मुख्य अंतर - एचपीएलसी बनाम एचपीटीएलसी
एचपीएलसी और एचपीटीएलसी के बीच मुख्य अंतर यह है कि एचपीएलसी एक नमूने में घटकों के मात्रात्मक पृथक्करण की अनुमति देता है जबकि एचपीटीएलसी एक नमूने में घटकों के मात्रात्मक पृथक्करण की अनुमति नहीं देता है।
क्रोमैटोग्राफी एक भौतिक पृथक्करण विधि है जिसका उपयोग मिश्रण में घटकों को अलग करने और पहचानने के लिए किया जाता है। एचपीएलसी और एचपीटीएलसी दोनों क्रोमैटोग्राफिक तकनीक हैं। एचपीएलसी उच्च प्रदर्शन तरल क्रोमैटोग्राफी है। एचपीटीएलसी उच्च प्रदर्शन पतली परत क्रोमैटोग्राफी है।
एचपीएलसी क्या है?
एचपीएलसी उच्च प्रदर्शन वाली तरल क्रोमैटोग्राफी है। यह एक विश्लेषणात्मक तकनीक है जिसका उपयोग मिश्रण में घटकों को अलग करने, पहचानने और मात्रा निर्धारित करने के लिए किया जाता है।इस तकनीक में, नमूना एक उपयुक्त विलायक में भंग कर दिया जाता है। फिर नमूने के साथ विलायक को एक पंप के माध्यम से दिए गए दबाव के साथ पारित किया जाता है। पंप ठोस सोखना सामग्री से भरा है। फिर कुछ घटक शोषक सामग्री से मजबूती से बंधते हैं जबकि अन्य घटक शिथिल रूप से बंधते हैं। यह घटकों को पंप के माध्यम से अलग-अलग प्रवाह दर का कारण बनता है। इसलिए, घटकों को आसानी से अलग किया जा सकता है।
चित्र 01: एक एचपीएलसी प्रणाली
पंप को भरने वाले सोखने वाले पदार्थ को स्थिर चरण के रूप में जाना जाता है। घुले हुए नमूने वाले विलायक को चल प्रावस्था के रूप में जाना जाता है। इस तकनीक में इस्तेमाल होने वाले पंप को कॉलम कहा जाता है। स्तंभ एक सोखना सामग्री से भरा होता है, सबसे अधिक, सिलिका कण। इन कणों का आकार 2-50 माइक्रोन तक हो सकता है। पृथक्करण प्रक्रिया मोबाइल चरण की संरचना और सिस्टम के तापमान से प्रभावित होती है।नमूने में स्थिर चरण और घटक के बीच की बातचीत हाइड्रोफोबिक इंटरैक्शन, द्विध्रुवीय-द्विध्रुवीय इंटरैक्शन, आयनिक बॉन्डिंग आदि हो सकती है।
एचपीएलसी का संचालन दबाव पारंपरिक तरल क्रोमैटोग्राफी की तुलना में काफी अधिक है। यह लगभग 50-350 बार है। तरल क्रोमैटोग्राफी और एचपीएलसी के बीच अंतर यह है कि तरल क्रोमैटोग्राफी में, नमूना गुरुत्वाकर्षण के तहत स्तंभ के माध्यम से गिरता है, जबकि एचपीएलसी में, स्तंभ के माध्यम से नमूना दबाव डाला जाता है। पारंपरिक तरल क्रोमैटोग्राफी की तुलना में स्तंभ और शोषक कणों का आकार भी बहुत छोटा होता है। हालांकि, एचपीएलसी तकनीक द्वारा दिया गया संकल्प बेहतर है।
एचपीटीएलसी क्या है?
