मुख्य अंतर - आरएनएएसई ए बनाम आरएनएएसई एच
राइबोन्यूक्लिअस न्यूक्लियस हैं जो विशेष रूप से आरएनए को छोटी इकाइयों में नीचा दिखाते हैं। उन्हें दो श्रेणियों में विभाजित किया जा सकता है; एंडोरिबोन्यूक्लिअस और एक्सोरिबोन्यूक्लिअस। एंडोरिबोन्यूक्लीज एक एंडोन्यूक्लिज है जो या तो सिंगल स्ट्रैंडेड या डबल स्ट्रैंडेड आरएनए को नीचा दिखा सकता है। यह एक आरएनए पोलीन्यूक्लियोटाइड श्रृंखला के भीतर फॉस्फोडाइस्टर बांड को साफ करता है। उदाहरण हैं RNase A, RNase III, RNase T1, RNase P और RNase H। Exoribonuclease एक एक्सोन्यूक्लिज है जो RNA अणु के 5'end या 3'end से टर्मिनल न्यूक्लियोटाइड को हटाकर RNA को नीचा दिखाता है। उदाहरण हैं RNase R, RNase II, RNase D और RNase PH।RNASE A और RNASE H के बीच महत्वपूर्ण अंतर यह है कि RNase A एक अग्नाशयी राइबोन्यूक्लिज़ है जो विशेष रूप से एकल-फंसे हुए RNA को छोटे घटकों में नीचा दिखाता है जबकि RNase H एक गैर-विशिष्ट एंजाइम है जो RNA-DNA हाइब्रिड में RNA को छोटी इकाइयों में विभाजित करता है। हाइड्रोलाइटिक तंत्र।
आरएनएएसई ए क्या है?
RNase A एक अग्नाशयी राइबोन्यूक्लीज है जो विशेष रूप से एकल-फंसे RNA के 3' छोर पर अयुग्मित साइटोसिन और यूरैसिल अवशेषों को साफ करता है। RNase H उच्च नमक सांद्रता (0.3M या उच्च NaCl सांद्रता) पर काम करता है। हाइड्रोलाइटिक प्रतिक्रिया दो चरणों में होती है। यह 2', 3' चक्रीय मोनोफॉस्फेट मध्यवर्ती के माध्यम से 3' फॉस्फोराइलेटेड उत्पाद बनाता है। हालांकि यह उच्च नमक सांद्रता पर एकल-फंसे आरएनए के लिए विशिष्ट है, यह आरएनए-डीएनए हाइब्रिड में कम NaCl एकाग्रता (0.3M NaCl से कम) पर डबल-फंसे आरएनए और आरएनए को भी नीचा दिखा सकता है।
ब्रूस मेरीफिल्ड ने सबसे पहले इस एंजाइम का संश्लेषण किया। आणविक अनुसंधान में RNase A एक बहुत लोकप्रिय एंजाइम है।बोवाइन अग्नाशयी RNase A, RNase A का एक उदाहरण है। और यह प्रयोगशाला में उपयोग किए जाने वाले सबसे कठोर एंजाइमों में से एक है। इस एंजाइम को अपनी गतिविधि के लिए कोफ़ेक्टर की आवश्यकता नहीं होती है। यह एक अत्यधिक थर्मोस्टेबल एंजाइम है। RNase A पहला एंजाइम और तीसरा प्रोटीन है जिसमें एक सही अमीनो एसिड अनुक्रम का पता चला था। यह एंजाइम 124 अमीनो एसिड और 12600da के आणविक द्रव्यमान के साथ बहुत छोटा है। और इसमें चार हिस्टिडीन अवशेष (उनके 12 और उनके 119 जो उत्प्रेरक प्रतिक्रिया में शामिल हैं) हैं।
चित्र 01: RNase A
RNase A को कच्चे नमूने को उबालकर अलग किया जा सकता है। जब उबाल आता है, तो अन्य सभी एंजाइम शेष RNase A को नीचा दिखाते हैं। RNase A एक आश्चर्यजनक रूप से स्थिर एंजाइम है। यह एंजाइम राइबोन्यूक्लिअस इनहिबिटर प्रोटीन, भारी धातु और यूरिडीन वैनाडेट कॉम्प्लेक्स के साथ रोकता है।
RNase H क्या है?
RNase H एक गैर-विशिष्ट राइबोन्यूक्लिअस एंजाइम है जो हाइड्रोलाइटिक प्रतिक्रिया के माध्यम से आरएनए-डीएनए हाइब्रिड में आरएनए को नीचा दिखा सकता है। RNase H एक RNA-DNA हाइब्रिड में RNA के 3'- O-P बंधन को साफ करता है। अंततः यह 3'OH और 5' फॉस्फेट टर्मिनेटेड उत्पादों का उत्पादन करता है। डीएनए प्रतिकृति में यह नए डीएनए स्ट्रैंड बनने के बाद आरएनए प्राइमर को हटाकर एक महत्वपूर्ण भूमिका निभाता है। प्रयोगशाला स्थितियों में, यह विशेष रूप से आरएनए-डीएनए हाइब्रिड में आरएनए को कम करता है लेकिन डीएनए और अनहाइब्रिडाइज्ड आरएनए को नहीं। और यह एंजाइम आमतौर पर सीडीएनए संश्लेषण के दौरान पहले पूरक डीएनए स्ट्रैंड के बनने के बाद आरएनए टेम्पलेट को नष्ट करने के लिए उपयोग किया जाता है।
चित्र 02: RNase H
RNase H भी nuclease सुरक्षा परख में उपयोग करता है। इसे एमआरएनए से पॉली ए टेल को हटाने के लिए भी शामिल किया जा सकता है। RNase H में कोशिका के अंदर और बाहर गैर-कोडिंग RNA को नष्ट करने की क्षमता होती है।इस प्रोटीन गतिविधि के लिए सहकारक के रूप में धातु आयनों की आवश्यकता होती है। RNase H एंजाइम को रोकने के लिए एक chelator (EDTA) का उपयोग किया जा सकता है।
आरएनएएसई ए और आरएनएएसई एच के बीच समानताएं क्या हैं?
