मुख्य अंतर - फ़्यूज़न बनाम टाक पोलीमरेज़
डीएनए पोलीमरेज़ आणविक जीव विज्ञान तकनीकों में व्यापक रूप से उपयोग किए जाने वाले एंजाइम हैं और उन सभी जीवों में भी स्वाभाविक रूप से मौजूद हैं जो डीएनए प्रतिकृति से गुजरते हैं। वे प्रमुख पोलीमराइजिंग एंजाइम हैं जो प्रतिकृति के दौरान शामिल होते हैं। डीएनए पोलीमरेज़ डीएनए स्ट्रैंड के मुक्त 3' छोर पर न्यूक्लियोटाइड जोड़ने में सक्षम है जिससे एक नए स्ट्रैंड का विस्तार होता है। वर्तमान में, रोग निदान और औद्योगिक अनुप्रयोगों में आणविक जीव विज्ञान के विकास के कारण, विभिन्न लाभकारी गुणों वाले पोलीमरेज़ का निर्माण करना महत्वपूर्ण है। यह विधि की सटीकता को बढ़ाता है और इसे और अधिक तेज़ तकनीक बनाता है।फ़्यूज़न और टाक पोलीमरेज़ दो व्यावसायिक रूप से उत्पादित थर्मोस्टेबल पोलीमरेज़ एंजाइम हैं जिनका उपयोग विशेष आणविक अनुप्रयोगों में किया जाता है। फ़्यूज़न एक डीएनए पोलीमरेज़ है जो पाइरोकोकस फ्यूरियोसस से अलग किया गया है और इसका उपयोग मुख्य रूप से निष्ठा बढ़ाने के लिए क्लोनिंग प्रयोगों में किया जाता है। टैक डीएनए पोलीमरेज़ पोलीमरेज़ चेन रिएक्शन (पीसीआर) में उपयोग किया जाने वाला मानक डीएनए पोलीमरेज़ है, और इसे थर्मोस्टेबल जीवाणु से अलग किया जाता है; थर्मस जलीय। दो एंजाइमों के बीच महत्वपूर्ण अंतर स्रोत सूक्ष्मजीव है। फ़्यूज़न को एक्सट्रोफाइल, पायरोकोकस फ्यूरियोसस से अलग किया जाता है, जबकि टैक पोलीमरेज़ को थर्मोफाइल, थर्मस एक्वाटिकस से अलग किया जाता है।
फ़्यूज़न क्या है?
फ़्यूज़न डीएनए पोलीमरेज़ एक नया पोलीमरेज़ है जो पाइरोकोकस फ्यूरियोसस से एंजाइम को अलग करके निर्मित होता है, जो एक एक्स्ट्रीमोफिलिक आर्किया है। ये रोगाणु अत्यधिक उच्च तापमान स्थितियों में रहते हैं, जिससे पोलीमरेज़ अत्यधिक ताप-स्थिर पोलीमरेज़ बन जाता है। पारंपरिक थर्मोस्टेबल पोलीमरेज़ पर अत्यधिक निष्ठा प्राप्त करने के लिए फ़्यूज़न पोलीमरेज़ का उपयोग किया जाता है; टाक पोलीमरेज़।फ़्यूज़न पोलीमरेज़ जीनोमिक डीएनए के 7.5kb तक के लंबे टेम्प्लेट को बढ़ाने में सक्षम है। फ़्यूज़न पोलीमरेज़ की इष्टतम पोलीमराइज़ेशन क्षमता 720 C पर है। फ़्यूज़न का उपयोग अनुक्रमण, अभिव्यक्ति विश्लेषण और उत्परिवर्तन विश्लेषण के लिए उत्पादों के क्लोनिंग में भी किया जाता है।
