वैद्युतकणसंचलन बनाम इलेक्ट्रोस्मोसिस
कुछ अणुओं को अलग करने के लिए फ़िल्टरिंग, डिस्टिलेशन, कॉलम क्रोमैटोग्राफी जैसी भौतिक पृथक्करण विधियाँ आसान विधियाँ नहीं हैं। वैद्युतकणसंचलन और इलेक्ट्रो-ऑस्मोसिस दो अन्य पृथक्करण तकनीकें हैं जिनका उपयोग आवेशित कणों को अलग करने के लिए किया जा सकता है।
वैद्युतकणसंचलन क्या है?
इलेक्ट्रोफोरेसिस अणुओं को उनके आकार के आधार पर अलग करने की एक तकनीक है। इस पृथक्करण के लिए मौलिक अणु का आवेश और विद्युत क्षेत्र में गति करने की उनकी क्षमता है। आणविक जीव विज्ञान में अणुओं, विशेष रूप से डीएनए और प्रोटीन को अलग करने के लिए यह सबसे आम और मुख्य तकनीक है।यह ज्यादातर उपयोग में है क्योंकि यह अपेक्षाकृत आसान और सस्ता है। वैद्युतकणसंचलन के लिए उपकरण थोड़ा जटिल हो सकता है, और इसकी तैयारी में कुछ समय लगता है। लेकिन हम प्रयोगशाला में मौजूद चीजों से आसानी से वैद्युतकणसंचलन उपकरण बना सकते हैं। वैद्युतकणसंचलन तकनीक हमारे उद्देश्यों के आधार पर भिन्न हो सकती है। हम डीएनए या प्रोटीन के पृथक्करण के लिए एक आयामी वैद्युतकणसंचलन का उपयोग कर सकते हैं। दो आयामी वैद्युतकणसंचलन का उपयोग तब किया जाता है जब अधिक हल किए गए नमूनों की आवश्यकता होती है (जैसे कि फिंगर प्रिंटिंग के मामले में)। एक जेल का उपयोग अणुओं को अलग करने के लिए समर्थन माध्यम के रूप में किया जाता है। इस जेल को फ्लैट शीट या ट्यूब में तैयार किया जा सकता है। इस प्रक्रिया का आधार एक विद्युत क्षेत्र की आपूर्ति होने पर एक जेल के माध्यम से गति की दर के आधार पर अणुओं को अलग करना है। डीएनए जैसे ऋणात्मक आवेशित अणु इस विद्युत क्षेत्र में धनात्मक ध्रुव की ओर जाते हैं जबकि धनात्मक आवेशित अणु ऋणात्मक ध्रुव की यात्रा करते हैं। वैद्युतकणसंचलन में दो प्रकार के जैल का उपयोग agarose और polyacrylamide के रूप में किया जाता है।इन दोनों की संकल्प शक्ति अलग-अलग है। जेल विभिन्न आकारों के अणुओं को छानने के लिए एक छलनी के रूप में कार्य करता है। जेल में स्थापित इलेक्ट्रोस्टैटिक चार्ज बल के रूप में कार्य करते हैं।
पृथक्करण आयनों की गतिशीलता पर निर्भर करता है।
F=fv=ZeE
वी=ज़ी/एफ
F=किसी कण पर लगने वाला बल
f=घर्षण गुणांक
V=औसत प्रवास वेग
Z=माइग्रेट करने वाले कण का आवेश
ई=प्रारंभिक प्रभार
E=विद्युत क्षेत्र की ताकत
वैद्युतकणसंचलन के लिए आवश्यक शर्तें अपेक्षाकृत सरल हैं। जेल बनाते समय और नमूना चलाते समय, एक बफर का उपयोग किया जाता है। विज़ुअलाइज़ेशन उद्देश्यों के लिए मार्करों और रंगों का उपयोग किया जाता है।
इलेक्ट्रो-ऑस्मोसिस क्या है?
यह एक लागू विद्युत क्षेत्र का उपयोग करके एक सामग्री के माध्यम से एक तरल को स्थानांतरित करने की प्रक्रिया है। आंदोलन एक छिद्रपूर्ण सामग्री के माध्यम से, एक केशिका, झिल्ली आदि के साथ हो सकता है।इसका उपयोग पृथक्करण तकनीक (विशेष रूप से केशिका इलेक्ट्रो-ऑस्मोसिस) के रूप में किया जा सकता है। तरल का वेग लागू विद्युत क्षेत्र के रैखिक रूप से आनुपातिक है। यह चैनल बनाने के लिए प्रयुक्त सामग्री और उपयोग किए गए समाधान पर भी निर्भर है। इंटरफेस में, समाधान और सामग्री ने विपरीत शुल्क प्राप्त किए हैं और इसे विद्युत दोहरी परत के रूप में जाना जाता है। जब एक विद्युत क्षेत्र को समाधान पर लागू किया जाता है, तो विद्युत दोहरी परत परिणामी कूलम्ब बल द्वारा चलती है। इसे विद्युत-आसमाटिक प्रवाह के रूप में जाना जाता है।
वैद्युतकणसंचलन और इलेक्ट्रो-ऑस्मोसिस में क्या अंतर है?
• वैद्युतकणसंचलन में, ठोस कणों (न्यूक्लिक एसिड या प्रोटीन जैसे मैक्रोमोलेक्यूल्स) को विद्युत क्षेत्र का उपयोग करके स्थानांतरित किया जाता है। लेकिन इलेक्ट्रो-ऑस्मोसिस में एक तरल चल रहा है।
• वैद्युतकणसंचलन में, समर्थन ठोस सामग्री एक जेल है। लेकिन यह इलेक्ट्रो-ऑस्मोसिस यह एक जेल, झिल्ली, केशिका, आदि हो सकता है।
