मुख्य अंतर - इम्यूनोसाइटोकेमिस्ट्री बनाम इम्यूनोहिस्टोकेमिस्ट्री
इम्युनोसाइटोकेमिस्ट्री (आईसीसी) और इम्यूनोहिस्टोकेमिस्ट्री (आईएचसी) आणविक निदान में दो व्यापक रूप से उपयोग की जाने वाली तकनीकें हैं, जो कोशिकाओं पर मौजूद आणविक मार्करों के आधार पर गैर-संचारी रोगों और संचारी रोगों दोनों की पहचान और पुष्टि करती हैं। मुख्य अंतर इम्यूनोसाइटोकेमिस्ट्री और इम्यूनोहिस्टोकेमिस्ट्री वह अणु है जिसका उपयोग इन तकनीकों में विश्लेषण प्रक्रिया के रूप में किया जाता है। आईसीसी में, प्राथमिक और द्वितीयक एंटीबॉडी जैसे मार्करों के साथ संयुग्मित प्रतिदीप्ति का उपयोग किया जाता है जबकि आईएचसी, मोनोक्लोनल और पॉलीक्लोनल एंटीबॉडी का उपयोग नैदानिक निर्धारण के लिए किया जाता है।
इम्यूनोसाइटोकेमेस्ट्री (आईसीसी) क्या है?
आईसीसी फ्लोरोसेंट मार्कर या एंजाइम जैसे मार्करों से बंधे प्राथमिक और माध्यमिक एंटीबॉडी का उपयोग करता है और लक्ष्य कोशिकाओं पर मौजूद एंटीजन का पता लगाने के लिए एक शक्तिशाली पहचान विधि है जो या तो संक्रामक सेलुलर कण या कैंसर ट्यूमर कोशिकाएं हो सकती हैं। इम्यूनोसाइटोकेमिस्ट्री के लिए तीन प्रकार के नियंत्रणों की आवश्यकता होती है।
- प्राथमिक एंटीबॉडी - नियंत्रण जो एंटीजन के लिए बाध्यकारी प्राथमिक एंटीबॉडी की विशिष्टता को दर्शाता है
- माध्यमिक एंटीबॉडी - नियंत्रण जो दर्शाता है कि लेबल प्राथमिक एंटीबॉडी के लिए विशिष्ट है
- लेबल नियंत्रण - दिखाएँ कि लेबलिंग जोड़े गए लेबल का परिणाम है न कि अंतर्जात लेबलिंग का परिणाम।
चित्र 01: इम्यूनोसाइटोकेमिस्ट्री कोशिकाओं के भीतर अलग-अलग प्रोटीनों को लेबल करती है (यहाँ, सहानुभूति स्वायत्त न्यूरॉन्स के अक्षतंतु में टायरोसिन हाइड्रॉक्सिलस हरे रंग में दिखाए जाते हैं)।
प्राथमिक एंटीबॉडी नियंत्रण प्रत्येक नए एंटीबॉडी के लिए विशिष्ट है और प्रत्येक प्रयोग के लिए दोहराया नहीं जा सकता है। द्वितीयक एंटीबॉडी नियंत्रण प्रयोग में प्रयुक्त प्राथमिक एंटीबॉडी के आधार पर डिज़ाइन किया गया है और प्रत्येक प्रयोग के साथ शामिल किया गया है। लेबलिंग नियंत्रण को शामिल किया जाता है यदि प्रक्रिया की एक शर्त बदल दी जाती है, नमूना बदल दिया जाता है, या जब अनपेक्षित लेबलिंग मिलती है।
आईसीसी के दो मुख्य अनुप्रयोग रेडियो इम्यूनो - परख (आरआईए) और एंजाइम लिंक्ड इम्यूनोसॉर्बेंट परख (एलिसा) हैं। उपयोग की जाने वाली सबसे आम एंटीबॉडी इम्युनोग्लोबुलिन जी है।
इम्यूनोहिस्टोकेमिस्ट्री (IHC) क्या है?
