टी4 डीएनए लिगेज और ई. कोलाई डीएनए लिगेज के बीच महत्वपूर्ण अंतर यह है कि टी4 डीएनए लिगेज एक एंजाइम है जो बैक्टीरियोफेज टी4 से अलग होता है जबकि ई. कोलाई डीएनए लिगेज एक एंजाइम है जो बैक्टीरिया ई. कोलाई से अलग होता है।.
डीएनए लिगेज एक विशिष्ट प्रकार का एंजाइम है जो फॉस्फोडाइस्टर बॉन्ड के निर्माण के माध्यम से डीएनए स्ट्रैंड्स को एक साथ जोड़ने की सुविधा प्रदान करता है। यह जीवित जीवों के डीएनए में सिंगल-स्ट्रैंड ब्रेक और डबल-स्ट्रैंड ब्रेक की मरम्मत करके महत्वपूर्ण भूमिका निभाता है। इसके अलावा, डीएनए लिगेज का उपयोग डीएनए मरम्मत और डीएनए प्रतिकृति दोनों में किया जाता है। उपरोक्त उपयोगों के अलावा, डीएनए लिगेज का आणविक जीव विज्ञान प्रयोगों जैसे कि पुनः संयोजक डीएनए प्रौद्योगिकी में भी व्यापक उपयोग होता है।T4 डीएनए लिगेज और ई. कोलाई डीएनए लिगेज दो प्रकार के डीएनए लिगेज एंजाइम हैं।
T4 डीएनए लिगेज क्या है?
T4 लिगेज एक डीएनए जॉइनिंग एंजाइम है जो बैक्टीरियोफेज T4 से अलग होता है। T4 बैक्टीरियोफेज एक वायरस है जो एस्चेरिचिया कोलाई को संक्रमित करता है। T4 लिगेज एंजाइम आणविक जैविक प्रयोगशाला अनुसंधान में सबसे अधिक इस्तेमाल किया जाने वाला डीएनए लिगेज है। आम तौर पर, T4 लिगेज आसन्न न्यूक्लियोटाइड के 5 'फॉस्फेट और 3' हाइड्रॉक्सिल समूहों के बीच डबल-स्ट्रैंड डीएनए के दो एकजुट या ब्लंट-एंडेड स्ट्रैंड्स के जुड़ने को उत्प्रेरित करता है। यह डुप्लेक्स अणु में डीएनए या आरएनए स्ट्रैंड में आरएनए के जुड़ने को भी उत्प्रेरित कर सकता है। हालांकि, यह एंजाइम एकल-फंसे हुए न्यूक्लिक एसिड में शामिल नहीं होगा। इसके अलावा, यह ई. कोलाई डीएनए लिगेज की तुलना में बहुत अधिक दक्षता के साथ ब्लंट-एंडेड डीएनए को भी जोड़ सकता है।
चित्र 01: T4 डीएनए लिगेज
इस एंजाइम को सहकारक के रूप में एटीपी की आवश्यकता होती है। कुछ आनुवंशिक इंजीनियरिंग अनुसंधान प्रयोगों ने पहले से ही जंगली प्रकार के T4 डीएनए लिगेज की तुलना में अधिक सक्रिय डीएनए लिगेज एंजाइम का उत्पादन किया है। एक दृष्टिकोण में, उन्होंने T4 डीएनए लिगेज को p50 या NF-kB अणु में मिला कर एक फ्यूजन एंजाइम अणु बनाया। यह नया T4 लिगेज एंजाइम जंगली प्रकार के T4 डीएनए लिगेज की तुलना में क्लोनिंग उद्देश्यों के लिए ब्लंट-एंड लिगेज में 160% अधिक सक्रिय था। इसके अलावा, टी4 डीएनए लिगेज के लिए लिगेशन प्रतिक्रिया को अधिक सटीक रूप से उत्प्रेरित करने के लिए इष्टतम तापमान 16 डिग्री सेल्सियस है।
ई कोलाई डीएनए लिगेज क्या है?