फ़्यूज़न डीएनए पोलीमरेज़ में 3' - 5' एक्सोन्यूक्लिज़ गतिविधि होती है। यह संश्लेषण के बाद नए संश्लेषित स्ट्रैंड के प्रूफरीडिंग की अनुमति देता है। इसलिए, न्यूक्लियोटाइड बेमेल को आसानी से ठीक किया जा सकता है। इस प्रकार, इसकी त्रुटि दर कम है। फ़्यूज़न पोलीमरेज़ के समग्र लाभ हैं;
- चरम निष्ठा
- उच्च गति और कम विस्तार समय
- मजबूत प्रतिक्रियाएं और न्यूनतम अनुकूलन की आवश्यकता है
- उच्च उपज
चित्र 01: फ़्यूज़न
फ़्यूज़न पोलीमरेज़ का मुख्य नुकसान यह है कि यह डीऑक्सीयूरिडीन ट्राइफॉस्फेट (डीयूटीपी) की उपस्थिति में बाधित होता है। जब प्रतिक्रिया मिश्रण में dUTP जमा हो जाते हैं, तो यह फ़्यूज़न पोलीमरेज़ की क्रियाओं को रोक सकता है। एंजाइम जोड़ने से पहले dUTPase के साथ प्रतिक्रिया मिश्रण का इलाज करके इसे रोका जाता है। वर्तमान में, फ़्यूज़न पोलीमरेज़ का एक dUTP प्रतिरोधी संस्करण जिसे Pfu Turbo के नाम से जाना जाता है, फ़्यूज़न पोलीमरेज़ के बजाय इस समस्या के उपाय के रूप में उपयोग किया जाता है।
ताक पोलीमरेज़ क्या है?
टाक डीएनए पोलीमरेज़ आविष्कार ने आणविक जीव विज्ञान के क्षेत्र में क्रांति ला दी है। इसने डीएनए प्रवर्धन में एक बड़ी समस्या का समाधान किया। टाक डीएनए पोलीमरेज़ एक ऊष्मा स्थिर पोलीमरेज़ एंजाइम है जिसे थर्मोफिलिक जीवाणु, थर्मस एक्वाटिकस से निकाला और अलग किया जाता है। इस एंजाइम की खोज से पीसीआर का विकास होता है। इस एंजाइम ने पारंपरिक श्रमसाध्य क्लोनिंग तकनीकों के बजाय डीएनए प्रवर्धन में पोलीमरेज़ चेन रिएक्शन के उपयोग की अनुमति दी है।पीसीआर का उपयोग अब आणविक निदान, कृषि और औद्योगिक क्षेत्रों में किया जाता है, जिसमें तकनीक में कई नए बदलाव जोड़े गए हैं।
चित्र 02: टाक पोलीमरेज़
टाक डीएनए पोलीमरेज़ 720C - 800C के बीच इष्टतम तापमान सीमा पर कार्य करता है। टाक डीएनए पोलीमरेज़ को सह-कारक की आवश्यकता होती है; इसके कार्य के लिए मैग्नीशियम। टाक पोलीमरेज़ में 3' - 5' प्रूफरीडिंग क्षमता नहीं होती है, इसलिए टाक डीएनए पोलीमरेज़ की त्रुटि दर अधिक नए प्रकार के डीएनए पोलीमरेज़ जैसे फ़्यूज़न पोलीमरेज़ आदि की तुलना में अधिक है। लेकिन, टाक डीएनए पोलीमरेज़ की लोकप्रियता बनी हुई है एंजाइम की सुविधा और लचीलेपन के कारण विज्ञान की दुनिया भर में समान है।
फ़्यूज़न और टाक पोलीमरेज़ के बीच समानताएं क्या हैं?
