CRISPR और CRISPR Cas9 के बीच महत्वपूर्ण अंतर यह है कि CRISPR (क्लस्टर नियमित रूप से इंटरस्पेस्ड शॉर्ट पैलिंड्रोमिक रिपीट) एक स्वाभाविक रूप से होने वाली प्रोकैरियोटिक प्रतिरक्षा रक्षा तंत्र है जबकि CRISPR cas9 एक RNA- निर्देशित Cas9 न्यूक्लियस है जो CRISPR अनुकूली का एक हिस्सा है। प्रतिरक्षा प्रणाली।
CRISPR बैक्टीरिया और आर्किया में पाया जाने वाला एक एंटीवायरल डिफेंस इम्यून सिस्टम है। यह जीवाणु जीनोम में पाए जाने वाले डीएनए अनुक्रमों का एक परिवार है। इसमें स्पेसर सीक्वेंस होते हैं जो बैक्टीरियोफेज के डीएनए अंशों से प्राप्त होते हैं जिन्होंने पहले उन्हें संक्रमित किया था। बाद के वायरल संक्रमणों में, बैक्टीरिया इन अनुक्रमों का उपयोग वायरल डीएनए को नष्ट करने के लिए करते हैं।CRISPR सीक्वेंस में छोटे पैलिंड्रोमिक रिपीट और स्पेसर सीक्वेंस होते हैं। इसके अलावा, CRISPR रिपीट स्पेसर सीक्वेंस में अक्सर संबद्ध जीन होते हैं जो कैस प्रोटीन के लिए कोड होते हैं। Cas9 एक RNA निर्देशित एंडोन्यूक्लिज़ है। CRISPR अनुक्रमों के साथ, Cas9 प्रोटीन बैक्टीरियोफेज के खिलाफ बैक्टीरिया में एक अनुकूली प्रतिरक्षा प्रणाली के रूप में कार्य करता है।
CRISPR क्या है?
CRISPR का मतलब क्लस्टर्ड रेगुलर इंटरस्पेस्ड शॉर्ट पैलिंड्रोमिक रिपीट है। यह जीवाणु जीनोम में पाए जाने वाले डीएनए अनुक्रमों का एक समूह है। यह बैक्टीरिया में एक प्राकृतिक रक्षा तंत्र के रूप में काम करता है, और इसे सबसे पहले ई. कोलाई में पहचाना गया था। बैक्टीरिया में, यह विशेष रूप से बैक्टीरियोफेज के खिलाफ अनुकूली प्रतिरक्षा सुरक्षा के रूप में कार्य करता है। इसलिए, यह एक अनुक्रम-विशिष्ट तंत्र है।
चित्र 01: CRISPR
CRISPR सिस्टम में कई शॉर्ट-सेगमेंट डीएनए रिपीट सीक्वेंस होते हैं।ये दोहराव पैलिंड्रोमिक होते हैं, जिनका आधार क्रम 5' से 3' तक पढ़ने पर समान होता है जबकि दूसरा 3' से 5' तक पढ़ते समय समान अनुक्रम देता है। इसके अलावा, दोहराव समान हैं। वे छोटे "स्पेसर" डीएनए अनुक्रमों के बीच स्थित हैं जो समान नहीं हैं। लेकिन ये स्पेसर डीएनए सीक्वेंस विदेशी बैक्टीरियोफेज डीएनए के समान या मेल खाते हैं। सीआरआईएसपीआर से जुड़े जीन को सीआरआईएसपीआर से जुड़े जीन या कैस जीन के रूप में जाना जाता है। कैस प्रोटीन के लिए कैस जीन कोड जो हेलीकेस या न्यूक्लीज हैं। हेलीकॉप्टर डीएनए को खोलते हैं जबकि न्यूक्लीज डीएनए को काटते हैं। कुल मिलाकर, जब CRISPR पर विचार किया जाता है, तो यह बैक्टीरिया की एक प्रतिरक्षा प्रणाली है जो बैक्टीरियोफेज (वायरस को संक्रमित करने वाले बैक्टीरिया) के खिलाफ काम करती है।
CRISPR Cas9 क्या है?