HPTLC उच्च प्रदर्शन पतली परत क्रोमैटोग्राफी है। यह पारंपरिक टीएलसी का उन्नत और स्वचालित रूप है। यह तकनीक कम समय में एक कुशल समाधान प्रदान करती है। विश्लेषण की इस पद्धति में, नमूने और संदर्भ का एक ही समय में विश्लेषण किया जा सकता है, जो नमूने की तुलना संदर्भ के साथ करने की अनुमति देता है।यह अन्य क्रोमैटोग्राफिक तकनीकों की तुलना में बेहतर विश्लेषणात्मक सटीकता देता है। विश्लेषण में लगने वाला समय कम है। तकनीक एक कम लागत वाली तकनीक है।
चित्र 02: एचपीटीएलसी का उपयोग करके खाद्य रंगों का विश्लेषण
HPTLC विधि एक सरल प्रक्रिया है, और नमूना तैयार करने का चरण भी समाप्त हो जाता है (पारंपरिक TLC में, नमूना तैयार करने के चरण को पृथक्करण से पहले शामिल किया जाता है। इस चरण में सफाई और संवर्धन शामिल है)। विलायक को बिना किसी पूर्व-उपचार के सीधे उपयोग किया जा सकता है, हालांकि अन्य क्रोमैटोग्राफिक तकनीकों के लिए पूर्व-उपचार की आवश्यकता होती है जैसे कि डिगैसिंग, निस्पंदन, आदि।
HPTLC में प्रयुक्त adsorbent सामग्री बहुत छोटे कण आकार के साथ सिलिका है। पारंपरिक टीएलसी में, सिलिका का कण आकार 5-20 माइक्रोन होता है, जबकि एचपीटीएलसी में यह 4-8 माइक्रोन होता है। एप्लीकेटर का उपयोग करके नमूना एचपीटीएलसी प्लेट पर लगाया जाता है।यह एक समान और सुरक्षित अनुप्रयोग देता है। फिर प्लेटों को मोबाइल फेज वाले कक्ष में रखा जाता है। कक्ष को मोबाइल चरण के वाष्प से संतृप्त किया जाना चाहिए। एचपीटीएलसी प्रक्रिया के बाद, जो धब्बे चले गए हैं, उनका पता लगाया जा सकता है। प्लेट पर धब्बे का पता लगाते समय, एचपीटीएलसी तकनीक उपयुक्त यूवी क्षेत्र या आयोडीन कक्ष का उपयोग करती है।
एचपीएलसी और एचपीटीएलसी में क्या अंतर है?
एचपीएलसी बनाम एचपीटीएलसी |
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| एचपीएलसी उच्च प्रदर्शन तरल क्रोमैटोग्राफी है। | HPTLC उच्च प्रदर्शन पतली परत क्रोमैटोग्राफी है। |
| तकनीक | |
| एचपीएलसी में, सॉल्वेंट के साथ मोबाइल फेज को स्थिर फेज से भरे कॉलम से गुजारा जाता है। | एचपीटीएलसी में, नमूना एक टीएलसी प्लेट पर देखा जाता है और मोबाइल चरण वाले कक्ष के अंदर रखा जाता है; तब नमूने को मोबाइल चरण के साथ प्लेट के ऊपर की ओर माइग्रेट करने की अनुमति दी जाती है। |
| माप | |
| एचपीएलसी में, कॉलम के माध्यम से घटकों की प्रवाह दर के बीच अंतर का उपयोग नमूने में घटकों को अलग करने के लिए किया जाता है। | HPTLC में, नमूने में प्रत्येक घटक द्वारा तय की गई दूरी के बीच के अंतर का उपयोग नमूने में घटकों को अलग करने के लिए किया जाता है। |
| मात्रात्मक पृथक्करण | |
| एचपीएलसी एक नमूने में घटकों के मात्रात्मक पृथक्करण की अनुमति देता है। | एचपीटीएलसी नमूने में घटकों के मात्रात्मक पृथक्करण की अनुमति नहीं देता है। |
सारांश - एचपीएलसी बनाम एचपीटीएलसी
एचपीएलसी और एचपीटीएलसी दो क्रोमैटोग्राफिक तकनीकें हैं। एचपीएलसी और एचपीटीएलसी के बीच महत्वपूर्ण अंतर यह है कि एचपीएलसी एक नमूने में घटकों के मात्रात्मक पृथक्करण की अनुमति देता है जबकि एचपीटीएलसी एक नमूने में घटकों के मात्रात्मक पृथक्करण की अनुमति नहीं देता है।
