बीएल21 और डीएच5 अल्फा के बीच महत्वपूर्ण अंतर यह है कि बीएल21 एक प्रोटीज की कमी आनुवंशिक रूप से इंजीनियर सक्षम ई. कोलाई सेल है जिसका उपयोग मुख्य रूप से प्रोटीन अभिव्यक्ति के लिए किया जाता है, जबकि डीएच5 अल्फा एक आनुवंशिक रूप से इंजीनियर सक्षम ई. कोलाई सेल है जिसमें आरईसीए 1 म्यूटेशन मुख्य रूप से उपयोग किया जाता है। प्लाज्मिड परिवर्तन के लिए।
ई. कोलाई पुनः संयोजक प्रोटीन उत्पादन के लिए पसंद के प्रसिद्ध जीवों में से एक है। यह पिछले कुछ वर्षों में सबसे लोकप्रिय अभिव्यक्ति मंच बन गया है। इसका उपयोग सेल फैक्ट्री के रूप में भी किया जाता है। BL21 और DH5 अल्फा दो आनुवंशिक रूप से इंजीनियर ई. कोलाई कोशिकाएं हैं जो वर्तमान में क्रमशः प्रोटीन अभिव्यक्ति और प्लास्मिड परिवर्तन के लिए उपयोग की जाती हैं।
बीएल21 क्या है?
BL21 एक प्रोटीज कमी आनुवंशिक रूप से इंजीनियर सक्षम ई कोलाई सेल है जो मुख्य रूप से प्रोटीन अभिव्यक्ति के लिए उपयोग किया जाता है। ई. कोलाई बीएल21 एक जीवाणु कोशिका है जो बी स्ट्रेन से प्राप्त होती है। इसमें लोन प्रोटीज और ओएमपीटी बाहरी झिल्ली प्रोटीज के दोष हैं। यह आमतौर पर पुनः संयोजक प्रोटीन अभिव्यक्ति के लिए उपयोग किया जाता है क्योंकि यह सामान्य रूप से व्यक्त प्रोटीन में स्थिरता लाता है। BL21 pCold I-IV DNA और pCold TF DNA के साथ प्रोटीन अभिव्यक्ति के लिए उपयोगी है। लेकिन यह सक्षम ई. कोलाई सेल एक प्रोटीन अभिव्यक्ति प्रणाली के लिए अभिप्रेत नहीं है जो T7 प्रमोटर जैसे पीईटी सिस्टम का उपयोग कर रहा है। इसके पीछे का कारण यह है कि BL21 T7 RNA पोलीमरेज़ को व्यक्त नहीं करता है। इसके अतिरिक्त, प्लास्मिड के निर्माण या तैयारी के लिए इसका उपयोग करने की अनुशंसा नहीं की जाती है क्योंकि इसमें आरईसीए उत्परिवर्तन नहीं होता है।
चित्र 01: BL21
BL21 को पहली बार 1986 में B लाइन के विभिन्न संशोधनों के बाद Studier द्वारा वर्णित किया गया था। BL21 कोशिकाओं में LON प्रोटीज की कमी होती है, जो कई विदेशी प्रोटीनों का क्षरण करती है। इसके अलावा, इसमें एक और जीन गायब है जो बाहरी झिल्ली प्रोटीज (OmpT) के लिए कोड करता है जिसका कार्य बाह्य प्रोटीन को नीचा दिखाना है। इन प्रोटीनों की कमी ई. कोलाई बीएल21 कोशिकाओं में विदेशी प्रोटीन के सफल उत्पादन को ट्रिगर करती है। इसके अलावा, इन कोशिकाओं में hsdSB उत्परिवर्तन विदेशी डीएनए मेथिलिकरण और BL21 कोशिकाओं में व्यवधान को रोकता है।
डीएच5 अल्फा क्या है?