Cas9 या CRISPR संबद्ध प्रोटीन 9 एक जीवाणु RNA-निर्देशित एंडोन्यूक्लिज़ है। इसलिए, यह एक एंजाइम है जो गाइड आरएनए के पूरक लक्ष्य डीएनए (विशेषकर बैक्टीरियोफेज डीएनए) को पहचानता है और काटता है। यह स्ट्रैंड-विशिष्ट क्लेवाज करता है। Cas9 प्रोटीन को CRISPR संबद्ध जीन द्वारा कोडित किया जाता है।CRISPR cas9 RNA-निर्देशित CRISPR-Cas9 न्यूक्लियस सिस्टम है जिसे जीनोम एडिटिंग, ट्रांसक्रिप्शनल परटरबेशन, एपिजेनेटिक मॉड्यूलेशन और जीनोम इमेजिंग के लिए RNA-प्रोग्रामेबल डीएनए टारगेटिंग और एडिटिंग प्लेटफॉर्म के रूप में इस्तेमाल किया जा सकता है। यह CRISPR cas9 प्रणाली वर्तमान जीनोम संपादन प्रणालियों में बहुत लोकप्रिय है।
चित्र 02: CRISPR Cas9
वर्तमान में, CRISPR/Cas9 प्रणाली का उपयोग ट्रांसक्रिप्शन दमन या सक्रियण द्वारा स्तनधारी जीनोम को बदलने या संशोधित करने के लिए किया जाता है। स्तनधारी कोशिकाएं एक मरम्मत तंत्र को अपनाकर CRISPR/Cas9 की मध्यस्थता वाले डीएनए ब्रेक का जवाब दे सकती हैं। यह या तो नॉन-होमोलॉगस एंड जॉइनिंग मेथड (NHEJ) या होमोलॉजी-डायरेक्टेड रिपेयर (HDR) का उपयोग करके किया जा सकता है। ये दोनों मरम्मत तंत्र डबल-स्ट्रैंडेड ब्रेक पेश करके होते हैं। इसका परिणाम स्तनधारी जीन संपादन में होता है।NHEJ जीन उत्परिवर्तन को समाप्त कर सकता है और इसका उपयोग फ़ंक्शन प्रभावों के नुकसान को पैदा करने के लिए किया जा सकता है। एचडीआर का उपयोग विशिष्ट बिंदु उत्परिवर्तन शुरू करने या अलग-अलग लंबाई के डीएनए खंडों को पेश करने के लिए किया जा सकता है। वर्तमान में, चिकित्सीय, जैव चिकित्सा, कृषि और अनुसंधान अनुप्रयोगों के क्षेत्र में CRISPR/Cas प्रणाली का उपयोग किया जाता है।
CRISPR और CRISPR Cas9 में क्या समानताएं हैं?
- Cas9 CRISPR कैस सिस्टम का एक हिस्सा है।
- क्रिस्पर कैस9 सिस्टम एक प्रतिरक्षा प्रणाली है जो स्वाभाविक रूप से बैक्टीरिया में पाई जाती है।
CRISPR और CRISPR Cas9 में क्या अंतर है?
CRISPR जीवाणु जीनोम में पाए जाने वाले डीएनए अनुक्रमों का एक समूह है जो बैक्टीरियोफेज के खिलाफ एक प्राकृतिक रक्षा प्रणाली के रूप में काम करता है। इसमें नियमित रूप से अंतर-अंतराल वाले छोटे पैलिंड्रोमिक दोहराव, स्पेसर और संबंधित जीन होते हैं। इसके विपरीत, CAS9 एक CRISPR संबद्ध प्रोटीन 9 है, जो एक RNA निर्देशित एंडोन्यूक्लिज़ एंजाइम है।यह डीएनए डबल स्ट्रैंड्स के वायरस को पहचानता है और साफ करता है। वास्तव में, यह CRISPR रक्षा प्रणाली का एक हिस्सा है। तो, यह CRISPR और CRISPR cas9 के बीच महत्वपूर्ण अंतर है।
सारांश - CRISPR बनाम CRISPR Cas9
CRISPR कैस सिस्टम एक माइक्रोबियल डिफेंस सिस्टम है। सीआरआईएसपीआर डीएनए अनुक्रमों का एक समूह है जिसमें पैलिंड्रोमिक शॉर्ट रिपीट, स्पेसर सीक्वेंस और संबंधित जीन शामिल हैं। कैस 9 एक कैस प्रोटीन है जो एक आरएनए निर्देशित एंडोन्यूक्लिज है। CRISPR और Cas9 प्रोटीन एक प्रतिरक्षा प्रणाली बनाते हैं जो बैक्टीरिया में बैक्टीरियोफेज संक्रमण के खिलाफ काम करती है। Cas9 प्रोटीन विदेशी वायरल डीएनए को साफ करने और उन्हें बाधित करने में सक्षम है। CrRNA वायरल डीएनए को पहचानने के लिए cas9 का मार्गदर्शन करता है। इसलिए, CRISPR cas9 प्रणाली एक प्राकृतिक प्रतिरक्षा प्रणाली है जो वायरस के खिलाफ बैक्टीरिया में पाई जाती है। इस प्रकार, यह CRISPR और CRISPR cas9 के बीच अंतर का सारांश है।