रेडियोधर्मी और गैर-रेडियोधर्मी जांच के बीच महत्वपूर्ण अंतर यह है कि रेडियोधर्मी जांच एकल-फंसे डीएनए या आरएनए अनुक्रम होते हैं जिन्हें रेडियोधर्मी आइसोटोप के साथ लेबल किया जाता है जबकि गैर-रेडियोधर्मी जांच एकल-फंसे डीएनए या आरएनए अनुक्रम होते हैं जिन्हें रासायनिक टैग के साथ लेबल किया जाता है या एक फ्लोरोसेंट टैग।
न्यूक्लिक एसिड संकरण आणविक जीव विज्ञान में एक महत्वपूर्ण तकनीक है, विशेष रूप से माइक्रोबियल निदान में। यह एक विशेष न्यूक्लिक एसिड अनुक्रम की पहचान या पता लगाने में मदद करता है। इस तकनीक में, न्यूक्लिक एसिड एक ठोस सतह पर तय होते हैं और एक जांच के साथ संकरणित होते हैं। एक जांच डीएनए या आरएनए का एक टुकड़ा है जो ब्याज के अनुक्रम का पूरक है।यदि नमूने में लक्ष्य अनुक्रम मौजूद है, तो जांच इसके साथ संकरण करेगी और इसे पता लगाने योग्य बनाएगी। रेडियोधर्मी और गैर-रेडियोधर्मी जांच के रूप में दो प्रकार की जांच होती है। इसलिए, हम जांच को रेडियोधर्मी टैग या फ्लोरोसेंट टैग से टैग कर सकते हैं।
रेडियोधर्मी जांच क्या हैं?
रेडियोधर्मी जांच एक रेडियोधर्मी टैग के साथ एकल-फंसे डीएनए या आरएनए टुकड़े हैं। रेडियोधर्मी जांच तैयार करने में रेडियोआइसोटोप का उपयोग किया जाता है। रेडियोआइसोटोप्स 32P, 33P और 35S आमतौर पर जांच के लेबलिंग में उपयोग किए जाते हैं। इसके अलावा, रेडियोआइसोटोप 3H और 1251 भी जांच के लेबलिंग में कुछ हद तक उपयोग किए जाते हैं। लेकिन उनका उपयोग विशिष्ट अनुप्रयोगों के लिए किया जाता है। विभिन्न रेडियोआइसोटोपों में, 32P रेडियोधर्मी जांचों को लेबल करने में सबसे अधिक इस्तेमाल किया जाने वाला आइसोटोप है।
रेडियोधर्मी जांच उच्च स्तर की विश्वसनीयता और विशिष्टता प्रदान करते हैं। इसलिए, वे अधिकतम संवेदनशीलता प्रदान करते हैं और लक्ष्य अनुक्रमों की सटीक मात्रा का ठहराव की अनुमति देते हैं।हालांकि, रेडियोधर्मी जांच से जुड़े कई नुकसान हैं। उनका आधा जीवन छोटा है। इसके अलावा, वे खतरनाक हैं और हैंडलिंग के दौरान उत्पादन, उपयोग और निपटान समस्याग्रस्त हैं। इसके अलावा, रेडियोधर्मी जांच तैयार करना एक महंगी प्रक्रिया है। इसलिए, सुरक्षा मुद्दों और लागत के कारण, रेडियोधर्मी जांच का उपयोग आजकल गैर-रेडियोधर्मी जांच के रूप में नहीं किया जाता है।
नॉनरेडियोएक्टिव प्रोब क्या हैं?