इम्यूनोहिस्टोकेमिस्ट्री में, स्रोत के नमूने में मोनोक्लोनल और पॉलीक्लोनल एंटीबॉडी होते हैं ताकि विदेशी कोशिकाओं में एंटीजन की उपस्थिति का निर्धारण किया जा सके।यह तकनीक एंटीजन-एंटीबॉडी बाइंडिंग की विशिष्ट प्रतिक्रिया पर आधारित है। पता लगाने में प्रयुक्त एंटीबॉडी को विभिन्न मार्करों के साथ टैग किया जा सकता है; वे प्रतिदीप्ति मार्कर, रेडिओलेबेल्ड मार्कर या रासायनिक मार्कर हो सकते हैं। एंटीजन और लक्षित एंटीबॉडी के बीच इन विट्रो बाइंडिंग की सुविधा के माध्यम से, एक कोशिका के एक विशेष प्रोटीन की उपस्थिति या अनुपस्थिति का निर्धारण किया जा सकता है।
चित्र 02: सीडी10 के साथ सामान्य किडनी का इम्यूनोहिस्टोकेमिकल धुंधला हो जाना
वर्तमान में, वैज्ञानिक कोशिकाओं में मौजूद विशिष्ट एंटीजन के लिए लक्ष्य एंटीबॉडी विकसित करने में शामिल हैं जो या तो घातक ट्यूमर कोशिकाओं या एचआईवी जैसे संक्रामक एजेंटों में मौजूद एंटीजन के रूप में विकसित हो सकते हैं।
इम्यूनोसाइटोकेमेस्ट्री और इम्यूनोहिस्टोकेमिस्ट्री के बीच समानताएं क्या हैं?
- प्रतिक्रियाएं ICC और IHC में अत्यधिक विशिष्ट और सटीक हैं।
- आईसीसी और आईएचसी के अनुप्रयोगों में कैंसर और संक्रामक रोग निदान शामिल हैं।
- बाँझ स्थितियों को दोनों स्थितियों में बनाए रखा जाना चाहिए, और इन विट्रो में प्रदर्शन किया जाना चाहिए
- दोनों तकनीक प्रतिलिपि प्रस्तुत करने योग्य परिणाम प्रदान करती हैं।
- दोनों तेज हैं।
- रेडियो लेबलिंग, प्रतिदीप्ति तकनीक का उपयोग ICC और IHC दोनों में पता लगाने के तरीकों के रूप में किया जाता है।
- दोनों एंटीजन-एंटीबॉडी पेयरिंग पर आधारित हैं।
इम्यूनोसाइटोकेमिस्ट्री और इम्यूनोहिस्टोकेमिस्ट्री में क्या अंतर है?
इम्युनोसाइटोकेमिस्ट्री (आईसीसी) बनाम इम्यूनोहिस्टोकेमिस्ट्री (आईएचसी) |
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आईसीसी फ्लोरोसेंट मार्कर या एंजाइम जैसे प्राथमिक और द्वितीयक एंटीबॉडी बाध्य मार्करों का उपयोग करता है और लक्ष्य कोशिकाओं पर मौजूद एंटीजन का पता लगाने के लिए एक शक्तिशाली पहचान विधि है। | IHC एक ऐसी विधि है जो एंटीजन की उपस्थिति का निर्धारण करने के लिए मोनोक्लोनल और पॉलीक्लोनल एंटीबॉडी का उपयोग करती है जो कोशिका सतहों पर विशेष प्रोटीन मार्कर होते हैं। |
नमूना स्रोत | |
ऊतक से प्राप्त नमूने जिन्हें हिस्टोलॉजिकल रूप से पतले वर्गों में संसाधित किया गया है, आईसीसी में उपयोग किए जाते हैं। | IHC एक मोनोलेयर में विकसित कोशिकाओं या निलंबन में कोशिकाओं से युक्त नमूनों का उपयोग करता है जो एक स्लाइड पर जमा होते हैं। |
नमूना प्रसंस्करण | |
आईसीसी में, कोशिकाओं को इंट्रासेल्युलर लक्ष्यों में एंटीबॉडी प्रवेश की सुविधा के लिए पारगम्य होना चाहिए। | IHC में, कोशिकाओं को धुंधला होने से पहले फॉर्मेलिन-फिक्स्ड, पैराफिन-एम्बेडेड किया जाता है। |
सारांश – इम्यूनोसाइटोकेमिस्ट्री बनाम इम्यूनोहिस्टोकेमिस्ट्री
आणविक निदान का उपयोग कोशिकाओं पर मौजूद आणविक मार्करों के आधार पर गैर-संचारी रोगों और संचारी रोगों दोनों की पहचान और पुष्टि करने के लिए किया जाता है। आणविक मार्कर प्रोटीन या डीएनए या आरएनए के अनुक्रम हो सकते हैं; ICC और IHC जैसी तकनीकों के विकास ने वैज्ञानिकों के लिए प्रारंभिक अवस्था में बीमारी और उसके कारण की पहचान करने का मार्ग प्रशस्त किया है। ICC और IHC दोनों एंटीबॉडी और एंटीजन के बीच विशिष्ट प्रतिक्रियाओं पर निर्भर करते हैं, हालांकि नमूना स्रोत। इम्यूनोसाइटोकेमिस्ट्री और इम्यूनोहिस्टोकेमिस्ट्री के बीच मुख्य अंतर दो प्रक्रियाओं का नमूना प्रसंस्करण है।
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