DH5 Alpha एक आनुवंशिक रूप से इंजीनियर सक्षम ई. कोलाई सेल है जिसमें recA1 उत्परिवर्तन होता है जो मुख्य रूप से प्लास्मिड परिवर्तन के लिए उपयोग किया जाता है। DH5 अल्फा ई. कोलाई कोशिकाएं आनुवंशिक रूप से अमेरिकी जीवविज्ञानी डगलस हानाहन द्वारा परिवर्तन की दक्षता को अधिकतम करने के लिए इंजीनियर हैं। DH5 अल्फा सेल में तीन अलग-अलग उत्परिवर्तन होते हैं: recA1, endA1, और lacZΔM15। recA1 एक एकल बिंदु उत्परिवर्तन है जो ग्लाइसीन 160 को और recA पॉलीपेप्टाइड में एक एसपारटिक एसिड अवशेषों को बदल देता है।यह उत्परिवर्तन पुनर्संयोजन की गतिविधि को निष्क्रिय कर देता है और समजातीय पुनर्संयोजन को निष्क्रिय कर देता है। endA1 उत्परिवर्तन एक इंट्रासेल्युलर एंडोन्यूक्लिज़ को निष्क्रिय कर देता है जो इसे सम्मिलित प्लास्मिड को नीचा दिखाने से रोकता है।
चित्र 02: DH5 अल्फा
इसके अलावा, lacZΔM15 उत्परिवर्तन रूपांतरित कोशिकाओं की नीली-सफेद स्क्रीनिंग को सक्षम बनाता है। ये कोशिकाएँ सक्षम कोशिकाएँ हैं। वांछित प्लास्मिड डालने के लिए उन्हें अक्सर कैल्शियम क्लोराइड परिवर्तन के साथ उपयोग किया जाता है। हाल के शोध से यह पता चला है कि हानाहन विधि के साथ DH5 अल्फा सेल प्लास्मिड परिवर्तन के लिए सबसे कुशल सक्षम सेल था।
बीएल21 और डीएच5 अल्फा के बीच समानताएं क्या हैं?
- BL21 और DH5 Alpha दो आनुवंशिक रूप से इंजीनियर E.coli हैं
- दोनों सक्षम प्रकोष्ठ हैं।
- इनमें अलग-अलग उत्परिवर्तन होते हैं।
- दोनों का कोई प्राकृतिक आवास नहीं है।
- इनका प्रयोग प्रयोगशाला उद्देश्यों जैसे अभिव्यक्ति अध्ययन और क्लोनिंग प्रक्रियाओं के लिए किया जाता है।
बीएल21 और डीएच5 अल्फा में क्या अंतर है?
BL21 एक प्रोटीज कमी आनुवंशिक रूप से इंजीनियर सक्षम ई कोलाई सेल है जो मुख्य रूप से प्रोटीन अभिव्यक्ति के लिए उपयोग किया जाता है। दूसरी ओर, DH5 अल्फा एक आनुवंशिक रूप से इंजीनियर सक्षम ई. कोलाई सेल है जिसमें recA1 उत्परिवर्तन मुख्य रूप से प्लास्मिड परिवर्तन के लिए उपयोग किया जाता है। तो, यह BL21 और DH5 अल्फा के बीच महत्वपूर्ण अंतर है। इसके अलावा, BL21 E. कोलाई कोशिका में recA1 उत्परिवर्तन नहीं होता है, जबकि DH5 Alpha E. कोलाई कोशिका में recA1 उत्परिवर्तन होता है।
निम्नलिखित इन्फोग्राफिक BL21 और DH5 अल्फा के बीच अंतर को सारणीबद्ध रूप में सूचीबद्ध करता है।
सारांश – BL21 बनाम DH5 अल्फा
ई कोलाई के गैर-रोगजनक उपभेदों को वैज्ञानिकों द्वारा प्रयोगशाला अभिव्यक्ति अध्ययन और क्लोनिंग उद्देश्यों के लिए आनुवंशिक रूप से विकसित किया गया है।BL21 और DH5 Alpha दो आनुवंशिक रूप से इंजीनियर ई. कोलाई कोशिकाएं हैं। BL21 मुख्य रूप से प्रोटीन अभिव्यक्ति अध्ययन के लिए प्रयोग किया जाता है। दूसरी ओर, DH5 अल्फा मुख्य रूप से प्लास्मिड परिवर्तन उद्देश्यों के लिए उपयोग किया जाता है। इस प्रकार, यह BL21 और DH5 अल्फा के बीच अंतर का सारांश है।