- फ़्यूज़न और टाक पोलीमरेज़ एंजाइम दोनों ही पोलीमराइज़िंग एंजाइम हैं जो डीएनए स्ट्रैंड के 3 'मुक्त सिरे पर न्यूक्लियोटाइड जोड़ने में सक्षम हैं।
- फ़्यूज़न और टाक पोलीमरेज़ दोनों को पोलीमराइज़ेशन आरंभ करने के लिए एक प्राइमर अनुक्रम की आवश्यकता होती है।
- फ़्यूज़न और टाक पोलीमरेज़ दोनों गर्मी स्थिर हैं।
- डीएनए को बढ़ाने के लिए पीसीआर तंत्र में फ़्यूज़न और टाक पोलीमरेज़ दोनों का उपयोग किया जाता है।
- प्रतिक्रिया मिश्रण में पोलीमरेज़ मिलाते समय, एंजाइम की दक्षता सुनिश्चित करने के लिए फ़्यूज़न और टाक पोलीमरेज़ दोनों को अंतिम रूप से जोड़ा जाता है।
- फ्यूज़न और टाक पोलीमरेज़ दोनों को आणविक जीव विज्ञान प्रयोगात्मक उद्देश्यों के लिए व्यावसायिक रूप से संश्लेषित किया जाता है।
- फ़्यूज़न और टाक पोलीमरेज़ दोनों को अपना कार्य पूरा करने के लिए एक सहकारक की आवश्यकता होती है।
फ़्यूज़न और टाक पोलीमरेज़ में क्या अंतर है?
फ़्यूज़न बनाम टाक पोलीमरेज़ |
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फ़्यूज़न एक डीएनए पोलीमरेज़ है जो पाइरोकोकस फ्यूरियोसस से अलग किया गया है और इसका उपयोग मुख्य रूप से निष्ठा बढ़ाने के लिए क्लोनिंग प्रयोगों में किया जाता है। | टाक डीएनए पोलीमरेज़ पोलीमरेज़ चेन रिएक्शन (पीसीआर) में उपयोग किया जाने वाला मानक डीएनए पोलीमरेज़ है, और इसे थर्मोस्टेबल जीवाणु, थर्मस एक्वाटिकस से अलग किया जाता है। |
स्रोत जीव | |
फ़्यूज़न एक्स्ट्रीमोफिलिक आर्किया - पायरोकोकस फ्यूरियोसस से निकाला जाता है। | ये साहित्यिक कृतियाँ उपनिवेश काल से लेकर उपनिवेश काल के अंत तक फैली हुई हैं। |
सबूत पढ़ने की क्षमता | |
फ़्यूज़न में 3' – 5' प्रूफ़ पढ़ने की क्षमता मौजूद है। | टाक पोलीमरेज़ में 3' – 5' प्रूफ पढ़ने की क्षमता अनुपस्थित है। |
निष्ठा | |
फ़्यूज़न के साथ उच्च निष्ठा है। | ताक पोलीमरेज़ कम निष्ठा दिखाता है। |
प्रवर्धन | |
फ़्यूज़न लंबे डीएनए अंशों को बढ़ाने में सक्षम है। | टाक पोलीमरेज़ बहुत छोटे डीएनए अंशों को बढ़ाने में सक्षम है। |
डीयूटीपी जहर | |
संचय विषम से फ्यूजन क्रिया बाधित होती है। | ताक पोलीमरेज़ dUPT द्वारा बाधित नहीं है। |
सारांश - फ़्यूज़न बनाम टाक पोलीमरेज़
फ़्यूज़न और टाक डीएनए पोलीमरेज़ दो ऊष्मा स्थिर पोलीमरेज़ हैं जिनका उपयोग पीसीआर तकनीकों में किया जाता है। फ़्यूज़न एक पोलीमरेज़ है जो एक्सट्रोफाइल, पायरोकोकस फ्यूरियोसस से अलग होता है जबकि, टाक थर्मोस्टेबल बैक्टीरिया थर्मस एक्वाटिकस से अलग होता है।टाक डीएनए पोलीमरेज़ की खोज पीसीआर आविष्कार की ओर ले जाती है। टाक की तुलना में फ़्यूज़न के कई फायदे हैं जिसने फ़्यूज़न को उच्च फ़िडेलिटी डीएनए के उत्पादन में एक बेहतर विकल्प बना दिया है। हालांकि, पीसीआर में टैक पोलीमरेज़ अभी भी मानक पोलीमरेज़ एंजाइम के रूप में उपयोग किया जाता है। फ़्यूज़न और टाक पोलीमरेज़ के बीच यही अंतर है।