ई. कोलाई डीएनए लिगेज एक एंजाइम है जो ई. कोलाई बैक्टीरिया से पृथक होता है। ई कोलाई डीएनए लिगेज बनाने के लिए जिम्मेदार जीन लिग जीन है। ई. कोलाई डीएनए, लिगेज और साथ ही अधिकांश प्रोकैरियोट्स डीएनए लिगेज, फॉस्फोडाइस्टर बंधन बनाने के लिए एनएडी (निकोटिनामाइड एडेनिन डाइन्यूक्लियोटाइड) द्वारा प्राप्त ऊर्जा का उपयोग करते हैं।
चित्र 02: ई. कोलाई डीएनए लिगेज
ई. कोलाई डीएनए लिगेज एक लिगेशन एंजाइम है जो 5' फॉस्फेट टर्मिनी और 3 'हाइड्रॉक्सिल टर्मिनी युक्त डबल-स्ट्रैंडेड डीएनए टुकड़ों के बीच फॉस्फोडाइस्टर बॉन्ड के निर्माण को उत्प्रेरित करके डीएनए टुकड़ों में शामिल हो सकता है। इसके अलावा, यह पॉलीइथाइलीन ग्लाइकॉल के साथ आणविक भीड़ जैसी विशेष परिस्थितियों को छोड़कर ब्लंट-एंडेड डीएनए को लिगेट नहीं करता है। यह आरएनए को डीएनए में कुशलता से शामिल नहीं कर सकता है। इसके अलावा, ई. कोलाई डीएनए लिगेज की गतिविधि को सही सांद्रता में डीएनए पोलीमरेज़ 1 की उपस्थिति से बढ़ाया जा सकता है। हालांकि, जब डीएनए पोलीमरेज़ 1 एंजाइम की सांद्रता अधिक होती है, तो इसका ई. कोलाई डीएनए लिगेज गतिविधि पर प्रतिकूल प्रभाव पड़ता है।
T4 डीएनए लिगेज और ई कोलाई डीएनए लिगेज के बीच समानताएं क्या हैं?
- T4 डीएनए लिगेज और ई-कोलाई डीएनए लिगेज दो प्रकार के डीएनए लिगेज एंजाइम हैं।
- दोनों अमीनो एसिड से बने प्रोटीन हैं।
- ये एंजाइम डुप्लेक्स डीएनए में 5' फॉस्फेट और 3' हाइड्रॉक्सिल टर्मिनी के बीच एक फॉस्फोडाइस्टर बंधन के गठन को उत्प्रेरित करते हैं।
- आणविक जीव विज्ञान के प्रयोगों जैसे कि पुनः संयोजक डीएनए प्रौद्योगिकी में उनका व्यापक उपयोग है।
T4 DNA Ligase और E Coli DNA Ligase में क्या अंतर है?
T4 डीएनए लिगेज एक एंजाइम है जो बैक्टीरियोफेज टी 4 से अलग होता है जबकि ई कोलाई डीएनए लिगेज एक एंजाइम है जो ई कोलाई बैक्टीरिया से अलग होता है। इस प्रकार, यह T4 डीएनए लिगेज और ई। कोलाई डीएनए लिगेज के बीच महत्वपूर्ण अंतर है। इसके अलावा, T4 डीएनए लिगेज के लिए ऊर्जा का स्रोत एटीपी है। दूसरी ओर, ई. कोलाई डीएनए लिगेज के लिए ऊर्जा का स्रोत एनएडी है।
नीचे दिए गए इन्फोग्राफिक में टी4 डीएनए लिगेज और ई कोलाई डीएनए लिगेज के बीच अंतर को सारणीबद्ध रूप में एक साथ तुलना के लिए प्रस्तुत किया गया है।
सारांश - T4 डीएनए लिगेज बनाम ई कोलाई डीएनए लिगेज
T4 डीएनए लिगेज और ई. कोलाई डीएनए लिगेज दो एंजाइम हैं जो डुप्लेक्स डीएनए में 5' फॉस्फेट और 3' हाइड्रॉक्सिल टर्मिनी के बीच फॉस्फोडाइस्टर बंधन के गठन को उत्प्रेरित करते हैं। T4 लिगेज एक एंजाइम है जो बैक्टीरियोफेज T4 से अलग होता है जबकि E. कोलाई डीएनए लिगेज एक एंजाइम है जो E. कोलाई बैक्टीरिया से अलग होता है। तो, यह T4 डीएनए लिगेज और ई कोलाई डीएनए लिगेज के बीच महत्वपूर्ण अंतर है।