंग क्रोमोसोम के बड़े हिस्से के अनुक्रमण को सक्षम बनाता है।यह क्रोमोसोमल वॉकिंग और क्रोमोसोमल जंपिंग के बीच महत्वपूर्ण अंतर है।
क्रोमोसोम वॉकिंग क्या है?
क्रोमोसोम वॉकिंग एक उपकरण है जो अतिव्यापी प्रतिबंध अंशों का उपयोग करके गुणसूत्रों के अज्ञात अनुक्रम क्षेत्रों की खोज करता है। क्रोमोसोम वॉकिंग में, एक ज्ञात जीन का एक हिस्सा एक जांच के रूप में उपयोग किया जाता है और क्रोमोसोम की पूरी लंबाई को मैप या अनुक्रमित करने के लिए जारी रखा जाता है। यह मार्कर से लक्ष्य लंबाई तक जाता है। गुणसूत्र चलने में, अगले अनुक्रम की पहचान करने के लिए प्रत्येक अतिव्यापी टुकड़ों के सिरों का उपयोग संकरण के लिए किया जाता है।
जांच को क्लोन किए गए डीएनए के अंतिम टुकड़ों से तैयार किया जाता है और उन्हें सबक्लोन किया जाता है। फिर उनका उपयोग अगले अतिव्यापी टुकड़े को खोजने के लिए किया जाता है। इन सभी अतिव्यापी अनुक्रमों का उपयोग गुणसूत्र के आनुवंशिक मानचित्र के निर्माण और लक्ष्य जीन का पता लगाने के लिए किया जाता है। यह पुनर्गठित जीनोमिक पुस्तकालय से छोटे अतिव्यापी अंशों द्वारा डीएनए के लंबे खंडों का विश्लेषण करने की एक विधि है।
क्रोमोसोम चलने की तकनीक – चरण
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एक डीएनए खंड का अलगाव जिसमें लक्ष्य जीन के पास ज्ञात जीन या मार्कर होता है
- चयनित टुकड़े के प्रतिबंध मानचित्र की तैयारी और जांच के रूप में उपयोग करने के लिए खंड के अंतिम क्षेत्र को उपक्लोनिंग करना
- अगले अतिव्यापी टुकड़े के साथ जांच का संकरण
- अगले अतिव्यापी टुकड़े की पहचान के लिए जांच के रूप में उपयोग करने के लिए खंड 1 के खंड 1 के प्रतिबंध मानचित्र और खंड 1 के अंत क्षेत्र के उप-क्लोनिंग की तैयारी।
- अगले अतिव्यापी टुकड़े के साथ जांच का संकरण 2
- अगले अतिव्यापी टुकड़े की पहचान के लिए जांच के रूप में कार्य करने के लिए खंड 2 के प्रतिबंध मानचित्र और खंड 2 के अंत क्षेत्र के उप-क्लोनिंग की तैयारी
उपरोक्त चरणों को लक्ष्य जीन तक या अनुक्रम की कुल लंबाई के 3' छोर तक जारी रखना चाहिए।
चित्र 01: गुणसूत्र चलने की तकनीक
कई जीवों के एसएनपी को खोजने और आनुवंशिक रूप से संचरित रोगों का विश्लेषण करने और प्रासंगिक जीन के उत्परिवर्तन का पता लगाने में क्रोमोसोम चलना साइटोजेनेटिक का एक महत्वपूर्ण पहलू है।
क्रोमोसोम जंपिंग क्या है?
क्रोमोसोमल जंपिंग आणविक जीव विज्ञान में जीवों के जीनोम के भौतिक मानचित्रण के लिए उपयोग की जाने वाली तकनीक है। क्लोनिंग प्रक्रिया के दौरान दोहराए गए डीएनए क्षेत्रों को खोजने पर उत्पन्न होने वाले क्रोमोसोमल चलने की बाधा को दूर करने के लिए इस तकनीक की शुरुआत की गई थी। इसलिए, क्रोमोसोम जंपिंग तकनीक को क्रोमोसोमल वॉकिंग का एक विशेष संस्करण माना जा सकता है। यह क्रोमोसोमल वॉकिंग की तुलना में एक तेज़ तरीका है और दोहराए जाने वाले डीएनए अनुक्रमों को दरकिनार करने में सक्षम बनाता है जो क्रोमोसोमल वॉकिंग के दौरान क्लोन होने की संभावना नहीं रखते हैं।क्रोमोसोमल जंपिंग जीनोम मैपिंग के लिए लक्ष्य जीन और उपलब्ध ज्ञात मार्करों के बीच की खाई को कम करता है।
क्रोमोसोम जंपिंग टूल एक विशिष्ट डीएनए को विशेष प्रतिबंध एंडोन्यूक्लिअस के साथ काटने और टुकड़ों को गोलाकार लूप में बांधने से शुरू होता है। फिर ज्ञात अनुक्रम से डिज़ाइन किए गए प्राइमर का उपयोग गोलाकार लूपों को अनुक्रमित करने के लिए किया जाता है। यह प्राइमर वैकल्पिक तरीके से कूदने और अनुक्रमित करने में सक्षम बनाता है। इसलिए, यह दोहराए जाने वाले डीएनए अनुक्रमों को बायपास कर सकता है और लक्ष्य जीन की खोज के लिए गुणसूत्र के माध्यम से तेजी से चल सकता है।
सिस्टिक फाइब्रोसिस रोग के लिए जीन एनकोड की खोज क्रोमोसोमल जंपिंग टूल का उपयोग करके की गई थी। एक साथ, क्रोमोसोमल जंपिंग और वॉकिंग जीनोम मैपिंग प्रक्रिया को बढ़ा सकते हैं।
चित्र 02: गुणसूत्र कूदना
क्रोमोसोम वॉकिंग और जंपिंग में क्या अंतर है?
