एचपीएलसी और यूपीएलसी के बीच मुख्य अंतर यह है कि एचपीएलसी लगभग 5 माइक्रोमीटर के आकार वाले कणों के विश्लेषण की अनुमति देता है जबकि यूपीएलसी 2 माइक्रोमीटर के आसपास बहुत छोटे कणों की अनुमति देता है।
एचपीएलसी और यूपीएलसी दोनों लिक्विड क्रोमैटोग्राफिक तकनीक हैं जो एक यौगिक के घटकों को अलग करने में उपयोगी हैं। एचपीएलसी और यूपीएलसी के बीच अंतर जानने के लिए, हमें सबसे पहले यह जानना होगा कि एचपीएलसी क्या है। ऐसा इसलिए है क्योंकि UPLC HPLC का एक विशेष संस्करण है और हम इसे आसानी से समझ सकते हैं यदि हम जानते हैं कि HPLC क्या है।
एचपीएलसी क्या है?
एचपीएलसी शब्द हाई परफॉर्मेंस लिक्विड क्रोमैटोग्राफी के लिए है।यह एक ऐसी तकनीक है जिसका उपयोग हम किसी यौगिक के विभिन्न घटकों को अलग करने के लिए कर सकते हैं। साथ ही, यह मिश्रण के घटकों को पहचानने, परिमाणित करने और अलग करने के लिए सबसे व्यापक रूप से इस्तेमाल की जाने वाली तकनीक है। इसके अलावा, यह तकनीक सॉल्वैंट्स को कॉलम के माध्यम से धकेलने के लिए उच्च दबाव का उपयोग करती है। इसके अलावा, एचपीएलसी के प्रमुख अनुप्रयोग एक यौगिक के घटकों के विश्लेषण के लिए जैव रसायन में हैं। यह अमीनो एसिड, न्यूक्लिक एसिड, प्रोटीन, हाइड्रोकार्बन, कीटनाशक, कार्बोहाइड्रेट, एंटीबायोटिक्स, स्टेरॉयड और अनगिनत अन्य अकार्बनिक पदार्थों को अलग करने और पहचानने का एक आदर्श तरीका है।
चित्र 01: प्रयोगशाला में एचपीएलसी प्रणाली
संक्षेप में एचपीएलसी तकनीक के संचालन की विधि इस प्रकार है। सबसे पहले, हमें एक पंप का उपयोग करके असतत छोटी मात्रा में नमूना को मोबाइल चरण की धारा में पेश करना चाहिए।पंप का दबाव 40 एमपीए पर बनाए रखा जाना चाहिए। फिर, मोबाइल चरण की यह धारा एचपीएलसी के कॉलम के माध्यम से फैलती है। साथ ही, नमूने के घटक कॉलम से होकर गुजरते हैं। हालाँकि, उनकी गति की गति एक दूसरे से भिन्न होती है। यह अंतर नमूना घटकों और स्तंभ के अंदर अधिशोषक के बीच परस्पर क्रिया में अंतर के कारण उत्पन्न होता है। हम इस अधिशोषक को स्थिर प्रावस्था कहते हैं क्योंकि यह स्तंभ के भीतर रहता है (गतिमान नहीं)। दूसरे, कॉलम के अंत में, हम उस नमूने को एकत्र कर सकते हैं जो कॉलम से निकलता है। वहां हम नमूने में प्रत्येक घटक के लिए अवधारण समय में अंतर निर्धारित कर सकते हैं।
यूपीएलसी क्या है?
UPLC शब्द अल्ट्रा हाई-परफॉर्मेंस लिक्विड क्रोमैटोग्राफी के लिए है। यह एचपीएलसी का एक रूपांतर है, लेकिन संचालन की विधि समान है। हालांकि, एचपीएलसी के विपरीत, यह विधि बहुत छोटे कणों का विश्लेषण करने की अनुमति देती है, जैसे कि 2 माइक्रोमीटर छोटे कण।
चित्र 02: एक यूपीएलसी डिवाइस
इसके अलावा, यह एक तेज़ विश्लेषण प्रदान करता है। इस तकनीक में, हम कॉलम में नमूना डालने के लिए 100 एमपीए पंप दबाव का उपयोग करते हैं। इसलिए, यह उच्च दबाव पुष्टि करता है कि पूरे नमूने को कॉलम में पेश किया गया है। इस प्रकार, यह एचपीएलसी की तुलना में बहुत कुशल है।
एचपीएलसी और यूपीएलसी में क्या अंतर है?
एचपीएलसी शब्द उच्च प्रदर्शन तरल क्रोमैटोग्राफी के लिए है जबकि यूपीएलसी शब्द अल्ट्रा हाई परफॉर्मेंस लिक्विड क्रोमैटोग्राफी के लिए है। इसलिए, यूपीएलसी तकनीक एचपीएलसी का विकसित संस्करण है। इस प्रकार, दोनों तकनीकों के लिए संचालन की विधि समान है। हालांकि, एचपीएलसी की तुलना में यूपीएलसी अधिक कुशल है क्योंकि यह एक उच्च पंप दबाव का उपयोग करता है; एचपीएलसी के लिए पंप का दबाव 40 एमपीए है जबकि यूपीएलसी के लिए यह 100 एमपीए है। इसलिए, यह एचपीएलसी और यूपीएलसी के बीच का अंतर है।इन सबसे ऊपर, एचपीएलसी और यूपीएलसी के बीच महत्वपूर्ण अंतर यह है कि एचपीएलसी लगभग 5 माइक्रोमीटर के आकार वाले कणों के विश्लेषण की अनुमति देता है जबकि यूपीएलसी 2 माइक्रोमीटर के आसपास बहुत छोटे कणों की अनुमति देता है।
सारांश - एचपीएलसी बनाम यूपीएलसी
UPLC HPLC का ही एक रूप है। इस प्रकार, ऑपरेशन के तरीके समान हैं। लेकिन, हम एचपीएलसी की तुलना में यूपीएलसी में कुछ बेहतर सुविधाएं पा सकते हैं। इसलिए, HPLC और UPLC में कुछ अंतर है। हालांकि, एचपीएलसी और यूपीएलसी के बीच महत्वपूर्ण अंतर यह है कि एचपीएलसी लगभग 5 माइक्रोमीटर के आकार वाले कणों के विश्लेषण की अनुमति देता है जबकि यूपीएलसी 2 माइक्रोमीटर के आसपास बहुत छोटे कणों की अनुमति देता है।