- दोनों प्रकृति में प्रोटीन हैं।
- दोनों एंडोरिबोन्यूक्लिअस हैं
- दोनों आरएनए को नीचा दिखा सकते हैं।
- दोनों हाइड्रोलाइटिक प्रतिक्रियाएं करते हैं।
- आणविक प्रयोगशालाएं इन दोनों का उपयोग करती हैं।
RNASE A और RNASE H में क्या अंतर है?
RNASE A बनाम RNASE H |
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| RNase A एक अग्नाशयी राइबोन्यूक्लीज है जो विशेष रूप से उच्च नमक सांद्रता पर एकल-फंसे RNA के अयुग्मित साइटोसिन और यूरैसिल अवशेषों के 3' छोर को साफ करता है। | RNase H एक गैर-विशिष्ट राइबोन्यूक्लिज़ एंजाइम है जो RNA-DNA संकर में हाइड्रोलाइटिक प्रतिक्रिया के माध्यम से RNA को नीचा दिखा सकता है। |
| आरएनए क्लीजिंग की प्रकृति | |
| RNase A विशेष रूप से एकल-फंसे RNA को उच्च नमक सांद्रता पर साफ करता है। | RNase H RNA-DNA हाइब्रिड में RNA को साफ करता है। |
| गतिविधि के लिए सह-कारकों की आवश्यकता | |
| RNase A को अपनी गतिविधि के लिए सहकारकों की आवश्यकता नहीं है। | RNase H को अपनी गतिविधि के लिए सहकारक के रूप में धातु आयनों की आवश्यकता होती है। |
| प्रोटीन गतिविधि के अवरोधक | |
| रिबोन्यूक्लिअस इनहिबिटर प्रोटीन, हेवी मेटल और यूरिडीन वेनाडेट कॉम्प्लेक्स RNAse A गतिविधि को रोकता है। | एक chelator (EDTA) RNase H गतिविधि को रोकता है। |
| डीएनए प्रतिकृति में आरएनए प्राइमर हटाना | |
| RNase A का उपयोग DNA प्रतिकृति में RNA प्राइमर हटाने के लिए नहीं किया जाता है। | RNase H का उपयोग DNA प्रतिकृति में RNA प्राइमर हटाने के लिए किया जाता है |
| पूरक डीएनए (सी-डीएनए) संश्लेषण में डीएनए टेम्पलेट हटाना | |
| RNase A का उपयोग पूरक डीएनए (C-DNA) संश्लेषण के दौरान RNA टेम्प्लेट हटाने के लिए नहीं किया जाता है। | RNase H का उपयोग पूरक डीएनए (C-DNA) संश्लेषण के दौरान RNA टेम्पलेट को हटाने के लिए किया जाता है। |
| एमआरएनए में पॉली-ए-टेल को हटाना ओलिगो (डीटी) के लिए हाइब्रिडाइज्ड | |
| RNase A का उपयोग mRNA में "पॉली-ए टेल" को हटाने के लिए नहीं किया जाता है, जिसे ओलिगो (डीटी) के लिए संकरणित किया जाता है। | RNase H का उपयोग mRNA में "पॉली-ए टेल" को हटाने के लिए किया जाता है, जो oligo (dt) में संकरित होता है |
सारांश - आरएनएएसई ए बनाम आरएनएएसई एच
राइबोन्यूक्लिअस न्यूक्लीज एंजाइम होते हैं जो आरएनए को छोटी इकाइयों में विभाजित करने की क्षमता रखते हैं। वे दो प्रकार के होते हैं; एंडोरिबोन्यूक्लिअस और एक्सोरिबोन्यूक्लिअस। एंडोरिबोन्यूक्लिज़ एक एंडोन्यूक्लिज़ है जिसमें सिंगल-स्ट्रैंडेड या डबल-स्ट्रैंडेड आरएनए को नीचा दिखाने की क्षमता होती है। और यह एक आरएनए पोलीन्यूक्लियोटाइड श्रृंखला के भीतर फॉस्फोडाइस्टर बंधन को साफ करता है। RNase A और RNase H दो एंडोरिबोन्यूक्लिअस हैं। RNase A एक अग्नाशयी राइबोन्यूक्लिएज है जो विशेष रूप से अयुग्मित साइटोसिन और यूरैसिल अवशेषों को उच्च नमक सांद्रता पर एकल-फंसे आरएनए के 3' छोर पर साफ करता है। RNase H एक गैर-विशिष्ट राइबोन्यूक्लिज़ एंजाइम है जो RNA-DNA हाइब्रिड में हाइड्रोलाइटिक प्रतिक्रिया के माध्यम से RNA को नीचा दिखा सकता है। RNase A और RNase H के बीच यही अंतर है।
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