नॉनरेडियोएक्टिव प्रोब दूसरे प्रकार के प्रोब होते हैं जिन पर रासायनिक लेबल लगाया जाता है। Digoxigenin एक गैर-रेडियोधर्मी जांच है, जो एक एंटीबॉडी-आधारित मार्कर है। Digoxigenin जांच विशिष्ट और संवेदनशील हैं। बायोटिन एक अन्य लेबल है जिसका उपयोग गैर-रेडियोधर्मी जांच की तैयारी में किया जाता है। बायोटिन/स्ट्रेप्टाविडिन और डिगॉक्सिजेनिन/एंटीबॉडी-डिटेक्शन सिस्टम संकरण में सबसे अधिक इस्तेमाल किए जाने वाले गैर-रेडियोधर्मी जांच हैं। इसके अलावा, हॉर्सरैडिश पेरोक्सीडेज सिस्टम एक अन्य गैर-रेडियोधर्मी जांच प्रणाली है। एक बार जब इन गैर-रेडियोधर्मी जांचों को लक्ष्य अनुक्रमों के साथ संकरणित किया जाता है, तो उन्हें ऑटोरैडियोग्राफी या अन्य इमेजिंग तकनीकों के माध्यम से पता लगाया जा सकता है।
चित्र 01: गैर-रेडियोधर्मी जांच के साथ संकरण
गैर-रेडियोधर्मी जांच का उपयोग रेडियोधर्मी जांच की तुलना में न्यूक्लिक एसिड संकरण में अधिक बार किया जाता है। ऐसा इसलिए है क्योंकि गैर-रेडियोधर्मी जांच खतरनाक सामग्री से जुड़ी नहीं हैं। इसके अलावा, गैर-रेडियोधर्मी पता लगाने के तरीकों को संकरण संकेत का पता लगाने के लिए कम जोखिम समय की आवश्यकता होती है। हालांकि, गैर-रेडियोधर्मी जांच के साथ डीएनए संकरण में शामिल कदम आमतौर पर थकाऊ और समय लेने वाले होते हैं। इसके अलावा, व्यावसायिक रूप से उपलब्ध समाधान महंगे हैं।
रेडियोधर्मी और गैर-रेडियोधर्मी जांच के बीच समानताएं क्या हैं?
- रेडियोधर्मी और गैर-रेडियोधर्मी जांच न्यूक्लिक एसिड संकरण में उपयोग की जाने वाली दो प्रकार की जांच हैं।
- वे नमूने में लक्ष्य अनुक्रमों का पता लगाने की सुविधा प्रदान करते हैं।
- दोनों प्रकार की जांच समान रूप से संवेदनशील और विशिष्ट होती है।
रेडियोधर्मी और गैर-रेडियोधर्मी जांच में क्या अंतर है?
रेडियोधर्मी जांच एकल-फंसे डीएनए या आरएनए अनुक्रम होते हैं जिन्हें रेडियोधर्मी आइसोटोप के साथ लेबल किया जाता है, जबकि गैर-रेडियोधर्मी जांच एकल-फंसे डीएनए या आरएनए अनुक्रम होते हैं जिन्हें रासायनिक टैग के साथ लेबल किया जाता है। तो, यह रेडियोधर्मी और गैर-रेडियोधर्मी जांच के बीच महत्वपूर्ण अंतर है। इसके अलावा, रेडियोधर्मी समस्थानिक खतरनाक हैं। इसलिए, रेडियोधर्मी जांच काफी खतरनाक हैं, जबकि गैर-रेडियोधर्मी जांच खतरनाक नहीं हैं।
इसके अलावा, रेडियोधर्मी और गैर-रेडियोधर्मी जांच के बीच एक और अंतर उनके नुकसान हैं। कम आधा जीवन और उनके उत्पादन, उपयोग और निपटान से जुड़े खतरे रेडियोधर्मी जांच का उपयोग करने के नुकसान हैं। दूसरी ओर, गैर-रेडियोधर्मी जांच के साथ डीएनए संकरण में शामिल कदम आमतौर पर थकाऊ और समय लेने वाले होते हैं।
नीचे इन्फोग्राफिक रेडियोधर्मी और गैर-रेडियोधर्मी जांच के बीच अंतर से संबंधित अधिक तुलना दिखाता है।
सारांश - रेडियोधर्मी बनाम गैर-रेडियोधर्मी जांच
एक जांच डीएनए या आरएनए का एक टुकड़ा है जिसमें एक न्यूक्लियोटाइड अनुक्रम होता है जो ब्याज के अनुक्रम का पूरक होता है। लक्ष्य अनुक्रम का पता लगाने के लिए, जांच को रेडियोधर्मी, फ्लोरोसेंटली या रासायनिक रूप से लेबल किया जा सकता है। जांच नमूने में पूरक अनुक्रमों के साथ बंधती है। रेडियोधर्मी जांच को रेडियोधर्मी आइसोटोप के साथ लेबल किया जाता है जबकि गैर-रेडियोधर्मी जांच को बायोटिन, डिगॉक्सिजेनिन या हॉर्सरैडिश पेरोक्सीडेज के साथ लेबल किया जाता है। इस प्रकार, यह रेडियोधर्मी और गैर-रेडियोधर्मी जांच के बीच महत्वपूर्ण अंतर है।