क्रोमोसोम वॉकिंग बनाम जंपिंग |
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| क्रोमोसोम आणविक जीव विज्ञान में जीनोम मैपिंग और विशिष्ट जीन का पता लगाने के लिए उपयोग किया जाने वाला एक उपकरण है। | क्रोमोसोम जंपिंग एक उपकरण है जिसका उपयोग जीनोम के भौतिक मानचित्रण और गुणसूत्रों में लक्ष्य जीन की तेजी से खोज के लिए किया जाता है। |
| अनुक्रमण की तुलनात्मक लंबाई | |
| क्रोमोसोमल वॉकिंग द्वारा केवल छोटे टुकड़ों को ही क्लोन किया जा सकता है। | क्रोमोसोमल जंपिंग द्वारा क्रोमोसोम की बड़ी लंबाई को मैप किया जा सकता है। |
| क्रोमोसोम में दोहराए जाने वाले डीएनए की क्लोनिंग | |
| क्रोमोसोम चलने की तकनीक में क्रोमोसोम में पाए जाने वाले दोहराए गए डीएनए अनुक्रमों के माध्यम से चलने में कठिनाई होती है। | यह दोहराए जाने वाले डीएनए अनुक्रमों को दरकिनार करने में सक्षम बनाता है। इसलिए अनुक्रमण के दौरान उन्हें खोजने में कोई कठिनाई नहीं होती है। |
| प्रक्रियाओं को प्रभावित करने वाले कारक | |
| प्रक्रिया की सफलता जीनोम के आकार और एक ज्ञात जीनोमिक स्थिति से वांछित जीन की ओर "चलने" की दूरी पर निर्भर करती है। | सफलता मार्कर से लक्ष्य की दूरी के जीनोम के आकार पर निर्भर नहीं करती है। |
| अनक्लोन डीएनए के प्रभाव | |
| अनक्लोन डीएनए अंशों द्वारा क्रोमोसोमल वॉकिंग को रोका जा सकता है। | सबसे कम नोट पिकोलो खेल सकते हैं डी4. |
| एक ज्ञात अनुक्रम की आवश्यकता | |
| प्रक्रिया लक्ष्य के पास एक ज्ञात जीन से शुरू होती है। | प्रक्रिया को प्राइमर डिजाइनिंग के लिए एक ज्ञात टुकड़े की आवश्यकता होती है। |
सारांश - गुणसूत्र चलना बनाम कूदना
क्रोमोसोमल वॉकिंग को अक्सर तब लागू किया जाता है जब यह ज्ञात हो कि एक विशेष जीन एक क्रोमोसोम में पहले से क्लोन किए गए जीन के पास स्थित है और जीनोमिक लाइब्रेरी से आसन्न जीनोमिक क्लोन के बार-बार अलगाव के साथ इसकी पहचान करना संभव है। हालाँकि, जब क्रोमोसोमल वॉकिंग तकनीक के दौरान दोहराए जाने वाले डीएनए क्षेत्र पाए जाते हैं, तो प्रक्रिया को जारी नहीं रखा जा सकता है। इसलिए, तकनीक उस बिंदु से टूट जाती है। क्रोमोसोमल जंपिंग एक आणविक जैविक उपकरण है जो जीनोम की मैपिंग के लिए इस सीमा को पार करता है। यह इन दोहराए जाने वाले डीएनए क्षेत्रों को दरकिनार कर देता है जिन्हें क्लोन करना मुश्किल होता है और जीनोम के भौतिक मानचित्रण में मदद करता है। गुणसूत्र के चलने और कूदने में यही मुख्य अंतर है।
